海水中铁载体的固相萃取预处理和高效液相色谱
2015-09-11章蕾袁东星方锴刘宝敏
章蕾+袁东星+方锴+刘宝敏


摘 要 铁载体是一种由海洋菌类合成并分泌、能特异性络合海水中铁的有机配体。本研究建立了固相萃取预处理、高效液相色谱-串联质谱测定海水中铁载体化合物的分析方法。海水样品经0.22 μm滤膜过滤,其中铁载体由ENVI-18萃取柱萃取、甲醇洗脱后得到富集净化后的试样; 采用SB-C18反向色谱柱以0.1%(V/V)甲酸溶液和甲醇溶液梯度洗脱分离,在质谱的多反应监测正离子模式下检测。3种铁载体化合物标准物质Pyoverdines-Fe, Ferrichrome, Ferrioxamine E的检测线性范围分别为0.001~3.0 μg/mL, 0.005~15.0 μg/mL, 0.001~3.0 μg/mL,相关系数R2>0.99; 仪器检出限分别为0.08, 1.76 和1.36 ng/mL; 定量限分别0.27, 5.87和4.53 ng/mL。在海水样品中添加铁载体化合物混合标准溶液,3种目标物测定值的相对标准偏差<12%,方法回收率分别为Pyoverdines-Fe 12.1%~18.6%,Ferrichrome 82.0%~97.7%,Ferrioxamine E 70.0%~98.3%。
关键词 铁载体; 固相萃取; 高效液相色谱-串联质谱; 海水
1 引 言
不同于地表水,海洋表层的生物可利用态铁(Fe)浓度极低,仅为nmol/L。铁载体是一种低分子量(0.5~1.5 kDa)的有机配体[1],对铁有极强的螯合能力。在铁限制条件下,铁载体由海洋中的一些细菌和真菌合成并分泌到细胞外,与海水中的铁特异性结合,通过细胞膜上特定铁载体受体的识别和转运,有效地将铁运输到微生物细胞内,满足生物体对铁的需求[1~3]。铁载体种类繁多,根据其官能团的不同,可分为氧肟酸型、酚-儿茶酚型和少量柠檬酸型。铁载体是海洋生物量的重要影响因子,其定性定量分析数据的获取是相关研究的关键。
由于铁载体结构复杂多样,在海洋环境中浓度低[4~6],分析相对困难,一般需要采集大量水样进行萃取和富集。传……
