雷心雨，黄怡婷，朱翠玲，于茜，孙静华，王忠昊，秦思，周盼，徐先祥

·药理毒理·

黄芪总皂苷配伍雷公藤多苷抗炎镇痛作用

雷心雨，黄怡婷，朱翠玲，于茜，孙静华，王忠昊，秦思，周盼，徐先祥

目的：考察黄芪总皂苷配伍雷公藤多苷在抗炎镇痛及免疫方面的作用。方法：小鼠进行二甲苯耳肿胀、小鼠琼脂肉芽肿、小鼠醋酸扭体镇痛等试验，雷公藤多苷15 mg·kg-1和黄芪总皂苷150 mg·kg-1进行配伍，研究雷公藤多苷配伍黄芪总皂苷及雷公藤多苷、黄芪总皂苷各自的抗炎、镇痛及免疫的作用。结果：黄芪总皂苷配伍雷公藤多苷能有效降低小鼠的耳肿胀度，降低琼脂肉芽肿重量，减少小鼠扭体次数，增加小鼠免疫器官重量。结论：黄芪总皂苷配伍雷公藤多苷在抗炎镇痛方面具有一定的增效作用。

雷公藤多苷；黄芪总皂苷；抗炎；镇痛；免疫

类风湿性关节炎是常见疑难杂症，雷公藤是目前公认的治疗类风湿关节炎最有效的中药之一［1］。雷公藤多苷（tripterygium wilfordii polyglycosidium，TWP） 是从雷公藤（Tripterygium wilfordii Hook. f.）中提取的一类极性较大的混合物，含有二萜类、生物碱及一些五环三萜，为临床上使用较多的雷公藤类制剂，具有抗炎、抑制免疫、抗生育等活性，广泛用于治疗类风湿性关节炎［2］。雷公藤制剂疗效与毒副作用并存，限制了雷公藤的深入应用。通过雷公藤多苷的复方组方研究，发现通过药物及不同方剂的配伍可以达到增效减毒的目的［3］。

治疗类风湿关节炎的复方中多用黄芪来补气扶正。有研究表明黄芪与雷公藤多苷合用时可显著增加雷公藤多苷的抗炎作用，更加显著降低佐剂性关节炎大鼠血清中IL-1β的含量［4］。黄芪总皂苷是黄芪中一类重要有效组分，具有调节免疫、保护心血管等药理作用［5］。本文将常用剂量的雷公藤多苷与黄芪总皂苷配伍，考察二者联合在抗炎、镇痛、免疫方面的作用。

1　材料

1.1动物

健康昆明种小鼠，雄性，体重20±2g，由福建省吴氏实验动物中心提供。

1.2药物

黄芪总皂苷，本课题组以大孔吸附树脂方法制备；雷公藤多苷，福建汇天生物药业有限公司，批号130701，临用时用蒸馏水配成所需浓度混悬液供灌胃使用。

2　方法

2.1二甲苯诱导小鼠耳肿胀试验

小鼠随机分为4组，分别为正常对照组、雷公藤多苷15 mg·kg-1组和黄芪总皂苷150 mg·kg-1组和雷公藤多苷15 mg·kg-1+黄芪总皂苷150 mg·kg-1配伍组，每组10只。以上各组分别按20 mL·kg-1进行灌胃给予药液或生理盐水，每天1次，连续7 d。末次给药后1 h，以20 μL二甲苯涂于各组小鼠左耳两面致炎，右耳不涂作对照，致炎后45 min处死小鼠。剪下两耳，用直径8 mm的打孔器分别在左右同一部位打下圆耳片，称重，以耳片重量之差为肿胀度。

2.2小鼠琼脂肉芽肿试验

小鼠分组及给药同“2.1”。给药前在各小鼠背中线处皮下注射2%琼脂溶液0.4 mL。末次给药后1 h，处死动物，剥离出肉芽琼脂块，称取湿重。

2.3小鼠醋酸扭体镇痛试验

小鼠分组及给药同“2.1”。末次给药后1 h，每鼠腹腔注射0.6%冰醋酸水溶液 0.2 mL，观察并记录15 min内的小鼠扭体次数。

2.4免疫器官脏体指数测定

小鼠分组及给药同“2.1”。末次给药1 h后处死小鼠，分离免疫器官胸腺、脾脏，计算脏体指数。

2.5数据统计

所有数据均采用SPSS13.0软件包进行统计学处理，所得结果以均数±标准差（x±s）表示。各组间均数比较采用单因素方差分析（one-way ANOVA），采用LSD法进行组间两两比较。

3　结果

3.1对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响

与对照组比较，雷公藤多苷组和配伍组在致炎45 min后小鼠耳肿胀度显著性降低（P＜0.05）；黄芪总皂苷组有降低作用趋势但无显著性差异（P＞0.05）。与雷公藤多苷组和黄芪总皂苷组比较，配伍组均无显著性差异（P＞0.05），表明配伍组降低小鼠耳肿胀度作用主要来源于雷公藤多苷。

表1　黄芪总皂苷联合雷公藤多苷对小鼠耳肿胀的影响（x±s，n=10）

3.2对琼脂致小鼠肉芽肿的影响

与对照组比较，雷公藤多苷组、黄芪总皂苷组和配伍组肉芽肿的质量显著性降低（P＜ 0.05，P＜0.05，P＜ 0.01）；此外，配伍组与黄芪总皂苷组致炎后小鼠耳肉芽肿的质量组间具有显著性差异（P＜0.05），表明雷公藤多苷配伍黄芪总皂苷后具有明显的增效作用。

表2　黄芪总皂苷联合雷公藤多苷对小鼠琼脂肉芽肿的影响±s，n=10）

表2　黄芪总皂苷联合雷公藤多苷对小鼠琼脂肉芽肿的影响±s，n=10）

注：与黄芪总皂苷组比较，#P＜ 0.05

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3.3对小鼠醋酸扭体反应的影响

与对照组比较，雷公藤多苷组和配伍组在注射 0.6%冰醋酸水溶液后小鼠扭体次数均显著性降低（P＜ 0.05），结果见表3。由实验结果可见，黄芪总皂苷配伍雷公藤多苷后，具有显著镇痛作用，而该作用主要来源于雷公藤多苷。

表3　黄芪总皂苷联合雷公藤多苷对小鼠扭体反应次数的影响（x±s，n=10）

3.4药物对小鼠免疫器官的影响

与对照组比较，黄芪总皂苷组胸腺脏体指数显著性增加（P＜ 0.05），表明黄芪总皂苷具有增强免疫作用；与对照组比较，雷公藤多苷组小鼠脾脏体指数显著性降低（P＜ 0.05），表明雷公藤多苷有抑制免疫作用，而在配伍黄芪总皂苷后与对照组比较则无显著性差异（P＞0.05），表明二者联用后能提高免疫器官的功能。

表4　黄芪总皂苷联合雷公藤多苷免疫器官重量脏体指数的影响（x±s，n=10）

4　讨论

雷公藤制剂对风湿性疾病有很好的疗效，应用广泛，但雷公藤较强的毒性作用却一直困扰医药工作者，如何降低雷公藤毒性甚至增强其疗效渐成为学者们研究的焦点。雷公藤在临床上多为单用，国内学者从中药方剂配伍另辟蹊径，或通过动物药理实验，或经临床实践研究了雷公藤与其他中药配伍起减毒增效的作用机制及方法，为有毒中药减毒增效研究打开了新的局面。中药配伍的目的在于：一是相互配用而减轻或消除了毒性作用；二是发挥药物间的协同作用而增进疗效。本研究中，雷公藤多苷与黄芪总皂苷配伍能起到一定的增效作用。在中医药理论指导下，进行有效组分层次上的现代组方研究，既可提高受试药的质量可控性，符合中药现代化要求，又可兼顾中药复方特色和优势。若能在中药配伍的基础上，进行组分中药复方制剂的研究，进一步开发高效低毒的治疗类风湿关节炎药物，将有着广阔的市场前景和重要应用价值。

中医学认为类风湿性关节炎发病主要内因是肝肾不足或劳累过度耗损正气，致素体正气亏虚，正气既虚外邪易入侵，复感风寒湿，气血痹阻不行，关节闭涩，或风、寒、湿、热之邪留滞筋骨关节，久之损伤肝肾阴血，筋骨失养，故见关节肿痛、僵硬、屈伸不利、活动障碍、筋挛肉卷，即为痹症［6］。“扶正祛邪”是中医治病和组方用药的重要思想，黄芪是著名的常用的补气扶正中药，黄芪不但具有显著增强免疫调节功能，本身也具有一定的抗炎抗风湿作用。类风湿性关节炎具有虚实错杂的临床特点，选择补泻兼施的植物中药有效组分配伍（雷公藤多昔与黄芪总皂苷），贯彻了扶正祛邪治疗思想，是现代中医药在类风湿关节炎等研究领域中有益的探索。此外，黄芪还具有保护肾脏、保护心血管、保护胃黏膜，增强免疫、增强机体造血功能等作用，可以对抗雷公藤肾脏损害、心血管系统损害、造血系统损害、胃粘膜刺激等毒副作用。由此推测，中药有效组分配伍是提高类风湿关节炎临床疗效的重要途径，值得进一步深入研究。

［1］水光兴，万毅刚，蒋春明，等.雷公藤及其活性成分药效学和药理学研究的若干进展［J］.中国中药杂志，2010，35（4）:515.

［2］郭雪红.雷公藤多苷的药理作用及临床应用概述［J］.中成药，2010，32（7）:1199.

［3］饶毅，魏惠珍，陈银芳，等.中药配伍应用于雷公藤减毒增效的研究进展［J］.中国中药杂志，2008，33（14）:1658.

［4］王瑞辉，刘力，李晖.黄芪等中药对雷公藤多甙抗炎疗效影响的动物实验研究［J］.陕西中医学院学报，2004，27（5）:4.

［5］陈晓宁.黄芪总皂苷的药理研究［J］.数理医药学杂志，2005，18（6）:602.

［6］陆柳丹，韦嵩.中医治疗类风湿性关节炎研究进展［J］.辽宁中医药大学学报，2013，15（10）:110.

（责任编辑：陈思敏）

Anti-inflammatory and analgesic effects of total saponins of Huangqi combined with tripterygium wilfordii polyglycosidium

LEI Xin-yu, HUANG Yi-ting, ZHU Cui-ling, YU Qian, SUN Jing-hua, WANG Zhong-hao, QIN Si, ZHOU Pan, XU Xian-xiang
(School of Biomedical Science, Huaqiao University, Quanzhou 362021, Fujian)

Objective: To evaluate anti-infl ammatory，analgesic and immune effects of total saponins of Huangqi combined with tripterygium wilfordii polyglycosidium. Method: The analgesic，anti-infl ammatory and immunity effects were investigated by dimethylbenzene-induced ear swell，agar granuloma and ethylic acid-induced writhing tests performed on mice. 15 mg· kg-1tripterygium wilfordii polyglycosidium combined with 150 mg·kg-1total saponins of Huangqi and their respective antiinflammatory，analgesic and immune effects were observed. Result: Total saponins of Huangqi combined with tripterygium wilfordii polyglycosidium could effectively alleviate the acute inflammation reactivity，reduce writhing mice number，reduce agar granuloma weight and increase immune viscera weight of mice. Conclusion: Total saponins of Huangqi combined with tripterygium wilfordii polyglycosidium have some synergistic anti-infl ammatory and analgesic effects.

Tripterygium wilfordii polyglycosidium； total saponins of Huangqi； anti-infl ammatory； analgesic； immunity

R 285.5

A

1674-926X（2015）06-010-03

华侨大学中央高校基本科研业务费“福建省杰出青年基金培育计划”专项（JB-SJ1012）

华侨大学生物医学学院，福建 泉州 362021

雷心雨（1994-），女，华侨大学生物医学学院2012级药学本科生 Email:454539866@qq.com

徐先祥（1978-），男，博士，助理研究员，主要从事中药药理学研究

Tel:0595-22692300Email:xuxianxiang@163.com 2015-04-20