洪 坡，袁凤媚，黄嘉慧，刘东晨，张 途，谢秋玲

(暨南大学生命科学技术学院//广东省生物工程药物重点实验室//基因工程药物国家工程研究中心，广东广州510632)

过去10年中，瞬时基因表达系统快速生产复杂治疗性蛋白技术得到了广泛应用［1］，瞬时基因表达 (Transient gene expression，TGE)是一种使用动物细胞悬浮培养技术快速生产毫克级至克级重组蛋白的方法，目前最常用的细胞株是CHO细胞和HEK 293细胞，这两种细胞可适应无血清悬浮培养［2］。HEK293细胞凭借其易转染、高表达、天然人糖基化修饰、允许蛋白正确折叠和相关翻译后修饰等优点使用最为广泛［3－4］。聚乙烯亚胺(PEI)是一种在小规模到大规模蛋白表达中广泛使用的转染试剂，它具有高效性和经济性等优点［2，4－5］。PEI是一种阳离子聚合物，可与 DNA 结合凝聚成带正电荷的纳米颗粒，颗粒与细胞表面硫酸乙酰肝素蛋白聚糖黏合，并通过胞吞作用进入细胞，从而促进细胞对DNA的摄取［6－7］。线型和支化的25000 PEI是使用最为广泛的聚合物，其中线型PEI转染效率更高、毒性更小，常被用于悬浮培养的 HEK293 细胞的转染［8－10］。

血小板源性生长因子 (platelet derived growth factor，PDGF)具有诱导肿瘤中淋巴管生成和促进肿瘤淋巴转移的功能，是潜在的治疗肿瘤分子靶标［11］。可溶性血小板源性生长因子受体 (sPDGFR)可与细胞膜表面的PDGFR竞争性结合 PDGF，从而阻断PDGF的生物学效应，有望用于肿瘤的治疗［12－13］。PDGFR主要包含两种结构相似的受体亚型PDGFR-α 和 PDGFR-β。PDGFR的 β 链膜外区与人IgG Fc片段的重组型可溶性融合蛋白sPDGFR-β/Fc受体作为一种新型的PDGF拮抗剂，具有很好的应用前景。……