吴清华，裴瑾，刘薇，刘维，陈翠平

川牛膝、杜仲种子萌发特性研究

吴清华，裴瑾，刘薇，刘维，陈翠平

目的：研究川牛膝、杜仲种子的最佳发芽条件，为生产中川牛膝、杜仲种子的检验及播种提供理论依据。方法：在不同温度、不同试剂处理条件下，对川牛膝、杜仲种子进行发芽率实验及生活力测定实验，记录川牛膝、杜仲种子的发芽率、发芽势及生活力。结果：川牛膝种子的最佳萌发条件为：温度在25℃，7.5mg/L吲哚乙酸处理的发芽率最高；杜仲种子的最佳萌发条件为：温度在20℃，400mg/L赤霉素处理的发芽率最高。结论：通过本实验研究川牛膝、杜仲种子不同温度、试剂处理与发芽率、生活力之间的关系，探索川牛膝、杜仲种子的最佳萌发条件，为后续保存川牛膝、杜仲优良种质提供理论依据。

川牛膝；杜仲；种子；发芽率

川牛膝为苋科杯苋属多年生草本植物川牛膝Cyathula offi cinalis Kuan的干燥根［1］。“川牛膝”之名，本草书籍中最早见于明初的《滇南本草》，该书谓“白牛膝强筋之功甚于川牛膝”，分布于四川乐山、雅安、凉山，重庆奉节、巫山、巫溪，湖北恩施，湖南邵阳、龙山，云南玉溪、楚雄，贵州等地，为川产道地药材。具有逐瘀通经，通利关节，利尿通淋的功效，临床用于治疗经闭癥瘕，跌打损伤，风湿痹痛，尿血血淋等病症［1］。杜仲（Eucommia ulmoidse Oliv.）为杜仲科杜仲属植物，主产于四川广元、青川、绵阳，贵州遵义、正安，陕西镇坪、安康等地。具有补肝肾、强筋骨、安胎的功效，临床用于肝肾不足，腰膝酸痛，下肢痿软，阳痿尿频等病症。

现今市场上流通的川牛膝、杜仲基本为人工种植，种植过程中采用种子繁殖，在生产过程中发现川牛膝、杜仲种子质量差异很大，常出现发芽率低，幼苗弱等问题［2］。本文研究了川牛膝、杜仲种子不同温度、试剂处理对种子发芽率的影响，旨在探明川牛膝、杜仲种子的最适萌发条件，以期为后续保存优良种质提供理论依据，为川牛膝、杜仲药材的生产提供优良种子。

1　材料与方法

1.1材料

川牛膝种子、杜仲种子、培养皿、滤纸、恒温培养箱、光照培养箱、赤霉素、吲哚乙酸等。

1.2方法

1.2.1川牛膝、杜仲种子萌发前处理 采用温水浸种催芽法。先用40℃温水将种子清洗干净，再在恒温培养箱内控制温度35～45℃浸种24h，期间换水1次。待种子充分吸胀后，除去干瘪种子，剩余清洗干净后备用。

1.2.2川牛膝、杜仲种子萌发特性的研究方法 用正交试验法选取最适宜川牛膝种子、杜仲种子的萌发条件，光照条件包括光照、黑暗和6h曝光/d三个水平，水分包括60%、80%、100%三个水平，温度包括15℃、20℃、25℃三个水平。每个处理3次重复，每组50粒种子。发芽试验以培养皿为容器，皿底铺3层滤纸作为发芽床，每天加水以保持滤纸湿润。

1.2.3不同试剂处理 将经过前处理的川牛膝种子、杜仲种子分为10个组，每组3次重复，每次50粒种子。川牛膝种子进行下列处理：①100mg/L、200mg/ L、400mg/L的赤霉素；②2.5mg/L、5mg/L、7.5mg/L的吲哚乙酸；③50mg/L、100mg/L、150mg/L的萘乙酸；以清水处理作为对照组［3～5］。

杜仲种子进行下列处理：①NaOH处理：40%的NaOH分别处理5min、10min、15min，取出，清水洗净后晾干；②H2SO4处理：98%H2SO4分别处理5min、10min、15min，取出，清水洗净后晾干；③赤霉素处理：200mg/L、400mg/L、600mg/L赤霉素处理10min，取出，清水洗净后晾干［6］。

1.2.4采用TTC法测定种子的生活力 重复3次，每次各50粒种子。

2　结果与分析

2.1不同处理方法川牛膝种子的萌发情况的影响

2.1.1三因素对川牛膝种子、杜仲种子萌发情况的影响程度均为水分＞温度＞光照，得到的最适宜川牛膝种子的萌发条件为：水分80%，温度25℃，光照培养；杜仲种子的最适萌发条件为：水分80%，温度20℃，光照培养。

2.1.2不同处理方法对川牛膝种子发芽率的影响

表1　不同处理对川牛膝种子萌发率的影响

注：**表示与对照组差异显著

与空白组对比，各种IAA处理均对川牛膝种子的发芽率达到极显著差异（P＜0.01），其中以7.5mg/L IAA处理的发芽率最高，可作为川牛膝种子萌发的生长素使用。不同浓度的赤霉素、不同浓度的萘乙酸对川牛膝种子的发芽势无显著性差异（P＞0.01）。

2.1.3不同处理方法对杜仲种子发芽率的影响

表2　不同处理对杜仲种子萌发率的影响

与空白组对比，中、高浓度GA3处理均对杜仲种子的发芽率达到极显著差异（P＜0.01），其中以400mg/L GA3处理10min杜仲种子的发芽率最高，可作为杜仲种子萌发的生长素使用。40%NaOH、98%H2SO4不同时间处理对杜仲种子的发芽势无显著性差异（P＞0.01）。

3　讨论

3.1筛选出了川牛膝种子萌发的最适条件

对川牛膝种子萌发温度、水分及光照条件的正交实验结果分析，得到的最适宜川牛膝种子的萌发条件为：水分80%，温度25℃，光照培养。研究结果表明，各种不同试剂不同浓度处理的川牛膝种子萌发实验中，以7.5 mg/L IAA处理得到的发芽率最高，可显著性提高川牛膝种子的发芽率，可为后续引种栽培川牛膝生长素的使用提供理论依据。

3.2筛选出了杜仲种子萌发的最适条件

对杜仲种子萌发温度、水分及光照条件的正交实验结果分析，得到的最适宜杜仲种子的萌发条件为：水分80%，温度20℃，光照培养。研究结果表明，各种不同试剂不同时间处理的杜仲种子萌发实验中，以400 mg/L GA3处理得到的发芽率最高，可显著性提高杜仲种子的发芽率，可为后续引种栽培杜仲生长素的使用提供理论依据。

［1］国家药典委员会.中国药典2010年版一部［S］.北京:中国医药科技出版社，2010:35.

［2］范巧佳，方志然，孙磊，等.川牛膝种子发芽特性的研究［J］.四川农业大学学报，2013，31（3）:254.

［3］柯文山，钟章成，席红安，等.四川大头茶地理种群种子大小变异及对萌发、幼苗特征的影响［J］.生态学报，2000（4）:697.

［4］林俊英.不同处理方法对秦艽种子发芽率的影响［J］.甘肃中医学报，2005，22（2）:19.

［5］吴学明，刘玉萍.青海省红直獐牙菜种子萌发特性的研究［J］.江苏农业科学，2006（4）:120.

［6］余启高，姚茂桂.杜仲种子发芽条件的研究［J］.农技服务，2010，27（11）:1455.

（责任编辑：胡慧玲）

Studies on Chuanniuxi and Duzhong seeds germination characteristics

WU Qing-hua, PEI Jin, LIU Wei, LIU Wei, CHEN Cui-Ping
(School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; Key Laboratory of Standardization for Chinese Herbal Medicine, Ministry of Education; National Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, Chengdu 611137,Sichuan)

Objective: To study the optimum conditions of Chuanniuxi and Duzhong seeds germination to provide a theoretical basis for the inspection and sowing seed. Method: At different temperatures and different reagent conditions，Chuanniuxi and Duzhong seeds germination rate and viability determination experiments were carried out. Chuanniuxi and Duzhong seeds germination potential and viability were recorded. Result: The best seed germination conditions for Chuanniuxi seed were as following: temperature at 25 ℃，7.5mg/L indole acetic acid treated. The best germination conditions for Duzhong seed was as following: temperature at 20 ℃，400mg/L gibberellin treated. Conclusion: The optimum conditions of Chuanniuxi and Duzhong seeds germination were investigated by studying the relationship of different temperatures，reagent processing and germination rate，viability of Chuanniuxi，Duzhong seed. The results can provide a theoretical basis for subsequent storage of Chuanniuxi and Duzhong high quality germplasm.

Chuanniuxi； Duzhong； seed； germination rate

R 282.2

A

1674-926X（2015）06-002-03

成都中医药大学校基金（zrms201338），中药资源四川省青年科技创新研究团队（2015TD0028）

成都中医药大学药学院 中药材标准化教育部重点实验室 四川省中药资源系统研究与开发利用重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地，四川 成都 611137

吴清华（1986-），女，讲师，从事中药品种、品质与质量评价研究

2015-04-25