孙光辉

（荆州市中心医院 检验科， 湖北 荆州 442000）

梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种性病，患者数仅次于肺结核、乙型肝炎、细菌性和阿米巴性痢疾、淋病而高居第五位（2002年为第七位）。[1]临床上梅毒的诊断主要根据患者的临床症状和血清学检查，对不典型的梅毒患者，血清学检查是其主要手段，而TPPA（梅毒螺旋体被动颗粒凝集试验）与TP-ELISA（梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验）是检测血清学特异性抗体最常用的方法。TPPA（或TPHA）已被美国疾病预防控制中心定为确证方法，[2]而TPELISA对IgG和IgM都具有很好的检测能力，且操作简单、敏感度高、价格便宜、结果客观，因此，国内使用比较普遍。然而，有报道说老年患者梅毒阳性率高，[3]为进行更详细的了解，现对荆州市中心医院（以下简称“我院”）2 930例标本进行TPPA和TP-ELISA分析，过程如下：

一、研究对象与方法

（一）研究对象

2014年1月至2015年3月期间我院住院、体检及部分门诊患者共2 930例，其中60～70岁450例，70~90岁400例；对照组2080例，平均年龄37岁（20～60岁）。用美国BD公司生产的含分离胶的真空采血管抽取静脉血，3 700 r/min离心，分离血清进行检测。（标本污染、量不足、严重溶血、脂血不宜做此项检测，应重新采集标本。）

（二）仪器与试剂

RSP 100全自动标本处理系统、BEP III全自动酶免疫分析仪、北京万泰药业TP抗体诊断试剂盒（ELISA）、赛乐迪亚TPPA试剂盒（梅毒螺旋体抗体诊断试剂凝集法）、将浓缩洗涤液按1：20比例以蒸馏水稀释备用，其它试剂由原装移入专用试剂瓶、槽中使用。

（三）检测方法

1.初筛方法（TP-ELISA）：将血清标本依序放入RSP 100专用标本架中，将有条形码标识的抗TP微孔板、阴性对照、阳性对照和质控品放入仪器工作桌面相应位置，启动仪器开始加样。将加样完毕的微孔板移到BEP III微板运载器上，条形码端在内侧，按进入健，BEP III自动接受微板并进行检测。先用TP-ELISA法检测血清中梅毒特异性抗体。对阳性者，再用TPPA进行确证。

2.确证方法（TPPA）：用微量滴管将血清稀释液滴入微量反应板第1孔中（100 ul），第2至4孔中各1滴（25 ul），取25 ul血清标本至第1孔中，然后用微量加样器或微量移液管以2n的方式从第1孔依次稀释至第4孔，将试剂盒中的未致敏粒子滴入第3孔，致敏粒子滴入第4孔，混匀后加盖，室温（15～30℃）下水平静置2 h。

（四）结果判断

1.质量控制：所用仪器和试剂均符合国家参考品检定标准，每次检测随标本进行质控品测定均在控，参与卫生部临检中心和湖北省临检中心能力验证活动均合格，保证了结果的准确性。

2.假阳性判断：TP-ELlSA阳性而TPPA阴性，10～15 d后复检结果无变化，则判为假阳性。

3.真阳性判断：TP-ELlSA与TPPA均为阳性，判为真阳性。

（五）统计学方法

用SPSS17.0软件，采用t检验对计数资料进行统计分析。

二、结果分析

TP-ELISA法检测老年组梅毒特异性抗体假阳性率 60～70 岁年龄组 2.66%（12/450）、70～90 年龄组3.25%（13/400），均明显高于中青年组，不同年龄组间用t检验进行分析，结果P<0.05。详见表1。

表1 两组间梅毒抗体检测结果比较

三、讨论

本次结果显示，老年组和对照组之间梅毒抗体假阳性率有明显差异（P<0.05），且随年龄增加而升高。

在日常工作中，多种原因都可导致假阳性结果，如标本被污染、检测仪器、方法学、实验室操作不规范等，这些经过重复实验即可排除，[4]而机体的生理状态发生改变（如年龄变老）或某些疾病造成的，即便通过重复实验也无法避免。[5]主要由于老年人生理机能逐步退化，尤其是免疫功能的异常，易产生一些针对联接用的白蛋白抗体或异常蛋白质而干扰检测结果，出现假阳性。值得一提的是，虽然TPPA是直接针对梅毒螺旋体的特异性检测的确证方法，但在一般人群中也会有1%的假阳性。[6]现已知可造成TPPA假阳性的疾病有：结肠癌、淋巴肉瘤、糖尿病、类风湿性关节炎、红斑狼疮、丙型肝炎、肝硬化、AIDS、海洛因成瘾、生殖器疱疹、麻风甚至妊娠等。

梅毒血清学检验结果是诊断梅毒的重要依据，但并非惟一依据。诊断梅毒时，梅毒血清学检查不能取代病史询问和体格检查。只有在全面掌握患者的个人生活史、婚外性接触史及查体的基础上，综合分析梅毒化验结果，才能得到正确的诊断。

［1］武建国.老年人抗梅毒螺旋体抗体测定的假阳性率偏高[J].临床检验杂志，2006（4）：241-242.

［2］王柳溪.TP-ELISA法检测老年人梅毒抗体易产生假阳性原因分析[J].医学理论与实践，2008（9）：1085-1086.

［3］王素娟，徐建萍.3种梅毒检测方法的比较[J].现代预防医学，2008（3）：555-555.

［4］彭明喜.酶联免疫吸附试验检测梅毒抗体假阳性的原因分析[J].现代实用医学杂志，2006（2）：127-128.

［5］柯浩珍.老年人梅毒抗体易产生假阳性原因分析[J].医药前沿，2013（6）：203-204.

［6］姚卫，李红霞，江智辉等.梅毒血清学检测的适宜方法探讨[J].寄生虫病与感染性疾病，2008（2）：64-65.