刘晓琳 明雅南 张静怡 曾民德 茅益民

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）包括单纯性脂肪肝（NAFL）和非酒精性脂肪性肝炎（NASH），其与肥胖、糖尿病等代谢危险因素显著相关。NAFLD已呈世界范围内流行，各地患病率在6.3%～33%［1］。通常认为，NAFLD是一个良性过程，但是NASH具有进展为肝硬化和肝癌的风险［2］。

线粒体是细胞物质能量代谢的场所，通过多种信号通路参与肝脏的脂肪代谢和能量的产生。目前，已有越来越多的研究提示线粒体功能异常和NAFLD发生密切相关［3］，NAFLD已被认为是一种线粒体疾病。与NAFLD相关的线粒体异常包括线粒体呼吸链复合物活性降低和线粒体β氧化功能受损［4］。细胞色素C氧化酶（COX）是线粒体呼吸链电子传递的终末复合物，镶嵌于线粒体内膜，可调控线粒体的氧化呼吸功能；而肉毒碱棕榈酰转移酶（CPT）是细胞线粒体脂肪酸氧化的限速酶，位于线粒体外膜，可调控长链脂肪酸由细胞质转移到线粒体进行β氧化［5］。本研究旨在了解线粒体两种关键酶在NAFLD进展中的变化。

资料和方法

一、材料

SD大鼠购于上海斯莱克动物实验中心；高脂饲料和胆碱蛋氨酸缺乏饲料购于Research Diets公司（美国）；活性线粒体分离试剂盒（GMS10006.2）、纯化线粒体细胞色素C氧化酶活性测定试剂盒（GMS10014.2）、纯化线粒体肉毒碱棕榈酰转移酶活性测定试剂盒（GMS10104）购于杰美基因医药科技有限公司；Trizol、PrimeScriptTM反转录试剂盒、SYBR○RPremix Ex TaqTMII购于Takara公司（日本）；PCR引物购于上海生工有限公司；RIPA购于碧云天生物技术公司；BCA购于Thermo公司（美国）；COX和CPT抗体购于Abcam公司（英国）；全自动生化分析仪（SIEMENS ADVIA1800，美国）；……