刘秀萍，邓 方

缺血性脑血管病主要是由于血管病变引起血流中断或减少，导致相应血管供应区缺血缺氧而发生一系列病理生理反应。而促进损伤区域局部血管再生，建立良好的侧支循环是缺血后重要的代偿机制［1］。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)于1989 年由Ferara 等在牛垂体滤泡星形胶质细胞体外培养液中分离纯化，是胚胎期血管新生和血管形成的关键调节物。VEGF 及其受体(vascular endothelial growth factor receptor，VEGFR)系统，在缺血性脑血管病的微循环重建过程中起着至关重要的作用，可能是脑缺血后血管新生调控的中心环节［2］。银杏内酯(ginkgolides，GK)和白果内酯(bilobalide，BB)是银杏叶制剂中最为有效的成份，但其对于脑缺血后血管生成方面却鲜有文献报道。为深入研究其对急性脑缺血再灌注损伤的作用机制，本研究从血管新生角度，观察了GK 和BB 对脑缺血的保护作用及对缺血侧皮质VEGF 和VEGER-1 表达的影响。

1 材料和方法

1.1 实验动物 清洁级雄性Wistar 大鼠，体重260～280g，吉林大学实验动物中心提供，实验动物生产许可证号:SCXK(吉)2013-0001。

1.2 药物与试剂 GK(四川成都百裕公司提供，批号:20130801)和白果内酯(四川成都百裕公司提供，批号:NZ130609)，兔抗大鼠VEGF 抗体，VEGFR-1 抗体，β-actin，羊抗兔二抗，免疫组化试剂盒(PV-6000，GBI)，BCA 蛋白定量试剂盒，浓缩型DAB 试剂盒、ECL 显影液。

1.3 实验分组 将实验动物随机分为假手术组(Sham 组)、MCAO+盐水对照组(Saline 组)、MCAO+GK 组(10 mg/kg，GK 组)、MCAO+BB 组(10 mg/kg，BB 组)，每组6 只。每组动物于脑缺血再灌注前30 min 腹腔给药，假手术组和盐水对照组给予等量生理盐水。

1.4 大鼠脑缺血再灌注模型的制备 参照Zea Longa 改良线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞模型(middle cerebral artery occlusion，MCAO)。……