集胞藻6803基因组DNA提取方法的比较
2016-01-21陈雪峰焦文冬马文锦孙玉姣
陕西科技大学学报 2016年1期
陈雪峰, 焦文冬, 刘 宁, 马文锦, 孙玉姣
(陕西科技大学 食品与生物工程学院, 陕西 西安 710021)
集胞藻6803基因组DNA提取方法的比较
陈雪峰, 焦文冬, 刘宁, 马文锦, 孙玉姣
(陕西科技大学 食品与生物工程学院, 陕西 西安710021)
摘要:比较了PVP法、CTAB法和SDS法对集胞藻6803(Synechocystis sp.PCC6803)基因组DNA的提取效果,并采用紫外-可见分光光度计、琼脂糖凝胶电泳及PCR扩增检测基因组DNA质量.结果表明,三种方法均能提取到符合分子生物学要求的基因组DNA,其中SDS法提取的DNA综合质量最高.以提取的基因组DNA为模板,以sll0853引物进行PCR扩增,三种方法均能扩增出目的条带,其中CTAB法及SDS法的条带更为清晰.
关键词:集胞藻6803; 基因组DNA提取; PCR扩增
0引言
集胞藻属于蓝藻门、蓝藻纲、色球藻目、色球藻科集胞藻属,是一种生活在淡水中的单细胞蓝藻.其光合作用与高等植物类似,即吸收光能转化成CO2和水,生成有机化合物并释放氧气,也能利用葡萄糖等物质进行异养生长[1].
近年来,随着分子生物学技术的快速发展,集胞藻等一些研究较多的蓝藻已成为分子生物学和基因工程研究中的重要模式生物,广泛应用于异形胞的发育、光合作用、固氮作用和外源基因的表达等方面的研究,并且越来越多的基因在蓝藻中都得到了表达[2-5].集胞藻作为光合作用的模式生物,具有很高的光合效率.发状念珠藻是一种具有很高营养价值和经济价值的可食用丝状蓝藻,若将集胞藻的高光合作用系统转入食用发状念珠藻中并有效表达,得到具……
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