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HepG2细胞内HPV DNA物理状态及表达L1蛋白

2015-08-07杜义江肖长义

基础医学与临床 2015年1期
关键词:检测

杜义江,肖长义,郑 军,胡 敏

(三峡大学 1.医学院 组织学与胚胎学教研室, 湖北 宜昌 443002;三峡大学 第一临床医学院 2.中心实验室; 3.普外科, 湖北 宜昌 443003)



研究论文

HepG2细胞内HPV DNA物理状态及表达L1蛋白

杜义江1,2,3,肖长义1,2*,郑 军3,胡 敏2

(三峡大学 1.医学院 组织学与胚胎学教研室, 湖北 宜昌 443002;三峡大学 第一临床医学院 2.中心实验室; 3.普外科, 湖北 宜昌 443003)

目的了解人肝癌细胞系HepG2细胞内人乳头瘤病毒(HPV)基因组的物理状态,胞质内包涵体物质的性质以及晚期衣壳蛋白1(L1)表达。方法用PCR对细胞内HPV18型E2和E6基因进行扩增,判断HPV18基因组的物理状态;用ELISA、光镜和电镜的免疫组化、Western blot等方法,以多价HPV L1小鼠单克隆抗体做探针,检测HepG2细胞内L1蛋白表达;用反转录PCR检测细胞内L1 mRNA表达。结果HepG2细胞内HPV DNA基因组呈整合状态;细胞裂解液中有HPV L1蛋白存在;细胞呈HPV L1阳性反应;胞质内包涵体样物质,由均匀的颗粒样物质组成,可以为胶体金标记的HPV L1抗体所标识。HepG2细胞裂解液中有HPV L1蛋白,在56 ku区出现与HeLa细胞一样的L1特异阳性条带。反转录PCR检测显示HepG2细胞内有L1 mRNA存在。结论HepG2是HPV18阳性细胞,细胞内HPV DNA基因组呈整合状态。细胞内包涵体样物质为HPV18 L1蛋白,HepG2细胞可以表达L1。

HepG2细胞;人乳头瘤病毒;病毒基因组;物理状态;L1蛋白

近来有研究证实肝癌细胞系HepG2是HPV18阳性细胞[1],电镜可观察到HepG2细胞胞质内有包涵体样物质,与宫颈癌来源的HeLa细胞胞质内包涵体样物质具有同样的形态学特征,HeLa细胞内包涵体物质证实为HPV18晚期衣壳蛋白1(late capsid protein 1,L1)[2]。HepG2细胞胞质内包涵体物质性质及HPV DNA基因组在HepG2细胞内物理状态——游离还是整合?……

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