香烟提取物对大鼠血管内皮细胞的损害

朱涛李锋1严飞刘正霍强

(新疆医科大学第一附属医院心脏外一科，新疆乌鲁木齐830011)

摘要〔〕目的探究香烟提取物(CSE)对大鼠血管内皮细胞(VEC)的影响。方法利用原代培养的方法获得大鼠主动脉VEC(RVEC)，采用不同浓度的CSE处理RVEC，分别用MTT和流式细胞仪来检测三组细胞的增殖和凋亡情况，并检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放情况。同时，采用双抗体夹心ELISA法检测细胞分泌的肿瘤坏死因子(TNF)-α、基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-2、MMP-3和MMP-10的情况。结果MTT实验中，与0.05%组相比，0.5%浓度组的细胞生长显著变慢(P<0.05)，且这种抑制作用呈现剂量依赖性。LDH释放结果显示，与0.05%组相比，20%浓度的CSE处理可导致细胞LDH释放显著升高(P<0.01)，且随着CSE浓度的进一步升高，LDH释放逐渐增多。经过24 h后，CSE处理后的细胞凋亡逐渐增多，差异明显(P<0.01)。而对于细胞分泌的TNF-α、MMP-1、MMP-2、MMP-3和MMP-10含量，CSE干预组均比对照组明显增加(P<0.01)。结论CSE可以明显抑制RVEC的生长，加剧其凋亡，并促进细胞分泌TNF-α、MMP-1、MMP-2、MMP-3和MMP-10的能力。

关键词〔〕香烟提取物；血管内皮细胞；细胞增殖；细胞凋亡；肿瘤坏死因子α

中图分类号〔〕R73〔文献标识码〕A〔

通讯作者：霍强(1967-)，男，硕士生导师，副教授，主任医师，主要从事心胸外科学研究。

1伊犁州友谊医院心血管介入科

第一作者：朱涛(1979-)，男，硕士，主治医师，主要从事心胸外科学研究。

血管壁异常主要指血管内皮细胞(VEC)损伤，是造成急性冠脉事件的重要原因，也是糖尿病肾病等疾病发生的共同病理环节。香烟及其烟雾中含有上千种化合物和有毒物质，都具有刺激性和潜在致癌性。吸烟是诸多血管缺血性疾病如动脉硬化闭塞、血栓闭塞性脉管炎等疾病的重要危险因素〔1～6〕，本研究通过检测香烟提取物(CSE)对原代培养的大鼠主动脉VEC(RVEC)内皮细胞的损伤，探讨此类疾病的发生机制。

1材料与方法

1.1材料DMEM培养基、胎牛血清、胰蛋白酶、青、链霉素和磷酸盐缓冲液(PBS)均购自HyClone公司；二甲基亚砜(DMSO)、四甲基偶氮唑盐(MTT)、溴化丙啶(PI)购于Sigma公司；……