张 娟，白 怀，范 平

(1.四川省医学科学院·四川省人民医院检验科，四川 成都 610072；2.四川大学华西第二医院西部妇幼医学研究院，四川 成都 610041)

微电场刺激血管内皮细胞培养上清对缺氧培养滋养细胞迁移/侵袭的影响

张 娟1，白 怀2，范 平2

(1.四川省医学科学院·四川省人民医院检验科，四川 成都 610072；2.四川大学华西第二医院西部妇幼医学研究院，四川 成都 610041)

目的 探讨微电场(electric field，EF)刺激血管内皮细胞培养上清对缺氧培养滋养细胞迁移/侵袭能力的影响。方法 200 mV/mm微电场刺激血管内皮细胞(HUVEC)5 h，收集培养上清。Transwell 体外侵袭实验和划痕实验观察EF刺激内皮细胞条件培养基对3% O2物理缺氧培养滋养细胞迁移/侵袭功能的影响。采用Western blot和荧光定量RT-PCR检测 EF刺激的血管内皮细胞条件培养基与滋养细胞共培养24 h后对缺氧培养滋养细胞MMP-2(Matrix metalloproteinase 2，MMP-2)及MMP-9(Matrix metalloproteinase 9，MMP-9)分子表达的影响。结果 Transwell小室体外侵袭实验和划痕实验结果显示，EF 200 mV/mm 刺激血管内皮细胞5 h条件培养基(conditioned medium，CM)与滋养细胞共培养，可促进缺氧培养滋养细胞迁移/侵袭功能，其穿膜细胞数目是单纯缺氧的3.62倍(P< 0.05)，迁移速度是单纯缺氧的1.56倍(P< 0.05)。EF刺激的血管内皮细胞条件培养基与滋养细胞共培养24 h，可以促进缺氧培养滋养细胞的MMP-2表达；对MMP-9分子表达的影响不明显。结论 EF刺激的血管内皮细胞培养上清能促进缺氧培养滋养细胞的迁移/侵袭能力，可能与内皮细胞作用于滋养细胞、促进MMP-2分子表达增加有关。

直流微电场；缺氧；滋养细胞；内皮细胞；细胞迁移/侵袭

在生理状态下，妊娠胚胎植入早期绒毛外滋养细胞(extravillous trophoblasts，EVT)侵入蜕膜组织和子宫螺旋动脉，并使后者发生改建变成低阻、高容量血管，维持足够的母体血液流入绒毛间支持胎盘的功能。滋养细胞适度地侵入子宫内膜是维持妊娠和胎儿发育的前提条件。EVT侵入不足所致的胎盘缺血缺氧，可导致异常产科结局如流产、子痫前期和胎儿宫内生长受限等。……