肺腺癌中MEL-18、DESTRIN和血管内皮生长因子表达及相关性

王再红

(秦皇岛市海港医院呼吸内科，山东秦皇岛066000)

摘要〔〕目的检测肺腺癌中MEL-18、细胞骨架蛋白(DESTRIN)和血管内皮生长因子(VEGF)表达，探讨三者表达的关系及临床意义。方法肺腺癌的组织及临床资料99例作为观察组，收集距肿物边缘>5 cm的正常肺组织70例作为对照组。采用免疫组化方法检测两组中MEL-18、DESTRIN和VEGF的表达。结果观察组中MEL-18表达的阳性率明显低于对照组，而DESTRIN和VEGF表达的阳性率均明显高于对照组，观察组中MEL-18、DESTRIN和VEGF表达的阳性率与肿瘤的最大径、淋巴结转移、脉管内癌栓、临床分期、Ki67的表达均密切相关。相关性分析显示观察组中MEL-18和VEGF的表达具有负相关性，而DESTRIN和VEGF 的表达具有正相关性。结论肺腺癌中MEL-18低表达、DESTRIN和VEGF高表达，三者具有协同作用，共同促进肿瘤的发生和进展。MEL-18具有抑制血管生成的作用，DESTRIN可能具有促进血管生成的作用，二者的作用可能均通过介导VEGF的作用实现。

关键词〔〕肺腺癌；(MEL)-18；DESTRIN；血管内皮生长因子(VEGF)；免疫组化

中图分类号〔〕R734.2〔

第一作者：王再红(1973-)，女，副主任医师，主要从事呼吸内科疾病研究。

肺腺癌具有腺样分化或有黏液产生，表现为腺泡样、乳头样、细支气管肺泡样，具有黏液形成的实性巢或者以上述形态混合生长的恶性上皮性肿瘤常见于中老年人〔1〕。肺腺癌在发展过程中多种蛋白表达失常〔2〕。MEL-18属于PCG家族的成员，可以抑制C-myc的表达，引起肿瘤的衰老和凋亡，抑制肿瘤的形成〔3,4〕。DESTRIN在正常组织中表达极少，在肿瘤中的表达升高，对细胞的迁移、黏附和形态改变有重要价值〔5,6〕。血管内皮生长因子(VEGF)对肿瘤和新生组织中的血管形成有重要价值〔7,8〕。本实验对肺腺癌中MEL-18、细胞骨架蛋白(DESTRIN)和VEGF的表达进行检测，关注其相关性。

1资料与方法

1.1一般资料2011年1月至2013年12月我院行肺腺癌根治手术的患者99例作为观察组，男45例，女54例；年龄53～80岁，中位年龄68岁。收集距肿物边缘>5 cm的正常肺组织70例作为对照组，男35例，女35例；年龄54～79岁，中位年龄67岁。两组一般临床资料无明显差别，具有可比性。

1.2MEL-18、DESTRIN和VEGF的检测方法MEL-18和VEGF蛋白的浓缩液均购自北京博奥森生物技术公司，DESTRIN蛋白的浓缩液购自美国ABCAM公司。MEL-18、DESTRIN和VEGF在正式实验前进行预实验，选择最理想表达的浓度用于正式实验。MEL-18、DESTRIN和VEGF的表达应用免疫组化En Vision 二步法，DAB染色。严格按说明书操作，均由病理科技师操作完成，严格质量控制，减少误差。

1.3MEL-18、DESTRIN和VEGF表达的判定方法MEL-18的阳性表达部位是细胞核，DESTRIN和VEGF阳性表达部位是细胞质和(或)细胞膜，计数5个400倍视野，取平均值，以阳性率≥5%为阳性，<5%为阴性。

1.4统计学方法应用SAS6.12软件进行χ2检验和线性相关分析。

2结果

2.1观察组和对照组中MEL-18、DESTRIN和VEGF表达阳性率的比较与对照组比较，观察组中MEL-18低表达、DESTRIN和VEGF高表达(P<0.000 1)。见表1。

表1两组中MEL-18、DESTRIN和VEGF表达阳性率的比较〔n(%)〕

组别nMEL-18DESTRINVEGF观察组9930(30.30)73(73.74)80(80.81)对照组7065(92.86)11(15.71)15(21.43)χ2值65.189355.223458.7405P值<0.0001<0.0001<0.0001

2.2观察组MEL-18、DESTRIN和VEGF表达阳性率与临床病理特征的关系观察组MEL-18、DESTRIN和VEGF表达阳性率与肿瘤的最大径、淋巴结转移、脉管内癌栓、临床分期和Ki67的表达均密切相关。见表2。

表2观察组MEL-18、DESTRIN和VEGF表达阳性率与临床病理特征的关系〔n(%)〕

分组nMEL-18DESTRINVEGF最大径 <5cm4820(41.67)31(64.58)34(70.83) ≥5cm5110(19.61)42(82.35)46(90.20) χ2值5.69694.03195.9777 P值0.01700.04460.0145临床分期 Ⅰ+Ⅱ5221(40.28)33(63.46)37(71.15) Ⅲ+Ⅳ479(19.15)40(85.11)43(91.49) χ2值5.27115.97246.5827 P值0.02170.01450.0103脉管内癌栓 无7126(36.62)48(67.61)53(74.65) 有284(14.29)25(89.29)27(96.43) χ2值4.74264.87396.1426 P值0.02940.02730.0132Ki67表达 <253918(47.50)22(56.41)25(64.10) ≥256012(20.00)51(85.00)55(91.67) χ2值8.48539.976411.5796 P值0.00360.00160.0007淋巴结转移 无5924(40.68)38(64.41)43(72.88) 有406(15.00)35(87.50)37(92.50) χ2值7.44216.56485.9162 P值0.00640.01040.0150

2.3观察组MEL-18、DESTRIN和VEGF表达的相关性观察组MEL-18和VEGF(r=-0.54，P=0.013 2)的表达具有负相关性，DESTRIN和VEGF (r=0.50，P=0.019 6)的表达具有正相关性。

3讨论

肺腺癌为气道上皮或肺泡上皮来源的肿瘤，在形成肿瘤中常经历表型转换，使同一肿瘤内部常可以见到多种形态和结构〔9,10〕。在此过程中，多种基因和蛋白进行调节。MEL-18基因位于17号染色体长臂1区2带，其编码的蛋白质包含3个功能域，即位于氨基酸末端的环指结构、中间部位的HTH螺旋结构和羧基末端的富含脯氨酸和丝氨酸的PS结构域〔11,12〕。研究显示MEL-18可以直接抑制CylcinD2的活性，抑制CyclinD2与CDK复合物结合，阻止细胞周期由G1期向S期转化〔13〕。也有观点认为MEL-18对HOX基因有明显的转录阻遏作用〔14〕。还有观点认为MEL-18可能对干细胞活性有一定抑制作用，进而抑制干细胞的繁殖和分化，使肿瘤细胞的增生停滞，发挥抑制肿瘤的作用〔15〕。因此MEL-18可能是一个多向性抑癌作用，能通过不同通路发挥作用〔16〕。DESTRIN基因定位于20p12.1，是肌动蛋白的结合蛋白，在一定条件下可以调节actin的解聚和重构，引起肿瘤细胞迁移能力增加〔17,18〕。也有研究显示DESTRIN可以引起上皮细胞的过度增殖和新生血管的形成〔19,20〕。VEGF是最常见的血管生成促进因子，其引起血管新生的能力强，作用迅速。在肿瘤中，血管生成是其生长中的一个重要事件，不仅可以直接引起肿瘤的生长，还对脉管播散有重要作用。目前研究认为VEGF的影响因素研究较多，也说明VEGF在作用过程中不是单独进行调节的，而是形成的强大的级联反应，血管生成在此调节过程中形成动态平衡〔21,22〕。

本实验结果提示MEL-18、DESTRIN、VEGF三者异常表达均为促进肿瘤发生的重要因素；三者表达失调是肿瘤快速生长的重要因素；三者均为促进肿瘤淋巴道迁移的重要因素；三者异常表达后引起细胞增殖失调，此时肿瘤恶性程度明显升高，增殖活跃，细胞的异型性大，预后差。由于脉管内癌栓、临床分期和Ki67的表达均与患者的预后相关，因此联合检测MEL-18、DESTRIN和VEGF的表达可能对判断预后有一定帮助。三者以VEGF为中心，具有一定的协同作用。MEL-18、DESTRIN在调节肿瘤进程的过程中对VEGF的表达有影响，因此MEL-18、DESTRIN可能是调节血管生成的重要因子。MEL-18对肿瘤的抑制作用与对VEGF的作用具有相似性，这使MEL-18的机制更复杂。DESTRIN在促进肿瘤发生及迁移过程中引起血管生成，使肿瘤的体积增大更迅速，肿瘤的异型增生更强。DESTRIN和VEGF在作用过程中均可以促进肿瘤的增殖，使肿瘤细胞活化，失控性增生明显，细胞处于高繁殖期，肿瘤生长快。

4参考文献

1Piperdi B,Merla A,Perez-Soler R.Targeting angiogenesis in squamous non-small cell lung cancer〔J〕.Drugs,2014；74(4):403-13.

2Kim JW,Koh Y,Kim DW,etal.Clinical implications of VEGF,TGF-β1,and IL-1β in patients with advanced non-small cell lung cancer〔J〕.Cancer Res Treat,2013;45(4):325-33.

3王尉,胡卫列,吕军,等.MEL-18在前列腺癌中的临床意义〔J〕.实用癌症杂志,2011;26(2):115-8.

4何汀,陈明,章宜芬,等.MEL-18在人膀胱尿路上皮肿瘤组织中的表达及意义〔J〕.现代医学,2010;38(3):212-6.

5Desmarais V,Yamaguchi H,Oser M,etal.N-WASP and cortactin are involved in invadopodium-dependent chemotaxis to EGF in breast tumor cells〔J〕.Cell Motil Cytoskeleton,2009;66(6):303-16.

6Horita Y,Ohashi K,Mukai M,etal.Suppression of the invasive capacity of rat ascites hepatoma cells by knockdown of Slingshot or LIM kinase〔J〕.J Biol Chem,2008;283(10):6013-21.

7Fu L,Chen W,Guo W,etal.Berberine targets AP-2/hTERT,NF-κB/COX-2,HIF-1α/VEGF and cytochrome-c/caspase signaling to suppress human cancer cell growth〔J〕.PLoS One,2013;8(7):e69240.

8Tang XP,Li J,Yu LC,etal.Clinical significance of survivin and VEGF mRNA detection in the cell fraction of the peripheral blood in non-small cell lung cancer patients before and after surgery〔J〕.Lung Cancer,2013;81(2):273-9.

9Zhang L,Ge W,Hu K,etal.Endostar down-regulates HIF-1 and VEGF expression and enhances the radioresponse to humanlung adenocarcinoma cancer cells〔J〕.Mol Biol Rep,2012;39(1):89-95.

10Rohrer Bley C,Orlowski K,Furmanova P,etal.Regulation of VEGF-expression by patupilone and ionizing radiation in lung adenocarcinoma cells〔J〕.Lung Cancer,2011;73(3):294-301.

11张振伟,蒋仲敏.MEL-18 mRNA在食管鳞癌中的表达及其临床意义〔J〕.山东大学学报(医学版),2012;50(2):78-81.

12陆有为,郭伟剑,李进.MEL-18 mRNA在胃癌中的表达及其临床意义〔J〕.中国癌症杂志,2009;19(6):423-5.

13邹艳芳,田永,徐峰.BMI-1和MEL-18基因在大肠癌组织中的表达及意义〔J〕.世界华人消化杂志,2013;21(5):397-402.

14田永,邹艳芳,徐峰.大肠癌组织中MINA53和MEL-18蛋白的表达〔J〕.郑州大学学报(医学版),2013;48(6):780-2.

15Guo BH,Zhang X,Zhang HZ,etal.Low expression of Mel-18 predicts poor prognosis in patients with breast cancer〔J〕.Ann Oncol,2010;21(12):2361-9.

16Lee JY,Jang KS,Shin DH,etal.Mel-18 negatively regulates INK4a/ARF-independent cell cycle progression via Akt inactivation in breast cancer〔J〕.Cancer Res,2008;68(11):4201-9.

17苏坚,颜鸿飞,周钰娟,等.结肠癌中DESTRIN表达及临床病理学意义〔J〕.临床与实验病理学杂志,2013;29(7):713-5.

18吴勇军,唐仪,李争,等.DESTRIN在胃癌中表达的临床病理意义〔J〕.中国医学工程,2011;19(7):6-8.

19苏坚,史玲,周钰娟,等.DADS通过RAC1-ADF/COFILIN1通路抑制结肠癌SW480细胞迁移与侵袭〔J〕.中国肿瘤临床,2013;40(14):815-8.

20Cursiefen C1,Ikeda S,Nishina PM,etal.Spontaneous corneal hem- and lymphangiogenesis in mice with destrin-mutation depend on VEGFR3 signaling〔J〕.Am J Pathol,2005;166(5):1367-77.

21Margaritescu C,Cernea D,Georgescu CC,etal.VEGF,CD105 and α-SMA immunoexpression study in lips squamous cell carcinomas and associated dysplastic lesions〔J〕.Rom J Morphol Embryol,2014;55(1):35-41.

22Cha N,Lv M,Zhao YJ,etal.Diagnostic utility of VEGF mRNA and SP1 mRNA expression in bronchial cells of patients with lung cancer〔J〕.Respirology,2014;19(4):544-8.

〔2013-09-08修回〕

(编辑苑云杰)