程娟，鹿保鑫，王霞，易伟民

（黑龙江八一农垦大学食品学院，大庆 163319）

脂肪酶是一类特殊的酯键水解酶[1]，能催化油脂水解，生成脂肪酸、甘油和甘油单酯或二酯。此外，还可以用于生物表面活性剂的合成、多肽合成、聚合物的合成和药物的合成等[2]。而固定化脂肪酶是将脂肪酶通过物理或化学的方法制备成为不溶于水的，但仍具有催化活性的复合体，这一过程是将单体的游离脂肪酶转变成了复合脂肪酶催化剂[3-4]。将脂肪酶进行固定化，可以提高酶的专一性以及稳定性等，使酶的性质更加稳定，且反应条件温和，副产物少，易于分离[5]。目前固定化脂肪酶的制备上还存在一些限制因素[6-7]，例如，在固定化上载体的设计上、在制备和选用上，固定化脂肪酶的方法等方面[8]。

在特异性上脂肪酶的区分不是很明显，根据反应条件的不同，其特异性也有差异[9]，所以，试验以两种不同的脂肪酶为原料，分别进行固定化，考察了硅烷化试剂添加量、硅藻土与酶的质量比、温度、时间等四个因素对酶的固定化的影响，并对影响因素进行了单因素试验，确定了最佳的工艺参数，希望为实际生产提供理论依据和技术上的支持。

1 材料与方法

1.1 原料与试剂

脂肪酶（Lipase）：Sigma 公司生产；乙烯基三甲氧基硅烷，南京化学试剂有限公司；盐酸，南京化学试剂有限公司；过氧化氢，南京化学试剂有限公司；甲苯，南京化学试剂有限公司；乙醇，南京化学试剂有限公司。

1.2 主要仪器

DK-S24 电热恒温水浴锅，上海森信实验仪器有限公司；……