许 辉 马 红 闵 敏 顾文涛 李遇梅

尖锐湿疣皮损中p16基因启动子区高甲基化及其mRNA的表达

许 辉 马 红 闵 敏 顾文涛 李遇梅∗

目的: 明确尖锐湿疣组织中p16基因启动子区高甲基化与p16 mRNA表达的关系。方法:采用甲基化特异性PCR技术检测30例尖锐湿疣组织及20名正常对照组织p16基因启动子区CpG岛甲基化状态，用RT－PCR法检测p16 mRNA的表达。结果: 尖锐湿疣组织p16基因启动子高甲基化率为26.67%(8/30)，正常对照组高甲基化率为0，差异具有统计学意义(P＜0.05)。高甲基化的尖锐湿疣组织p16 mRNA的表达高于未甲基化的尖锐湿疣组织p16 mRNA的表达和高于正常对照组织p16 mRNA的表达。结论: 尖锐湿疣组织皮损中p16基因启动子区甲基化不导致p16 mRNA表达的缺失。

尖锐湿疣； 人乳头瘤病毒； 甲基化； p16

尖锐湿疣(CA)是由人乳状瘤病毒感染引起的上皮增生性病变，为重要的性传播疾病之一。p16基因是参与细胞周期调控的抑癌基因，主要能与cyclinD竞争性结合CDK4/6而抑制CDK4/6激酶的活性使pRb不能磷酸化，使未磷酸化的pRb增加而抑制细胞增殖。p16基因失活使p16/pRb调节通路异常，致使细胞过度增殖，其主要失活机制有基因突变、纯合性缺失和启动子甲基化。其中启动子CpG岛甲基化是导致p16基因失活的重要原因，是近年来研究的热点。

国内外的研究p16基因在CA患者组织中表达存在异常。因此我们用甲基化特异性PCR技术和RTPCR法检测30例CA患者组织中p16基因启动子甲基化异常及其mRNA的表达，研究CA患者中p16基因甲基化的改变及与p16 mRNA表达的关系，以及其在CA发生发展中的作用。

1 材料与方法

1.1 材料 30例CA标本均来自江苏大学附属医院皮肤科2011～2012年新鲜手术切除标本(标本来自肛周及外生殖器部位)，标本离体后，在无菌条件下迅速放入液氮速冻并转至－80℃超低温冰箱冻存。……