变应性鼻炎患者组织及血液中的白介素-25表达和意义

徐丽1, 关兵1, 张俊中1, 王莹2

(1. 江苏省苏北人民医院 耳鼻咽喉头颈外科, 江苏 扬州, 225000, 2. 扬州大学医学院, 江苏 扬州, 225001)

关键词:白细胞介素-25; 变应性鼻炎; 免疫组织化学

IL-25又称IL-17E, 是IL-17家族成员之一，为一种广泛前炎性因子，具有多种生物学特性，可刺激多种来源的细胞系表达IL-6及IL-8等前炎症因子和粒细胞集落刺激因子等造血因子，同时也可促进Th2类细胞因子(IL-4、IL-5、IL-13)的产生，介导Th2免疫应答，并在嗜酸粒细胞趋化过程中起着重要作用[1]。变应性鼻炎是耳鼻喉科常见病，易反复发作，严重影响病人生活质量。根据文献报道变应性鼻炎发病率高达12%～30%。实验证实, IL-25与支气管哮喘疾病有密切相关性，变应性鼻炎、支气管哮喘由于解剖连续性，为同一气道疾病，变应性鼻炎与支气管哮喘在发病机制方面相似，有许多共同因子参与疾病发生并影响免疫应答和炎症过程。

1资料与方法

1.1　一般资料

收集2012年1月—2013年2月江苏省苏北人民医院耳鼻咽喉科住院行手术治疗的变应性鼻炎合并鼻中隔偏曲及单纯鼻中隔偏曲患者63例，年龄20～62岁，平均(30.6士10)岁，其中男32例，女31例。变应性鼻炎组患者分别按照变应性鼻炎(2009武夷山标准)诊断标准纳入。单纯鼻中隔偏曲矫正的病人为正常对照组。全部病人治疗前3周均未用抗炎药、抗组胺及皮质类固醇激素等治疗，常规行内窥镜检查了解黏膜有无苍白水肿、有无鼻息肉。患者签署知情同意书，并通过伦理审核。其中变应性鼻炎组33例，正常对照组30例。

1.2　标本及取材

变应性鼻炎组：收集患者术前空腹静脉血液标本,术中在鼻内窥镜下鼻中隔偏曲矫正后取患者部分下鼻甲黏膜组织；正常对照组：收集患者术前空腹静脉血液标本,术中鼻内窥镜下取鼻中隔偏曲矫正术患者部分下鼻甲黏膜组织。标本常规制成石蜡块保存。血标本，室温凝固1 h，2 000 r/min 离心15 min, 收集血清，置-20 ℃冷冻保存。

1.3　组织及血清中IL-25的检测表达及检测

以S-P免疫组织化学法检测标本组织中IL-25的表达。IL-25阳性表达呈棕褐色,在400倍光学显微镜下随机选取5个视野计数阳性细胞，取平均值为该标本的IL-25阳性细胞数/HP。以ELISA法检测血清中IL-25含量。IL-25定量酶联检测试剂盒(购于北京中杉金桥生物技术有限公司)，将酶标板放入酶标仪测光密度值，选择450 nm光进行比色，采取数据。

2结果

免疫组化染色片上所有染色背景清晰，阳性表达呈棕褐色，在变应性鼻炎鼻黏膜下层浸润的炎性细胞中表达显著，间质中腺腔内和血管周围炎细胞有不同程度表达，变应性鼻炎中上皮层少量表达。IL-25在对正常照组中表达的阳性细胞数少或几乎不表达。变应性鼻炎患者组阳性细胞数为(15.94±9.03)/HP, 正常对照组阳性细胞数为(4.19±2.54)/HP。变应性鼻炎患者组血清IL-25含量为(227.71±139.37) pg/mL，正常对照组IL-25 含量为(98.68±52.06) pg/mL, 2组组织间IL-25阳性细胞表达数差异有统计学意义(P<0.01), 2组血清中IL-25含量表达数差异有统计学意义(P<0.01)。

3讨论

IL-25是Lee等[2]首先报道命名为IL-17E,为IL-17家族的新成员,同时是Fort等[3]发现报道的由Th2细胞产生的细胞因子，其结构与IL-17 存在相似的细胞因子, 在NCBI表达序列标签(EST)数据库中进行了BLAST搜索, 找到一段与IL-17有显著同源性的EST序列, 通过反向遗传学的方法，克隆了IL-25 的基因。人的IL-25基因全长为3987 bp, 染色体位于14q11.2，其中有2个外显子和1个内含子。成熟的IL-25是一种分泌性糖蛋白，为同源二聚体。

IL-25是极其重要前炎性因子，与多种临床疾病发生发展有着密切相关性，目前研究发现IL-25具有多种生物学功能，尤其可以多方面调节黏膜免疫，促进Th2细胞分化，促进免疫应答反应,还能够影响Thl7细胞的分化并调节自身免疫性疾病的发生发展[4]。最近国外学者研究确定有两种细胞因子IL-25和胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)能够启动Th2型过敏反应，IL-25不仅是Th2反应增强剂，更为Th2反应引发剂[5]。

国内外多个学者研究发现IL-25这个细胞因子主要是影响IL-4、IL-5与IL-13等Th2类细胞因子的表达和活化信号通路，参与免疫疾病的发生发展。国外学者Fort等[3]实验中发现，被IL-25处理组小鼠除了IL-13、IL-5、IL-4表达增加外，同时发现其血EOS增多，血清IgE水平增高。肺组织的组织切片发现上皮细胞增生肥大、EOS及单核细胞浸润、黏液产生过多。Tamachi等[6]在其研究中证实经变应原吸入而致敏的小鼠肺组织中发现lL-25mRNA的表达。用slL-25R中和IL-25后减少了EOS及CD4+T细胞向气道内募集。Ballantyne等[7]制备了IL-25单克隆抗体,中和封闭IL-25，有效抑制了哮喘模型小鼠的气管高反应性(AHR)。这些实验证实了IL-25与支气管哮喘疾病有密切相关性，支气管哮喘具有嗜酸性粒细胞和CD4+T细胞气道浸润、黏液分泌增多、气道重塑及高反应性等特征，是由Th2细胞及其细胞因子IL-13、IL-5和IL-4诱导的一种免疫炎症，是呼吸系统的常见病和多发病。变应性鼻炎、支气管哮喘由于解剖连续性，为同一气道疾病，变应性鼻炎与支气管哮喘在发病机制方面相似，有许多共同因子参与疾病发生并影响免疫应答和炎症过程[8-10]。

本研究中发现, IL-25在变应性鼻炎鼻黏膜下层浸润的炎性细胞中表达显著，间质中腺腔内和血管周围炎细胞有不同程度表达，上皮层见少量表达，IL-25在正常下鼻甲对照组表达的阳性细胞数少或几乎不表达。变应性鼻炎组血清中IL-25含量明显高于正常对照组的血清含量(P<0.05)。近年来对变应性鼻炎发病机制研究有了一系列进展，认为其发病机制为变态反应, 与免疫功能紊乱有关。最新研究表明Th1/Th2/Th17的失衡是免疫学发病机制中的一个重要环节。变应性鼻炎是由Th2细胞及其细胞因子IL-4、IL-5和IL-13诱导的一种免疫炎症，作为一种免疫变态反应疾病，许多细胞因子参与其发病过程，因此对这些细胞因子的研究已成为研究该疾病的重要方向，本实验进一步证实了IL-25参与变应性鼻炎发病过程。IL-25在变应性鼻炎的发生与进展中起重要作用。

参考文献

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[2]Lee J, Ho W H, Maruoka M, et al. IL-17E, a novel proinflammatory lingand for the IL-17 receptor homolog IL-17Rhl[J]. J Biol Chem, 2001, 276(2): 1660.

[3]Fort M M, Cheung J, Yen D, et al. Induces IL-4,IL-5, and 13 and Th2-associated pathologies in vivo[J]. Immunity, 2001, 15(6): 985.

[4]王楷文, 许化溪. IL-25与免疫相关疾病关系的研究进展[J]. 国际免疫学杂志, 2010, 33(2): 136.

[5]Lisa G Gregory, Carla P Jones, Simone A Walker, et al. IL-25 drives remodelling in allergic airways disease induced by house dust mite[J]. Respiratory research, 2013, 68: 82.

[6]Tamachi T, Maezawa Y, Ikeda K, et al. Interleukin 25 in allergic airway inflammation[J]. Int Arch Allergy Immunol, 2006, 140(Suppl 1): 59.

[7]Ballantyne S J, Barlow J L, Jolin H E, et al. Blocking IL-25 prevents airway hyperresponsiveness in allergic asthma[J]. J Allerger Clin Immunol, 2007, 120(6): 1324.

[8]孙宗美, 王仁忠. 益肺调血汤治疗变应性鼻炎60例分析[J]. 中华全科医学, 2011, 9(3): 410.

[9]郭宏, 黄婷, 单涛, 等. 蜀梅颗粒治疗过敏性鼻炎的临床疗效观察[J]. 海南医学院学报, 2011, 17(7): 910.

[10]张罗, 王成硕, 王向东. 过敏性鼻炎诊治进展[J]. 中国实用内科杂志, 2012, 32(2): 86.

通信作者:张俊中

收稿日期:2015-05-23

中图分类号:R 765.21

文献标志码:A

文章编号:1672-2353(2015)21-202-02DOI: 10.7619/jcmp.201521079