叶远青??罗文沈??黄华??梁红梅??陈群??杨联君??鲍红霞

[摘要]目的 分析乙型肝炎病毒前S1蛋白抗原（pre S1）、乙肝两对半、乙肝病毒基因（HBV DNA）联合检测在乙肝患者临床诊断中的应用价值。 方法 选取2011年4月～2014年4月我院住院及门诊收治的160例乙肝患者作为研究对象，于清晨空腹条件下取其血清标本，采用酶联免疫法检测血清pre S1及乙肝两对半水平，同时采用荧光定量扩增技术检测血清内HBV-DNA水平。 结果 大三阳组患者前S1抗原与乙肝HBV DNA阳性率均明显高于其他HBV-M模式，组间对比差异显著（P<0.05），HBsAg阳性HBcAb阳性组前S1抗原阳性率明显高于小三阳组（P<0.05）；前S1抗原阳性组HBV DNA阳性率明显高于对应前S1抗原阴性组，其中以HBsAg+HBeAg+HBcAb+pre S1+组HBV DNA阳性率最高，且其HBV DNA含量水平同样最高；146例HBsAg阳性患者中，137例HbeAg阳性，阳性率为93.8%，且其中HBeAg+组，前S1抗原阳性率为88.9%，明显高于HBeAg-组，组间对比差异显著（P<0.05）；HBsAg阳性患者HBV DNA阳性100例，阳性率68.5%。且HBV DNA阳性组前S1抗原阳性率为85.0%，明显高于HBV DNA-组，提示HBsAg阳性患者血清中pre S1与HBV DNA相关性较强（P<0.05）。结论 采取三项联合检测，可在尽早时间内发现乙肝患者病毒感染情况，为患者的诊断与治疗提供指导。

[关键词]乙型肝炎病毒；前S1抗原；HBV DNA；联合检测；价值

[中图分类号] R512.6 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2015）17-146-04

Clinical value analysis of combined detection of Hepatitis B Virus pre S1 protein antigen， five indexes of Hepatitis B and HBV DNA of patients with Hepatitis B in clinical diagnosis

YE Yuanqing LUO Wenshen HUANG Hua LIANG Hongmei CHEN Qun YANG Lianjun BAO Hongxia

Department of Laboratory， Second People's Hospital， Longgang District， Shenzhen 518112， China

[Abstract] Objective To analyze the application value of combined detection of Hepatitis B Virus（HBV） pre S1 protein antigen， five indexes of Hepatitis B and HBV DNA of Patients with Hepatitis B in Clinical Diagnosis. Methods 160 patients with Hepatitis B who were admitted to our hospital from April 2011 to April 2014 were selected as research subjects. Patients serum samples in fasting condition were collected in the morning. Serum pre S1 and five indexes of Hepatitis B were detected by enzyme linked immunoassay and level of HBV DNA in serum was detected by fluorescent quantitative PCR at the same time. Results Positive rates of pre S1 antigen and HBV DNA of patients in the great three positive group was all significantly higher than other HBV-M models. The compared groups have significantly differences （P<0.05）. Positive rates of pre S1 antigen in the HBeAg and HBcAb positive group was significantly higher than that in the small three positive group （P<0.05）. Positive rate of HBV DNA in positive pre S1 antigen group was significantly higher than that in the negative pre S1 antigen group， of which， positive rate of HBV DNA in HBsAg+HBe Ag+HBcAb+pre S1+ group was highest and level of HBV DNA in this group was also highest. Among 146 HBsAg positive patients， 137 were positive HBe Ag patients and positive rate of it was 93.8%. Positive rate of pre S1 antigen was 88.9% in HBeAg+ group which was significantly higher than that of HBeAg-group. These compared groups have significantly differences（P<0.05）. 100 HBV DNA cases were in positive HBsAg patients and the positive rate was 68.5%. Positive rate of pre S1 antigen in positive HBV DNA group was 85.0% which was significantly than that of HBV DNA- group. It suggested that there was a strong correlation between serum pre S1 and HBV DNA in positive HBsAg patients（P<0.05）. Conclusion Combined detection of the three items can discover infection situation of Hepatitis B Virus as soon as possible to give instructions for diagnosis and treatment of patients.endprint

[Key words] Hepatitis B Virus； Pre S1 antigen； HBV DNA； Combined detection； Value

乙肝两对半，即乙肝五项是具有代表性的传统乙肝病毒血清标志物，当前依然作为临床判别乙肝患者病情严重程度及传染性的关键指标，其组合模式较为复杂[1]。有文献提示，其可能受到乙肝病毒变异及药物治疗方案的影响，在反馈乙肝病毒复制及传染性方面有一定的局限性，可能引起误诊与漏诊[2]。基于此，为分析诊断、检测乙肝病毒，提高诊断准确性，降低漏检率的有效方案，我院对收治的160例患者进行了整合研究，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2011年4月～2014年4月我院住院及门诊收治的160例乙肝患者作为研究对象。所有纳入对象均符合中华医学会颁布的乙型肝炎诊断标准。其中男90例，女70例；年龄22～70岁，平均（41.2±1.3）岁。

1.2 方法

所有患者均于清晨空腹条件下采集其血液标本，保存待测。前S1抗原及乙肝两对半应用酶联免疫法检测，试剂盒购于上海阿尔法生物技术及上海科华生物工程有限公司，按照参照试剂使用说明操作。对HBV DNA的检测则应用荧光定量检测技术，选用PCR扩增仪实施检测。检测值≥5×102 copies/mL则视为HBV DNA阳性。

1.3 统计学方法

采用SPSS19.0统计学软件处理数据，计量资料进行t检验，计数资料进行x2检验，相关性则行Pearson分析，以r表示，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 常见HBV-M模式中HBV DNA及前S1抗原检测结果

大三阳组患者前S1抗原与乙肝HBV DNA阳性率均明显高于其他HBV-M模式，组间对比差异显著（x2=16.8016、12.6227、10.2874、16.2146，P<0.05），HBsAg阳性、HBcAb阳性组前S1抗原阳性率明显高于小三阳组（x2=9.3854，P<0.05）。见表1。

表1 常见HBV-M模式中HBV DNA及前s1抗原检测结果[n（%）]

HBV-M模式 n Pre S1

阳性 HBV DNA

阳性

HBsAg+HBeAg+HBcAb+（大三阳） 26 24（92.3） 21（80.8）

HBsAg+HBeAb+HBcAb+（小三阳） 102 60（58.8） 32（31.4）

HBsAg+HBcAb+ 18 14（77.8） 7（38.9）

HBsAb+HBcAb+ 2 0 0

HBsAb+HBeAb+HBcAb+ 6 0 1（16.7）

HBeAb+HBeAb+ 3 0 0

HBV-M全阴 3 0 0

总计 160 98（61.3） 61（38.1）

2.2 HBsAg阳性3组模式中前S1抗原与HBV DNA的含量的关系

前S1抗原阳性组HBV DNA阳性率明显高于对应前S1抗原阴性组，两组对比差异有统计学意义（x2=4.0929、47195，P<0.05），后一组HBV DNA阳性率高于前S1抗原阴性组，但对比差异无统计学意义（x2=0.0198，P>0.05），其中以HBsAg+HBeAg+HBcAb+pre S1+组HBV DNA阳性率最高，且其HBV DNA含量水平同样最高。见表2。

2.3 HBsAg阳性患者血清pre S1与HBeAg相关性

146例HBsAg阳性患者中，137例为HbeAg-，占93.8%，9例HBeAg+，占6.2%，且其中HBeAg+组，PreS1+8例，占88.9%，明显高于HBeAg-组的62.0%，组间对比差异显著（x2=10.8899，P<0.05），提示HBsAg阳性患者血清中pre S1抗原与HBeAg有较强的相关性（r=0.98，P<0.05）。见表3。

表2 HBsAg阳性3组模式中前S1抗原与HBV DNA的含量的关系 [n（%）]

HBV-M模式 n HBV DNA（copies/mL） 阳性率（%）

<5×102 5×102～1×103 103～104 105～106 >107

HBsAg+HBe Ag+HBcAb+pre S1+ 24 4（16.7） 1（4.2） 3（12.5） 8（33.3）* 9（37.5）* 83.3*

HBsAg+HBe Ag+HBcAb+pre S1- 2 1（50.0） 0 1（50.0）* 0 0 50.0

HBsAg+HBeAb+HBcAb+pre S1+ 60 35（58.3） 3（5.0） 17（28.3） 3（5.0） 0 33.3

HBsAg+HBeAb+HBcAb+pre S1- 42 35（83.3）* 2（4.8） 6（10.0） 1（2.4） 0 16.7

HBsAb+HBcAb+pre S1+ 14 9（64.3） 1（7.1）* 3（21.4） 1（7.1） 0 28.6

HBsAb+HBcAb+pre S1- 4 3（75.0） 0 1（25.0） 0 0 25.0

总计 146 87（59.6） 7（4.8） 31（21.2） 13（8.9） 9（6.2） 36.3

注：与其他HBV-M模式比较，*P<0.05

表3 HBsAg阳性患者血清pre S1与HBeAg相关性

HbeAg n Pre S1- Pre S1+ rendprint

HBeAg- 137 52（38.0） 85（62.0） 0.51

HBeAg+ 9 1（11.1） 8（88.9） 0.98

2.4 HBsAg阳性患者血清pre S1与HBV DNA相关性

HBsAg阳性患者HBV DNA阳性100例，阳性率68.5%。且相关性分析提示，PreS1在HBV DNA+中阳性率为85.0%，显著高于HBV DNA-组的56.5%（x2=14.0200，P<0.05），提示HBsAg阳性患者血清中pre S1与HBV DNA相关性较强（r=0.69，P<0.05）。见表4。

表4 HBsAg阳性患者血清pre S1与HBV DNA相关性

HBV DNA n Pre S1- Pre S1+ r

HBV DNA- 46 20（43.5） 26（56.5） 0.16

HBV DNA+ 100 15（15.0） 85（85.0） 0.69

3 讨论

大量研究报道证实，乙肝属于我国发病率最高的传染性疾病的范畴[3]，目前已成为全球公共卫生问题，且不同地区流行强度有一定的差异。据世卫组织数据统计，全球范围内乙肝病毒携带者已逾3.5亿，占5%[4]。我国则为较具代表性的肝炎大国，病毒携带率超过10%，全国超过1.2亿人携带乙肝病毒，因而必须重视对乙肝的预防及诊断、治疗[5]。

乙型肝炎病毒为双链环状DNA病毒，其基因组长度在3.1kb左右，含四个不同的开放读码框，即X、S、P、C区[6]。S区由前S1抗原与前S2抗原基因构成，编码表示为preS1、preS2蛋白及HBsAg，是构成HBV外膜蛋白的重要构成部分[7]。前S1抗原蛋白由氨基酸残基构成，依附于管型颗粒与Dane颗粒上，在乙肝病毒的装配、复制过程中产生着重要的作用，前S1抗原是乙型肝炎病毒附着于人体肝细胞的关键中枢部位，可与肝细胞膜受体结合，同时亦可与宿主细胞膜识别点位进行结合，使得变异病毒产生传染性[8]。前S1抗原富含肝细胞膜受体，有其较高的免疫原性，与乙型肝炎病毒的入侵与复制存在较强的相关性[9-10]。

本组研究中，通过对160例患者血清样本实施乙肝病毒pre S1、乙肝两对半与HBV DNA检测，提示其中146例HBsAg阳性患者中前S1抗原与HBV DNA检出率比较高，且大三阳组患者前S1抗原与乙肝HBV DNA阳性率均明显高于其他HBV-M模式，HBsAg阳性HBcAb阳性组前S1抗原阳性率明显高于小三阳组，同时显示HBV preS1可反馈乙型肝炎病毒患者体内乙肝病毒的复制情况，同时也可将其作为诊断乙肝病毒感染的关键指标。

传统临床研究对血清标志物两对半的识别与判别研究中，显示HBeAg为乙型肝炎病毒是否在患者体内传染与复制的关键指标，其反馈病毒复制的传染性与复制[11-12]，而其中HBeAb的产生则是对病毒复制降低的反馈，提示乙肝病毒传染性减弱[13]。本组研究结果提示，血清前S1抗原与乙肝患者HBV DNA水平有较强的联系，两者有较强的相关性。

综上，血清两对半是反馈乙肝患者机体感染乙型肝炎病毒后免疫状态的重要标志，但在反映病毒复制方面并不确切。另外，可将HBV DNA含量作为反馈患者乙肝病毒感染与复制的重要指标，但其价格相对昂贵，临床推广存在一定的困难。而血清前S1抗原则即可显示HBV的复制状况，同时免受病毒变异的影响，且操作简单，价格低廉，可推广。总之，采取三项联合检测，可在尽早时间内发现乙肝患者病毒感染情况，为患者的诊断与治疗提供指导。

[参考文献]

[1] 曾繁钰，蒋冰，谭璐，等.Pre S1抗原与HBV血清学标志物和HBV DNA的相关性及临床意义[J].武汉大学学报（医学版），2014，35（1）：85-88，105.

[2] 王云芳，沈春燕，谢颖，等.Pre-S1、HBV-DNA与乙肝血清标志物阳性关系的探讨[J].放射免疫学杂志，2013，26（2）：254-255.

[3] 高淑艳.HBV感染者血清标志物与HBV DNA检测结果的关联性分析[J].吉林大学学报（医学版），2011，37（1）：101.

[4] 林国跃，张和平，罗婷，等.HBV前S1蛋白与HBV-DNA检测和乙肝二对半模式相关性研究[J].中国实验诊断学，2011，15（2）：341-342.

[5] 李军.中老年乙型肝炎病毒感染患者HBV前S1抗原、ALT与HBV-DNA病毒载量的关系[J].中国老年学杂志，2013，33（9）：2166-2167.

[6] 方伟祯，陈梅，赖关朝，等.PreS1Ag与HBcAg检测在诊断乙肝病毒复制的意义[J].中国热带医学，2011，11（2）：235-236.

（下转第页）

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[7] 邓敏茹，林章礼.乙型肝炎病毒前S1Ag与HBV-M及HBV-DNA联合检测267例结果分析[J].中国基层医药，2012，19（12）：1816-1817.

[8] 李小月，张祖平，李宗光，等.HBV前S1抗原与HBV DNA联合检测的临床意义[J].临床输血与检验，2011，13（1）：25-27.

[9] 占国清，谭华炳，李芳，等.血清乙型肝炎病毒前S1抗原对判定HBV DNA复制的临床价值[J].实用肝脏病杂志，2011，14（2）：103-105.

[10] 刘波，王君，邱小华，等.乙型肝炎病毒前S1抗原与其血清标志物及DNA的关系分析[J].国际流行病学传染病学杂志，2011，38（5）：308-310.

[11] 蒋伯帅，刘雪平，蒲荣，等.乙型肝炎病毒外膜大蛋白和HBV DNA血清学诊断价值[J].中国微生态学杂志，2010，22（2）：154-157.

[12] 张宝华，黄婷.乙型肝炎病毒检测方法的相关性分析[J].现代检验医学杂志，2010，25（4）：69-71.

[13] 黄华泥，张业久，徐五星，等.HBV-DNA定量检测结果与乙肝两对半模式相关性分析[J].现代中西医结合杂志，2010，19（31）：3459-3460.

（收稿日期：2015-05-17）endprint