李梅 武毅 刘仁旺 郭丽丽 徐婷婷 陈军 徐嵩

骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSC）是来源于中胚层的成体干细胞，具有自我更新、增殖能力。MSC是存在于骨髓中的多潜能干细胞。他在适宜的信号刺激下能够诱导分化成不同的骨髓微环境的组成成分，如骨、脂肪、造血和基质细胞。MSC能够分泌许多造血因子，包括巨噬细胞集落刺激因子（macrophage colonystimulating factor,M-CSF）、白介素（interleukin-6,IL-6）、SCF和白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor,LIF）等来支持造血。此外，由于MSC的免疫抑制作用和多向分化潜能，MSC还被应用于器官移植和组织修复等方面。

目前MSC与肿瘤细胞之间关系的研究越来越受到关注。有文献[1,2]报道MSC其具有靶向迁移至肿瘤部位的特性。通过向肿瘤组织的归巢和向间质成分分化，改变肿瘤微环境，影响肿瘤的生长和转移。我们的研究旨在探讨肿瘤微环境中的未经修饰的MSC在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）的侵袭和转移方面的功能研究。但是，NSCLC来源MSC的生物学性状和MSC在NSCLC发生发展中的作用的相关研究报道的结果很不一致，阐述的机制也不清楚。

1 材料与方法

1.1 MSC细胞培养 骨髓取自正常捐献者，签署知情同意书。应用Ficoll-Hyaque密度梯度离心后提取单核细胞，PBS洗涤后混于MesenPro培养液（Gibco），含有2%胎牛血清，1%抗生素，2%MesenPro生长添加物，调整细胞密度1×106/cm2的置于细胞培养瓶后，细胞培养箱过夜。PBS洗去未贴壁细胞，更换新的MesenPro培养液。每2-3天换液，5 d-7 d后细胞融合至80%左右（即第1代），应用胰酶消化细胞，按照细胞密度2×103/cm2置于新的细胞培养瓶。重复传代。第2代和第3代MSC应用于本研究。用于本实验前，应用流式细胞鉴定MSC纯度，CD90（+），CD73（+），CD105（+），CD45（-），同时具有成纤维细胞形态，并向脂肪，成骨和软骨分化能力。……