李紫琼，木尼拉，高　峰

反义I型转化生长因子β受体和反义TIMP-1联合作用对大鼠肝纤维化的抑制作用

李紫琼，木尼拉，高峰

【摘要】目的观察转化生长因子βI型受体（TβRI）反义RNA联合TIMP-1反义RNA对实验性肝纤维化的影响。方法构建TβRI和TIMP-1反义RNA真核细胞表达质粒，共同导入实验性肝纤维化大鼠体内；应用免疫印记技术检测实验大鼠肝组织TIMP-1、TβRI和MMP-13蛋白表达水平。结果正常对照组、反义TβRI组、反义TIMP-1组、联合治疗组、空质粒组和模型组动物肝组织TIMP-1蛋白相对表达量分别为（23.6±2.8）、（57.96±3.8）、（62.3±2.8）、（34.2±2.8）、（279.2±29.8）和（287.3±23.7），TβRI蛋白的相对表达量分别为（56.2±2.7）、（70.5.±1.8）、（77.0±1.7）、（60.6±2.2）、（232.0±19.4）和（241.0±18.3），MMP-13蛋白相对表达量分别为（17.84±2.3）、（36.2±3.7）、（41.3±2.4）、（28.6±2.0），（127.3±1.2）和（118.5±2.5），与正常对照组及空质粒组比，反义TβRI组、联合治疗组和反义TIMP-1组TβRI、TIMP-1和MMP-13蛋白表达明显减少（P＜0.05），但空质粒组与模型组比无显著性差异。结论TβRI和TIMP-1反义RNA能有效抑制TβRI、TIMP-1和MMP-13蛋白表达，两者联合应用可产生叠加效应。

【关键词】肝纤维化；反义RNA；质粒；转化生长因子β；基质蛋白酶组织抑制因子

肝纤维化的形成主要是由于细胞外基质（ECM）降解减少，导致ECM沉积增多所致。在肝纤维化形成过程中，一般认为存在转化生长因子-β（TGF-β）/Smad信号传导通路，首先活化的TGF-β与II型TGF-β受体（TβRII）结合，并使之磷酸化而具有激酶活性；与TGF-β结合的TβRII再结合I型TGF-β受体（TβRI），形成I型和II型受体复合物，并使TβRI磷酸化，具有激酶活性；最后，激活的TβRI激活酶磷酸化其特殊的受体Smads（R-Smads），从而调节肝星状细胞（HSC）的转化和ECM的合成与降解。TβRI是唯一的直接将信号传递到细胞内的受体。ECM的降解受基质金属蛋白酶-基质金属蛋白酶抑制剂（MMPs-TIMPs）系统的调节，其中间质胶原酶（人MMP-1和鼠MMP-13）在降解纤维化肝脏ECM过程中起重要作用。……