南瓜多糖对D-半乳糖致脑老化模型小鼠SOD、CAT、GSH-PX、MDA的影响

2016-01-09高鹏,颜国华

吉林中医药 2015年7期

高鹏，颜国华

(郑州澍青医学高等专科学校,郑州 450064)

摘要：目的探讨南瓜多糖对D-半乳糖致脑老化模型小鼠SOD、CAT、GSH-PX、MDA的影响。方法将小鼠随机分为6组,分别为空白组、模型组、维生素E组，南瓜多糖大、中、小剂量组。空白组每鼠每天颈背部皮下注射生理盐水0.5 mL，其余各组每鼠每天颈背部皮下注射5%D-半乳糖生理盐水液0.5 mL造脑老化模型,连续给D-半乳糖45 d。从第10天开始，分别灌服大、中、小剂量南瓜多糖水溶液、维生素E混悬液和同体积生理盐水,1次/d，连续35 d，于最后1次给D-半乳糖和灌药后2 h，小鼠眼球取血，测定SOD、CAT、GSH-PX、MDA。结果与模型组相比，南瓜多糖大剂量组可显著提高小鼠SOD活力(P<0.01)，南瓜多糖中、小剂量组可明显提高小鼠SOD活力(P<0.05)；南瓜多糖大剂量组可明显提高小鼠CAT活力(P<0.05);南瓜多糖大、中、小剂量组均可显著提高小鼠GSH-PX活力(P<0.01);与模型组相比，南瓜多糖大、中、小剂量组均可显著降低小鼠血浆、肝匀浆中MDA水平(P<0.01);南瓜多糖中、小剂量组均可显著降低小鼠脑匀浆中MDA水平(P<0.01),南瓜多糖大剂量组可明显降低小鼠MDA水平(P<0.05)。结论南瓜多糖能够提高SOD、CAT、GSH-PX活力，降低MDA水平，具有一定的抗氧化作用。

关键词：南瓜多糖；D-半乳糖；脑老化；小鼠

DOI::10.13463/j.cnki.jlzyy.2015.07.020

中图分类号：R339.3文献标志码： A

文章编号：1003-5699(2015)07-0713-03

基金项目:郑州澍青医学高等专科学校重点课题(12002)。

作者简介:高鹏(1982-)，男，大学本科，讲师，主要从事基础中医学的教学与研究工作。

收稿日期:(责任编辑：张瑞彬2014-10-25)

Effect of Pumpkin polysaccharide on SOD,CAT,GSH-PX and MDA in

aging mice model induced by D-galactose

GAO Peng,YAN Guohua

(Zhengzhou Shuqing Medical College,Zhengzhou 450064,China)

Abstract:ObjectiveTo observe the effect of Pumpkin polysaccharide on SOD，CAT，GSH-PX and MDA in aging mice model induced by D-galactose.MethodMice were randomly divided into 6 groups,respectively for the blank group,model group,vitamin E,pumpkin polysaccharide large,medium and small dose group.Blank group each rat cervical back subcutaneous injection of saline every day 0.5ml,groups each rat carotid every day back subcutaneous injection of 5% D-galactose saline solution 0.5 mL brain aging model.Straight to the D-galactose 45 days.Starting from the 10 th day,filling and respectively take large,medium and small dose of pumpkin polysaccharide aqueous solution mixed suspension,vitamin E and with normal saline,volume 1 times a day,35 days in a row,in the last one to D-galactose and 2 h after feeding,eyeball blood in mice,the determination of SOD,CAT and GSH-PX and MDA.ResultsCompared with model group,the pumpkin polysaccharide large dose group can significantly increase the SOD activity in mice (P<0.01),the pumpkin polysaccharide,small dose group can obviously increase the SOD activity in mice (P<0.05);Pumpkin polysaccharide large dose group can obviously improve the CAT activity in mice (P<0.05);Large,medium and small dose group of the pumpkin polysaccharide can significantly increase gsh-px activity in mice (P<0.01);Compared with model group,large,medium and small dose group of the pumpkin polysaccharide can significantly decrease the MDA level in plasma,liver homogenate in mice (P<0.01);Pumpkin polysaccharide in medium and small dose group can significantly reduce the little mouse brain homogenate MDA level (P<0.01),pumpkin polysaccharide large dose group can obviously reduce the level of MDA in mice (P<0.05).ConclusionPumpkin polysaccharide could improve vitality of SOD,CAT,GSH-PX,and reduce the level of MDA,it had a certain antioxidant.

Keywords:Pumpkin polysaccharide;D-galactose;laneuria;rat

南瓜是葫芦科南瓜属植物南瓜的果实，营养全面，临床具有多种药用价值[1]。南瓜多糖是南瓜有效成分中重要的活性物质，近年来研究证实[2]，南瓜多糖在降糖、降血脂、抗肿瘤及免疫调节等方面具有明显的药理作用,本研究主要从南瓜多糖对D-半乳糖致脑老化模型小鼠超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)的影响方面进行研究，旨在探讨南瓜多糖对衰老小鼠自由基代谢的影响。

1材料与方法

1.1药品及试剂南瓜多糖，西安天园生物制剂厂生产，批号20100624;维生素E，郑州龙生化工产品有限公司生产，批号20111042；D-半乳糖，上海安妍生物有限公司生产，批号20120708；三氯乙酸(分析纯)，郑州中天实验仪器有限公司，批号20120207;肝素钠，山东省泰安新泰市朝阳生化研究所，批号20131106；生理盐水，四川科伦药业股份有限公司，批号12030601；SOD检测试剂盒，艾美捷科技有限公司生产，批号20130721；MDA检测试剂盒，艾美捷科技有限公司生产，批号20130812；CAT检测试剂盒，艾美捷科技有限公司生产，批号20130713；GSH-Px检测试剂盒，艾美捷科技有限公司生产，批号20131102。

1.2仪器UV-2000紫外可见分光光度计，尤尼柯(上海)仪器有限公司生产。

1.3动物小鼠，KM种，雌雄各半，体质量19～22 g，山东鲁抗医药股份有限公司实验动物室，生产许可证号：SCXK(鲁)20130001。

1.4方法取KW种小鼠60只,随机分为6组(雌雄分笼饲养)，分别为空白组、模型组、维生素E组、南瓜多糖高、中、低剂量组。空白组每鼠每天颈背部皮下注射生理盐水0.5 mL，其余各组每鼠每天颈背部皮下注射5% D-半乳糖生理盐水液0.5 mL造脑老化模型[3]。小鼠每周称重1次，调整给药量，连续给D-半乳糖45 d。从第10天开始，分别灌服高、中、低剂量南瓜多糖水溶液(0.6、0.4、0.2 g/kg，取南瓜多糖用生理盐水配制，0.2 mL/10 g)、维生素E混悬液(0.09 g/kg，用0.5%CMC配制，0.2 mL/10 g)和同体积生理盐水，1次/d，连续35 d，于最后1次给D-半乳糖和灌药后2 h，小鼠眼球取血置于备好的肝素抗凝管中抗凝，分取部分全血液测GSH-Px、CAT，剩余血液离心取血浆测SOD、MDA，将小鼠处死，取脑、肝，生理盐水制成10%脑、肝匀浆，测MDA。上述测定方法均严格按照各自的试剂盒说明书进行。

2实验结果

2.1南瓜多糖对脑老化模型小鼠血中SOD、CAT、GSH-PX活力的影响见表1。

表1　南瓜多糖对脑老化模型小鼠血中SOD、CAT、GSH-PX活力的影响

注：与模型组相比，#P<0.05，##P<0.01

2.2南瓜多糖对脑老化模型小鼠血浆、脑匀浆、肝匀浆中MDA含量的影响见表2。

表2　南瓜多糖对脑老化模型小鼠血浆、脑匀浆、肝匀浆中MDA含量的影响　nmol/mgprot

注：与模型组相比，#P<0.05,##P<0.01

3结论

早在二十世纪五六十年代，有学者提出了关于氧化自由基的学说[4]，该学说认为机体在代谢过程中，能够不断产生自由基，同时机体又存在自由基清除系统[5]，比如SOD和GHS-PX等抗氧化酶，上述物质的存在可以对抗和消除自由基的损伤，使机体自由基保持正常水平[6]。研究[7]表明,SOD是体内重要的抗氧化酶，能清除超氧阴离子自由基，保护细胞免受损伤。组织中存在的CAT,可随时使氧化变性的大分子还原恢复功能[8]，在细胞核中也存在着DNA修复酶，另一方面是对自由基强氧化物的消除机制[9]。GSH-Px是机体内广泛存在的一种重要的催化H2O2分解的酶，它也可以保护细胞膜结构和功能免受H2O2的氧化损伤[10],而MDA是机体中细胞膜受到氧自由基的攻击、细胞膜中的多不饱和脂肪酸发生脂质过氧化作用的产物[11]，可反映机体内脂质过氧化的程度，间接地反映出细胞损伤的程度[12]。

南瓜为葫芦科植物南瓜的果实，具有补中益气、消炎止痛、解毒杀虫之功效[13]。近年来有报道显示南瓜具有抗衰老作用[14]，因此，在本实验中，我们观察了南瓜多糖对脑老化模型小鼠自由基的影响。实验结果显示，南瓜多糖高剂量组可显著提高小鼠SOD活力(P<0.01)，南瓜多糖中、低剂量组可明显提高小鼠SOD活力(P<0.05)；南瓜多糖高剂量组可明显提高小鼠CAT活力(P<0.05)；南瓜多糖高、中、低剂量组均可显著提高小鼠GSH-PX活力(P<0.01)；南瓜多糖高、中、低剂量组均可显著降低小鼠血浆、肝匀浆中MDA水平(P<0.01)；南瓜多糖中、低剂量组均可显著降低小鼠脑匀浆中MDA水平(P<0.01),南瓜多糖高剂量组可明显降低小鼠MDA水平(P<0.05)。上述实验提示，南瓜多糖对脑老化模型小鼠自由基确实有一定影响,具有抗氧化、延缓衰老作用，有利于中药抗衰老领域的进一步研究。

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