刘丽莎，朱纯亮，韩 勍，殷丝雨，谈 诚，韩晶晶，陈红兵

(南京医科大学 附属南京儿童医院 检验科， 江苏 南京 210008)



川崎病急性期患儿血清活化HUVECs NF-κB并促进MMP- 9分泌

刘丽莎，朱纯亮，韩 勍，殷丝雨，谈 诚，韩晶晶，陈红兵*

(南京医科大学 附属南京儿童医院 检验科， 江苏 南京 210008)

川崎病(Kawasaki disease，KD)，又称皮肤黏膜淋巴结综合征(mucocutaneous lymph node syndrome, MCLS)，是一种好发于5岁以下儿童和婴幼儿的急性全身性血管炎性疾病。 病变可累及动脉、静脉和毛细血管，尤以冠状动脉为明显，成为小儿后天性心脏病的主要病因[1]。目前，KD病因与发病机制尚不十分清楚, 本实验观察川崎病患儿急性期血清对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)NF-κB P65表达及MMP- 9分泌的影响，及NF-κB抑制剂四氢化吡咯二硫代氨基甲酸脂(PDTC)对上述过程的影响。

1 材料与方法

1.1 材料：人脐静脉内皮细胞(HUVECs)系；RPMI1640培养基和胰蛋白酶；胎牛血清；MMP- 9试剂盒。

1.2 血清制备：40例在本院明确诊断为典型川崎病急性期(发热10 d 内，IVIG使用前)患儿(年龄2～5岁)、23例急性上呼吸道感染的患儿及20例同年龄段健康儿童，各组年龄无差异，采集各组儿童静脉血3 mL，分离血清，-80 ℃ 冻存。标本的收集均获得患儿家属知情同意和医学伦理委员会的同意。

1.3 细胞培养：1)正常血清组(control)1.0×106个HUVECs细胞于含10%正常血清的RPMI1640 完全培养液培养24 h，弃上清液，加入无血清培养液；2)发热血清组(F)：用含10%急性发热患儿血清培养液，余同control组；3)急性期血清组(KD)：用含10%急性期血清培养液，余同control组；4)PDTC+急性期血清组(PDTC)：用含10%急性期血清培养液培养24 h，弃上清液，加入含PDTC(20 μmol/L)的无血清培养液。

1.5 MMP- 9活性测定：ELISA 法检测细胞上清液中MMP- 9水平，操作严格按照说明书进行。……