虢红梅

陕西新药技术开发中心(西安710075)

梗舒胶囊活血化瘀实验研究*

虢红梅

陕西新药技术开发中心(西安710075)

目的：通过不同的试验方法和动物模型对梗舒胶囊的功能主治进行验证，为临床合理用药提供依据。方法：采用测定血瘀大鼠血小板聚集率和粘附率的方法，观察梗舒胶囊抗血小板聚集性和粘附性作用；采用大鼠颈总动脉—颈外静脉血流旁路血栓形成的方法，观察了其体内抗血栓作用；采用大鼠体外血栓形成试验的方法，观察了其体外抗血栓作用。结果：梗舒胶囊可显著降低实验性急性血瘀证大鼠血小板的聚集性和粘附性(P<0.05)；可明显抑制大鼠颈总动脉—颈外静脉血流旁路血栓形成(P<0.01)；可明显抑制大鼠体外血栓形成(P<0.01)。结论：梗舒胶囊具有抗血小板聚集及抗血栓作用。

中风，又名卒中，包括现代医学中的脑梗塞(脑血栓形成，脑栓塞)，短暂性脑缺血发作等，与癌症、心血管病同为目前人类的三大最常见的死亡原因。随着现代医学的进步，抢救存活率显著提高，但有后遗症和功能障碍的病人亦随之增多，2/3的人中风后致残，生活不能自理，需要人照顾。因此，研究如何降低及减轻中风后遗症的发生，最大程度的降低及减轻后遗症患者的致残，具有一定的临床意义。梗舒胶囊是选用经典验方研制而成的新药，对治疗脑血栓所致的半身不遂，口眼歪斜等有独到之处。

1 材 料 1.1 样 品 梗舒胶囊(0.45g/粒)内容物呈棕色粉末状，1g约相当于生药5.1g，本单位自研，批号101125，实验时以蒸馏水配制各剂量浓度； 维脑路通片，山东兖州市大禹制药有限责任公司产品，批号 110120；盐酸川芎嗪注射液，北京第四制药厂出品，批号：1106012；盐酸肾上腺素注射液，武汉制药(集团)股份有限公司产品，批号：1107681，普利生ADP诱导剂，批号20110507D；戊巴比妥钠，中国医药(集团)上海化学试剂公司，批号F20110215。

1.2 实验动物 SD大鼠(体重200～240g)，由西安交通大学医学院实验动物中心提供，许可证号：SCXK(陕)2007-001。

1.3 实验仪器 玻球型血小板粘附仪，无锡分析仪器厂生产； LBY—NJ2全自动四通道血小板凝聚仪、LBY-S5血栓形成仪，北京普利生集团生产。

2 方 法 2.1 对实验性血瘀大鼠血小板聚集性、粘附性的影响 取大鼠60只，雌雄各半，随机分为6组，每组10只。分组为：溶剂对照组；血瘀模型组；模型+川芎嗪组(0.15g/kg)；模型+梗舒胶囊组(2、4、8g生药/kg)。各组大鼠每天灌胃给药1次，容量2mL/100g，连续7d。第7天末次给药1h后，除溶剂组外各组大鼠均皮下注射0.001%盐酸肾上腺素8μg/kg二次，二次间隔4h。其间，在第一次注射肾上腺素后2h，将大鼠浸入4℃冰水内5min。试验当日下午，各组大鼠再次灌胃给药1次。随后，各组大鼠统一停食(不禁水)。次日清晨，股动脉采血，3.8%枸橼酸钠抗凝后，玻球型血小板粘附仪旋转玻球瓶法测定血小板粘附率[1]；同时以ADP为聚集诱导剂(富含血小板血浆PRP中ADP的终浓度为0.4μmol/L),LBY—NJ2全自动血小板聚集仪比浊法测定各组大鼠血小板最大聚集率[2]。试验时，室温度控制在25±0.5℃。

2.2 梗舒胶囊对血栓的影响

2.2.1 对大鼠颈总动脉——颈外静脉血流旁路血栓形成的影响[3]:取大鼠50只，雄性，随机分为5组，每组10只。分组为：溶剂对照组蒸馏水；维脑路通组0.15g/kg；梗舒胶囊组分别为2、4、8g生药/kg。各组大鼠每天灌胃给药1次，容量2mL/100g，连给7d。第7天末次给药30min后，各组大鼠腹腔注射4%戊巴比妥钠40mg/kg麻醉，背位固定后，分离气管并插管，同时分离右侧颈总动脉及左侧颈外静脉。取一长约7cm、由三段聚乙烯塑料管组成的套管(套管两端塑料管的内径为1mm，中段内径为2mm)，内置一条5cm长的4号手术丝线(预先称其干重)。给套管内充满50u/mL肝素生理盐水后，将其一端插入大鼠左颈外静脉并结扎固定，从套管的另一端注入浓度为50u/mL的肝素生理盐水50u/kg，然后将套管的此端插入右颈总动脉并结扎固定。手术完成后松开夹闭大鼠右颈总动脉的动脉夹开放血流，使血液从右颈总动脉流经聚乙烯套管后进入左颈外静脉。15min后中断血流，迅速取出手术丝线称重。以此时手术丝线的湿重减去其干重作为血栓重量，并求出血栓形成抑制率。

2.2.2 对大鼠体外血栓形成的影响[4]:取大鼠50只，雌雄各半，分组和给药同2.2.1。第7天末次给药1h后，将大鼠用4%戊巴比妥钠40mg/kg腹腔注射麻醉后，每只大鼠从下腔静脉取血1.8mL，立即注入内径4mm未加抗凝剂的血栓硅胶管内，置于已恒温37℃体外血栓仪中旋转15min，取出血栓，滤纸吸去余血，测量血栓长度。称湿重后，将血栓置于60℃烘箱中干燥30min后，称干重。

2.3 统计学方法t检验统计学处理数据。

3 结 果 3.1 对实验性血瘀大鼠血小板聚集性、粘附性的影响 见表1。

表1 梗舒胶囊对实验性血瘀大鼠血小板聚集性和粘附性的影响

注：与血瘀模型组比较,△P<0.05,▲P<0.01

结果表明，模型+梗舒胶囊各剂量组大鼠血小板粘附率、聚集率均低于血瘀模型组，与血瘀模型组比较，4g、8g/kg模型+梗舒胶囊剂量组血小板粘附率和聚集率均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。说明，梗舒胶囊可抑制其血小板聚集性和粘附性。

3.2 梗舒胶囊对血栓的影响

3.2.1 对大鼠颈总动脉——颈外静脉血流旁路血栓形成的影响,见表2。

表2 梗舒胶囊对大鼠颈总动脉—颈外静脉血流旁路血栓形成的影响

注：与溶剂对照组比较,▲P<0.01

结果表明，梗舒胶囊各剂量组大鼠血栓重量均低于溶剂对照组，且分别与溶剂对照组比较均有显著性差异(P<0.01)。梗舒胶囊2、4、8g/kg三个剂量组大鼠血栓形成抑制率分别为36.50、47.93和53.60%。提示：梗舒胶囊具有体内抗血栓作用。

3.2.2 对大鼠体外血栓形成的影响,见表3。

组 别剂量g/kgn血栓长度cm湿重mg干重mg溶剂对照组108.52±3.06301.26±104.8992.55±28.29维脑路通组0.15104.53±2.30▲163.37±104.12▲53.47±26.20▲小剂量组2104.71±3.01▲167.43±100.99▲56.32±27.44▲中剂量组4104.38±2.39▲156.65±102.46▲50.32±26.65▲大剂量组8104.01±2.57▲149.37±102.14▲45.93±27.34▲

注：与溶剂对照组比较,▲P<0.01

结果表明，梗舒胶囊各剂量组能明显抑制大鼠体外血栓的形成，与溶剂对照组相比有显著性差异 (P<0.01)。提示：梗舒胶囊具有体外抗血栓作用。

4 讨 论 试验分别观察了梗舒胶囊对实验动物血小板功能、血栓形成的影响。结果显示，梗舒胶囊可降低实验性急性血瘀证大鼠血小板聚集性和粘附性；可抑制大鼠颈总动脉—颈外静脉血流旁路血栓形成；可抑制大鼠体外血栓的形成。提示，梗舒胶囊对脑血栓、脑栓塞等所致缺血性脑血管疾病具有防治作用。建议，可进一步进行抗脑缺血实验的研究。

[1] 崔邦铨.用玻球型血小板粘附仪直接测定血小板粘附率[J].临床检验杂志，2011,9(4)：201.

[2] 王 辉，刘 刚，罗顺德.莲心碱对血小板聚集、凝血功能和血栓形成的影响[J].中国药理学通报，2010,26(6)：768-771.

[3] 陈 奇.中药药理研究方法学 [M].第2版.北京：人民卫生出版社,2006：504-505.

[4] 岳海涛，李金成，吕铭洋，等.红花注射液对大鼠血栓形成的影响及其作用机制[J].中草药，2011，42(8)：1585-1587.

(收稿2015-06-17；修回2015-07-08)

*国家科技型中小企业创新基金创新项目(10C26226113297)

梗舒胶囊 活血化瘀 大鼠 动物 实验

R96

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2015.10.093