郭春兰，于春生，张雨竹，宋志儒，杨月，肖亚静，孙冬梅

（黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院，大庆 163319）

枯草芽孢杆菌（B.subtilis）作为植物病害主要生防细菌之一，备受各国研究工作者的青睐[1]。B.subtilis在生长代谢过程中能够产生不同种类的拮抗物质，主要为抗生素和抗菌蛋白，大多数能忍受蛋白酶的作用，但也有一些对蛋白酶敏感[2-3]；且多数能拮抗细菌，少数拮抗真菌[4-5]。国内对枯草芽孢杆菌及其代谢产物稳定性分析研究也很多，枯草芽胞杆菌B-916中分离出来的对真菌具有较强抑菌活性的蛋白，大小为41.9 kDa，具有一定耐热性，对蛋白酶敏感，具有较宽的pH 适应范围[6]；具有抑制黄瓜枯萎病原菌作用的枯草芽胞杆菌中纯化出具有抑菌活性的蛋白L37，其分子量为15 kDa，该蛋白对多种病原真菌具有抑制效果，且对蛋白酶、温度等均不敏感，是一种非常稳定的抑菌蛋白[7]。拮抗棉花黄萎菌的枯草芽孢杆菌BDT- 2 能产生分子量为约为30 kD 的抑菌物质，有较好的酸碱稳定性[8]。通过对枯草芽孢杆菌21发酵液抑菌物质的稳定性进行分析（包括蛋白酶稳定性、温度稳定性、酸碱稳定性），并将生的抑菌物质进行了初步分离，为该菌产生的抑菌物质成分进一步分离、纯化和结构测定打下了基础。

1 材料及方法

1.1 材料

1.1.1 供试菌种

拮抗枯草芽孢杆菌21、玉米圆斑病菌dq-1 由黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院生物技术系微生物实验室分离并保存。

1.1.2 供试培养基

马铃薯培养基（PDA）：去皮马铃薯200 g，蔗糖20 g，琼脂15 g，蒸馏水1000 mL，pH 自然。……