吉日木松汤的薄层色谱鉴别

2015-12-24乌丽雅苏

中国医药指南 2015年5期

关键词：锁阳脯氨酸薄层

乌丽雅苏

（内蒙古阿拉善盟食品药品化妆品检验检测中心，内蒙古巴彦浩特 750306）

吉日木松汤的薄层色谱鉴别

乌丽雅苏

（内蒙古阿拉善盟食品药品化妆品检验检测中心，内蒙古巴彦浩特 750306）

目的建立吉日木松汤薄层色谱鉴别方法。方法以脯氨酸对照品及锁阳、甘草次酸及甘草作为对照，采用TLC鉴别方法。结果该方法提取完全，斑点清晰，分离理想。经空白试验证明：其他味药对结果无干扰。结论吉日木松汤中锁阳和甘草的薄层鉴别实验操作简便，无阴性干扰，重现性好，斑点清晰，专一性强，结果满意，可以作为蒙药吉日木松汤的薄层鉴别方法。

吉日木松汤；薄层色谱法；锁阳；甘草

吉日木松汤为用于健胃，止反酸，呕吐，尤其用于妊娠呕吐的复方制剂。该方为汤剂剂型，处分由粳米，甘草，锁阳，冰糖四味药组成。处方中除了粳米（制）、冰糖外，其余二味药材均在《中国药典》2005年版一部有收载。

为提高民族药的内在质量，建立了吉日木松汤中锁阳和甘草的薄层鉴别的方法。该法操作简便，无阴性干扰，重现性好，斑点清晰，专一性强，结果满意，为该制剂的质量提供了准确的测定方法。

1 仪器与试剂

1.1 仪器：DG20-002台式干燥箱，SLD-I型薄层显色喷雾泵。

1.2 试剂：硅胶H（青岛海洋华工厂产品）其他试剂均为分析纯薄层板（10 cm×20 cm，自制，含0.5% cmc-Na）。

1.3 脯氨酸对照品（批号111659-200301）购自中国药品生物制品检定所。

1.4 甘草次酸对照品（批号110723-200310）购自中国药品生物制品检定所。

1.5 吉日木松汤生产厂家为阿拉善盟额济纳旗中蒙医院（批号：20051125、20051129、20060318）。

2 方法与结果

2.1 A.锁阳薄层鉴别[1]：溶液的制备。

2.1.1 对照品溶液的制备以及TLC实验。

2.1.2 对照品溶液的制备：取脯氨酸对照品适量，加水制成每1 mL含2 μL的溶液，摇匀，即得。

2.1.3 对照药材溶液的制备：取锁阳对照药材1 g，加水10 mL，浸渍30 min，滤过，取滤液即得。

2.1.4 供试品溶液的制备，取本品粉末5 g，加水10 mL，浸渍30 min，滤过，即得。

2.1.5 TLC实验：取对照品溶液，对照药材溶液，供试品溶液：分别吸取上述溶液各5 μL，点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以正丙醇－冰醋酸－乙酸－水（4∶1∶1∶2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以吲哚醌试液，晾干，在100 ℃加热至斑点显色清晰。结果表明，供试品色谱中，在于对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。Rf值为0.52（图1）。

图1 1.供试品；2.脯氨酸对照品；3.锁阳对照药材

图2 1.空白；2.脯氨酸对照品；3.锁阳对照药材

图3 1.阳性供试品；2.脯氨酸对照品；3.锁阳对照药材

图5 1.供试品；2.甘草次酸对照品；3.甘草对照药材

图6 1.空白；2.甘草次酸对照品；3.甘草对照药材

图8 1～3.供试品；4.甘草次酸对照品；5.甘草对照药材

2.1.6 空白试验与自配对照品实验。

2.1.7 阴性对照品实验按处方自配缺锁阳的吉日木松汤，制备成空白溶液，然后按上述方法点样、展开、显色。结果在与脯氨酸对照品及锁阳对照药材相应的位置上没有出现相应的斑点。Rf值0.47（图2）。

2.1.8 阳性对照品按照额济纳旗中蒙医院所提供的处方，制备成吉日木松汤样品，并按上述方法进行提取、点样、展开，显色。结果自配样品在与对照品溶液相应的位置上有相应的斑点（图3）。

说明只要生产中投料的锁阳是合格的，生产工艺正确，其产品用本文的TLC方法就可以检出相应的锁阳斑点。

2.1.9 样品检验取额济纳旗中蒙医院3批样品，按上述TLC法检验，结果样品在与对照品溶液相应的位置上有相应的斑点。Rf值0.46（图4）。

2.2 B.甘草薄层鉴别[2]：对照品溶液的制备以及TLC实验。

2.2.1 对照品溶液：取甘草次酸对照品，加甲醇制成每1 mL含2 mg的溶液，即得。

2.2.2 对照药材溶液的制备：取甘草对照药材1 g，同法制成对照药材溶液。

2.2.3 供试品溶液的制备，取本品5 g，加盐酸1 mL，氯仿15 mL，加热回流提取1 h，放冷，滤过滤液蒸干，残渣加乙醇2 mL使溶解，作为供试品溶液。

2.2.4 TLC实验：取对照品溶液，对照药材溶液，供试品溶液，吸取供试品溶液10 μL，对照品溶液2 μL，对照药材2 μL分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚－苯－乙酸乙酯－冰醋酸（5∶10∶4∶0.6）为展开剂，展开，取出晾干，喷以10%磷钼酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰。供试品色谱中，于对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点。Rf值为0.42（图5）。

2.2.5 空白试验与自配对照品实验。

2.2.6 阴性对照品实验按处方自配缺甘草的吉日木松汤，制备成空白溶液，然后按上述方法点样、展开、显色。结果在与对照品及锁阳对照药材相应的位置上没有出现相应的斑点。Rf值为0.51（图6）。

2.2.7 阳性对照品按照额济纳旗中蒙医院所提供的处方，制备成吉日木松汤样品，并按上述方法进行提取、点样、展开，显色。结果自配样品在与对照品溶液相应的位置上有相应的斑点。Rf值为0.45（图7）。说明只要生产中投料的甘草是合格的，生产工艺正确，其产品用本文的TLC方法就可以检出相应的甘草斑点。

2.2.8 样品检验取额济纳旗中蒙医院3批样品，按上述TLC法检验，结果样品在与对照品溶液相应的位置上有相应的斑点。Rf值为0.39（图8）。

3 讨论

3.1 取样量：供试品的取样量为5 g，相当于原药材1 g。

3.2 从3批样品的TLC结果可以看出3批样品的质量较好，均与对照品和对照药材有相应的斑点。

3.3 提取条件与展开系统的选择：脯氨酸是组成蛋白质的常见氨基酸之一，脯氨酸以天然存在形式，胶原的主要成分之一。为无色针状结晶，含一个结晶水。熔点为190 ℃（无结晶水，205 ℃分解）。具有潮解性。能溶于水和醇，难溶于丙酮和氯仿，不溶于乙醚。根据其化学性质，以药典为标准，进行了试验：取本品，加水10 mL，浸渍30 min。滤液作为供试品溶液。试验结果确证：该方法提取完全，斑点清晰，分离理想，Rf值适中。经空白试验证明，其他味药对结果无干扰[3]。

甘草根及根茎含甘草甜素，为甘草酸的钾，钙盐。甘草次酸为白色结晶性粉末，无味，微溶于水，溶于乙醇，氯仿。根据其化学性质，以《卫生部药品标准》为标准，进行了试验：取本品加盐酸1 mL，氯仿15 mL，加热回流提取1 h，放冷，滤过滤液蒸干，残渣加乙醇2 mL使溶解，作为供试品溶液。

试验结果确证：该方法提取完全，斑点清晰，分离理想。经空白试验证明：其他味药对结果无干扰。