董自亮，徐瑞超，原欢欢，肖礼娥

微波消解-石墨炉原子吸收法测定阿胶中6种微量元素含量

董自亮1，2，徐瑞超2，原欢欢2，肖礼娥2

目的：建立阿胶中6种微量元素含量测定方法。方法：采用微波消解-石墨炉原子吸收分光光度法测定阿胶中砷、铅、铬、汞、镉、铜6种元素的含量。样品采用HNO3和H2O2进行微波消解，用石墨炉原子吸收分光光度计测定。结果：6种微量元素在其各自的浓度范围内均有良好的线性关系，相关系数均大于0.999。所测各元素的含量均低于国家标准规定的限量：砷（0.577μg·g-1）、铅（0.249μg·g-1）、铬（1.25μg·g-1）、汞（0.002μg·g-1）、镉（0.133μg· g-1）、铜（4.72μg·g-1）。结论：该方法快速简便、干扰少、精密度高，能够满足同类中药材中微量元素含量的测定。

微波消解；石墨炉原子吸收分光光度法；微量元素；阿胶

近年来药品中重金属超标问题在社会上引起了广泛的关注，特别是以动物药材入药的品种，重金属超标问题尤显突出，加强药品生产中重金属的控制已成为药学人研究工作的重点。

阿胶系传统名贵药材，是我国医药宝库中的珍品之一，阿胶历史悠久，应用广泛，被历代医家誉为“圣药”。但是，由于部分厂家为降低成本，使用重金属超标的皮革原料（如边角料），加之生产过程中鞣革剂（如硫酸铬）等的使用，往往使得生产出的阿胶中重金属含量增高，导致各种急慢性疾病，严重危害人体健康。目前鲜有对阿胶中重金属检测方面的研究报道，且仅限于对其中铬的检测［1，2］。因此，对阿胶中微量元素含量的分析测定已成为十分迫切的工作。

微波消解法是当今国际上较为通用的样品前处理方法，具有样品处理时间短、溶剂消耗少、环保安全等优点，并能提高分析方法的准确度及精密度［3，4］。石墨炉原子吸收法以其用样量小、检出限低以及仪器简单易操作等优点，被广泛应用于食品、药品以及生物样品的检测中［5，6］。基于以上情况，本试验结合相关文献并参照2010年版《中国药典》［7］，采用微波消解法进行阿胶样品中多微量元素消解，首次创建了阿胶中砷、铅、铬、汞、镉、铜等多种微量元素的测定方法。

1　材料与试剂

1.1仪器与材料

石墨炉原子吸收分光光度计（AASVAR IO6，带自动进样器）；微波消解仪（奥地利Anton Paar公司）；ECH-1电子控温加热板（上海新仪微波化学科技有限公司）；Millli-Q Element A10超纯水系统（美国Millipore公司）；砷、铅、铬、汞、镉、铜空心阴极灯（Thermo Elemental 制造）。

阿胶样品由太极集团甘肃天水羲皇阿胶有限公司提供（批号分别为13110006、13120002、13120007）。

1.2试剂

硝酸（优级纯）；过氧化氢（分析纯）；0.5 mol· L-1硝酸溶液；砷、铅、铬、汞、镉、铜标准贮备液（1 mg·mL-1）及标准使用液（0.1 mg·mL-1）；硝酸镍，磷酸二氢铵，氧化镁，中间标准工作溶液Ⅰ（10 ng· mL-1），中间标准工作溶液Ⅱ（100 ng·mL-1）。

2　样品前处理与检测

2.1样品消解

分别称取阿胶样品0.3～0.5 g，放入消解罐中，加入5 mL硝酸和2 mL过氧化氢（30%），浸泡放置约3 min，轻轻晃动使混合均匀，盖好内盖，旋紧外套，放入微波消解器中，设定消解程序进行消解（消解程序见表1）。消解完毕取出消解罐，待完全冷却后开罐，用0.5 mol·L-1硝酸溶液转移并定容至50 mL容量瓶中，用中速定性滤纸过滤，待用，同时做试剂空白。

表1　微波消解仪的消解程序

2.2仪器条件

测量仪器工作条件及石墨炉升温程序见表2、3。

表2　石墨炉原子吸收分光光度计工作条件

表3　石墨炉升温程序

2.3绘制标准曲线

适量吸取各元素的中间标准溶液Ⅰ和中间标准溶液Ⅱ，配制成浓度分别为0 ng·mL-1、1.0 ng·mL-1、3.0ng·mL-1、5.0 ng·mL-1、7.0 ng·mL-1和10.0 ng· mL-1的标准工作溶液，各吸取10 mL注入石墨炉，按仪器工作条件测定该标准系列的吸光度，以元素的质量浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准工作曲线，吸光度和元素的质量浓度呈良好的线性关系，其线性方程和相关系数见表4。

表4　各元素标准工作曲线回归方程和相关系数

2.4样品测定与计算

分别吸取样液和试剂空白液各10 mL注入石墨炉，测得其吸光度值，代入标准系列的一元线性回归方程中求得样液中各元素的含量，结果扣除空白值，计算得含量。结果见表5。

表5　阿胶中6种微量元素的含量测定结果

结果表明，所测阿胶中的6种微量元素均未超过2010年版《中国药典》［3］规定阿胶中的铜、砷、铅、镉、汞的含量不得超过20、2、5、0.3、2 μg·g-1。而关于铬，现行版药典中未加以限量，其含量仍符合国家标准《GB6783-94食品添加剂明胶》、行业标准《QB 2354-2005 药用明胶》中铬含量不得过2.0 mg·kg-1［8，9］的规定。

3　结论与讨论

本研究采用微波消解-石墨炉原子吸收分光光度法测定阿胶中铬、砷、铅、镉、汞、铜6种微量元素，经多次实验验证，该法简便、快速，效率高，灵敏度高，检出限低。微波消解所用试剂量较少，空白值显著降低，且可避免待测元素的挥发损失及样品污染，提高了分析的准确性。

原子吸收光谱的背景干扰是石墨炉原子吸收光度法应用中一个较为复杂的问题，除可以使用仪器本身的特殊装置，例如连续光源背景校正器、氘灯扣背景及塞曼效应背景校正技术外，我们在研究中选择了合适的基体改进剂来改善背景的干扰问题，在试验测试As、Pb、Cd时分别以硝酸镍、磷酸二氢铵、氧化镁为基体改进剂，与现行版药典方法相比，该方法排除了基体干扰物质，增加了检测灵敏度。此外，对复杂的样品应注意使用标准参考物质核对结果，避免产生背景干扰［10］。

《中华人民共和国国家标准GB6783-94食品添加剂明胶》以及《中华人民共和国轻工行业标准QB 2354-2005 药用明胶》均规定了铬含量不得过2.0 mg ·kg-1。根据本研究的结果，样品的铬含量均合格，显示该批阿胶品质较佳。根据文献［1］报道的关于阿胶中铬含量较高的超标率，本课题组拟收集更多的市售的不同厂家阿胶样品，应用本方法进行铬含量的检测，为更好的控制产品中重金属铬的含量提供支持。

［1］石岩，肖新月，石上梅，等.微波消解-石墨炉原子吸收法测定阿胶中铬含量［J］.药物分析杂志，2011，31（8）:1527.

［2］林娜，余华丽，宋剑锋.微波消解-石墨炉原子吸收法测定阿胶珠中铬含量［J］.中华中医药学刊，2013，31（5）:1181.

［3］闫清华，杨理，杨利娟.微波消解ICP-AES检测6种清热解毒类中草药中14种常微量元素［J］.药物分析杂志，2011，31（7） :1393.［4］杜萍，刘晓松.密闭微波消解技术概述［J］.中国卫生检验杂志，2008，18（8）:1701.

［5］刘英华，杨晓华，田宝勇.石墨炉原子吸收法测定空心胶囊中的铬含量［J］.中国药房，2012，23 （13）: 1230.

［6］俞辉，陈超，陈瑜.石墨炉原子吸收分光光度法检测空心胶囊中铬元素的含量［J］.药物分析杂志，2006，26（11）:1644.

［7］ 中国药典.一部［S］. 北京:中国医药科技出版社，2010:175.

［8］GB（中华人民共和国国家标准）. 6783-94，Food additive Gelatine（食品添加剂明胶）.

［9］QB（中华人民共和国轻工行业标准）.2354-2005，Pharmaceutical gelatino（药用明胶）.

［10］中华人民共和国卫生部，中国国家标准化管理委员会.GB /T5009.15-2003.食品中镉的测定［S］.北京:中国标准出版社，2004.

（责任编辑：胡慧玲）

Determination of six microelement levels in Ejiao by microwave digestion-graphite furnace atomic absorption spectrometry

DONG Zi-liang1,2, XU Rui-chao2, YUAN Huan-huan2, XIAO Li-e2
(1. School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; Key Laboratory of Standardization for Chinese Herbal Medicine, Ministry of Education; National Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources , Chengdu 611137, Sichuan; 2. Taiji Group Chongqing Fuling Pharmaceuticals Co. Ltd., Chongqing 408000, China)

Objective: A graphite furnace atomic absorption spectrometry （GF-AAS） method was developed for determination of six microelement levels in Ejiao. Method: Contents of arsenic，lead，chromium，mercury and cadmium of Ejiao were determined by microwave digestion-graphite furnace atomic absorption spectrometry. The samples were microwave-assisted digested by HNO3and H2O2，and determined by the graphite furnace atomic absorption spectrometer. Result: Six microelement levels had good linear relationship in their respective tested concentration and the correlation coeffi cients were greater than 0.999. The contents were found to be 0.577 μg·g-1（arsenic），0.249 μg·g-1（lead），1.25μg·g-1（chromium），0.002μg·g-1（mercury），0.133μg·g-1（cadmium） and 4.72 μg·g-1（copper），which were below the national standard. Conclusion: The method is rapid and sensitive without interference. It can satisfy the determination of selected mineral elements in Ejiao.

Microwave digestion； graphite furnace atomic absorption spectrometry； microelement； Ejiao

R 282.6

A

1674-926X（2015）06-004-03

1.成都中医药大学药学院 中药材标准化教育部重点实验室 中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地，成都 611137；2.太极集团重庆涪陵制药厂有限公司，重庆 408000

董自亮（1985- ），男，在读博士，研究方向为中药新剂型、新技术 Tel:18225129378 Fax:023-72801480 Email:dzlcdutcm@163.com

2015-09-07