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不同部位取样对鸡基因组DNA提取的效果的影响

2016-01-10李龙飞汉丽梅李一帆Rabie

饲料工业 2016年8期

■李龙飞 汉丽梅 李一帆 T.Rabie

(1.沈阳农业大学,辽宁沈阳 110161;2.Suez Canal University,Faculty of Agriculture Ismailia,Egypt)

样品的采集和DNA的提取是科学研究中重要的技术之一,特别是对于一些取样比较困难的研究对象,如稀有的动物或保护类动物,常用的取样方法有3种,即伤害性取样、非伤害性取样和非损伤性取样[1]。伤害性取样即通过杀死动物而获得新鲜的肌肉、肝脏和血液等组织样品;非伤害性取样是通过捕获动物来抽取血液、采集毛发或羽毛、耳、尾、趾等样品;非损伤性取样法即在不触及或伤害动物本身的情况下,通过收集脱落的毛发或羽毛、粪便、尿液、食物残渣、鹿角、鱼鳞和卵壳等不同形式的样品进行遗传分析的一种取样方法[2]。自1975年Bradfied等成功地从头发中提取DNA以来,毛发已成为法医学、遗传学常用的检测材料之一[3],它具有无创伤性、取材痛苦小、运输和储存方便、可靠、重复性高等优点[4]。粪便样品中含有大量的食物残渣及各种消化道成分,因此粪便中提取DNA要比血液和组织中困难得多,所以此法仅用于濒危动物[5]。

目前,鸡的DNA提取多采用血液样品,而对于羽毛样品基因组DNA提取少见详细报道。本研究通过对血液、肝脏和羽毛不同部位的样品进行不同程序的处理,并对提取基因组DNA进行了应用效果的分析,获得了有效且伤害性小的方案,可用于提取高质量的基因组DNA,为禽类分子生物学方面的研究提供更广阔的样本来源和技术方法。

1 材料与方法

1.1 试验动物

1.2 试剂与仪器

1.2.1 仪器

日立U-1800紫外可见分光光度计(日本日立公司)、Tanon EPS300电泳仪(上海天能科技有限公司)、专业数码凝胶成像与分析系统(江苏省捷达科技发展有限公司)。……

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