★　郭慧玲第一作者：郭慧玲，教授。研究方向：中药制剂新技术与新剂型。E-mail：ghl66@6.com。　江蕾　胡志方通信作者：胡志方，教授。研究方向：中药制剂新剂型与新技术。E-mail：hzf99@6.com。　赵晓娟　胡律江　郭三保　(.江西中医药大学　南昌330004；.江西中医药高等专科学校　江西 抚州 344000)

荷叶水提取物的降血脂作用实验探讨*

★郭慧玲1*第一作者：郭慧玲，教授。研究方向：中药制剂新技术与新剂型。E-mail：ghl6262@126.com。江蕾1胡志方2*通信作者：胡志方，教授。研究方向：中药制剂新剂型与新技术。E-mail：hzf9912@126.com。赵晓娟1胡律江1郭三保1(1.江西中医药大学南昌330004；2.江西中医药高等专科学校江西 抚州 344000)

摘要：目的：研究荷叶水提物对高脂血症小鼠的降血脂作用。方法：将昆明小鼠随机分成六组，即空白组、模型组、阳性对照组、低剂量组(5g/kg)、中剂量组(10g/kg)、高剂量组(20g/kg)，除空白组外，其他组均造成高脂血症模型，并且给予相应的药物，分别测定各组小鼠的TC、TG和HDL-C含量。结果：荷叶水提物能显著降低TC、TG水平，同时增高HDL-C水平。结论：荷叶水提物具有显著的降血脂作用。

关键词：荷叶；水提物；高血脂症；降血脂作用

荷叶(Lotus leaf)，为睡莲科植物莲的叶，属药、食两用植物，由于具有良好的减肥功效引起大众关注。荷叶于1991年被列入第二批“既是食品又是药品”的名单，有清暑化湿、升发清阳、凉血止血的功效[1]，主要分布于中国、日本、印度等亚热带和温带地区。荷叶具有调节血脂、抑菌、抗氧化、止血、抑制脂肪酶等作用[2]。高血脂主要包括高胆固醇血症、高甘油酯血症以及复合性高脂血症。随着现代生活饮食方式的改变，国人血脂异常率急剧增高，目前高血脂患者极为普遍，是造成动脉粥样硬化和冠心病的主要原因之一[3]。因此，调节脂质代谢对防治心脑血管疾病发生有着极其重要的作用[4]，如何防治高脂血症一直是研究热点。由于临床常用的西药类降血脂药物毒副作用较大，从天然药物中寻找降血脂有效成分的研究日益受到重视，中药治疗高血脂症有独特效果，作用虽缓慢但毒副作用小。本文主要通过高脂乳剂饲养小鼠，复制高血脂模型，探讨荷叶水提物的降血脂作用。

1材料与器材

1.1实验材料荷叶购自江西省南昌市乐康中药房(生产批号：131201，产地湖南)，经江西中医药大学药学院左月明副教授鉴定为睡莲科植物莲的叶(Lotus leaf)。猪胆盐(索莱宝科技有限公司，批号：604C051，规格：25g)；丙硫氧嘧啶片(上海朝晖药业有限公司，规格：50mg×100片，批号：1309F18)，胆固醇(索莱宝科技有限公司，批号：121B106，规格：100g)，蔗糖(西陇化工股份有限公司，批号：1403011，规格：500g)，猪油自制，辛伐他汀片(鲁南贝特制药有限公司，规格：5mg×24片，批号：国药准字H20030705)，水为蒸馏水，甘油三酯(TG)试剂盒(中生北控生物科技股份有限公司，批号：146561)，高密度脂蛋白(HDL-C)试剂盒(中生北控生物科技股份有限公司，批号：130521)，总胆固醇(TC)试剂盒(中生北控生物科技股份有限公司，批号：141661)。

1.2实验动物健康清洁级昆明种小鼠，体重18～22g，雄性，购自江西中医药大学动物实验中心，许可证号SCXK(赣)2011-0001。

1.3仪器和设备BT25S型电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)，KDM型调温电热套(山东鄄城华鲁电热仪器有限公司)，96孔酶标板(美国Costar公司)，Bio Tek ELx800型酶标仪(基因有限公司)，GZX-9076 MBE型数显鼓风干燥箱(上海博迅实业有限公司医疗设备厂)，RE-52型旋转蒸发器(上海亚荣生长仪器厂)，SHZ-D(III)型循环水式真空泵(巩义市予华仪器有限责任公司)，KQ5200DA型超声波清洗仪(昆山市超声仪器有限公司)，SIGMA 3-18K型高速离心机(德国SIGMA公司)，HH-4型数显恒温水浴锅(国华电器有限公司)，AB204-N型精密分析天平(METTLER TOLEDO上海衡器有限公司)。

2实验方法

2.1灌胃液样品的制备

2.1.1药品的配制低剂量药品的配制：称取荷叶25g，按料液比1∶30，提取温度为100℃，蒸馏水连续回流两次，每次2h，合并药液，浓缩定容至100mL，配制成0.25g/mL的药液，备用；中剂量药品的配制：称取荷叶50g，同上法得到0.5g/mL中剂量药液，备用；高剂量药品的配制：称取荷叶100g，同上法得到1.0g/mL高剂量药液，备用。

2.1.2阳性组对照药品的配制取辛伐他汀片50mg，碾碎后用蒸馏水溶解，定容至100mL，配制成0.5mg/mL，备用。

2.1.3脂肪乳剂的配制[5-6]称取20g猪油于37℃水浴锅融化后置于研钵中，依次加入10g胆固醇，10g蔗糖，1g丙硫氧嘧啶与研钵中，充分研匀，再加入吐温-80 1mL，丙二醇2mL，研磨均匀后，加入胆盐20mL研磨至乳化，加蒸馏水稀释定容至100mL，冷却，置于4℃冰箱冷藏，备用。

2.2实验动物的分组及给药方法[7]将实验小鼠适应性饲养7d后，随机分成六组：空白组、模型组、阳性对照组、荷叶低剂量组、中剂量组和高剂量组，每组12只，上午除空白组给予灌胃(ig)蒸馏水，其它各组小鼠均ig高脂乳剂，下午除空白组和模型组外，其它各组ig相应的药品，给药剂量见表1。造模两周后，各组小鼠禁食不禁水12h，末次给药2h后，摘眼球取血，静置2h，离心10min(4 000r/min)，取其血清按照试剂盒说明，采用酶标仪分别测定小鼠血清中TC、TG、HDL-C的水平。

表1　动物分组及给药剂量

注：表中荷叶给药剂量均为折合的生药材量。

±s，n=12)

注：模型组与空白组比较，△P<0.05，△△P<0.01；给药组与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01。

2.3测定方法

2.3.1甘油三酯采用酶比色法(GPO-PAP法)，将工作液与样品以100∶1的比例混合， 37℃保温10分钟，用酶标仪在波长490nm处测定吸光度，根据计算公式： CTG=ATG/A校准品×C校准品，计算结果见表2。式中CTG为甘油三酯浓度单位为mmol/L，C校准品浓度为2.26mmol/L，ATG为甘油三酯吸光度，A校准品为校准品吸光度。

2.3.2总胆固醇采用酶比色法(COD-PAP法)，将工作液与样品以100∶1的比例混合， 37℃保温6分钟，用酶标仪在波长490nm处测定TC值，根据公式：CTC=ATC/A校准品×C校准品，计算结果见表2。式中CTC为总胆固醇浓度单位mmol/L，C校准品浓度为5.19mmol/L，ATC为总胆固醇吸光度，A校准品为校准品吸光度。

2.3.3高密度脂蛋白采用磷钨酸-镁沉淀法，将工作液与样本上清液以40∶1的比例混合， 37℃保温6分钟，用酶标仪在490nm处测定HDL-C值，根据公式：CHDL-C=AHDL-C/A校准×C校准×2，计算结果见表2。式中CHDL-C为高密度脂蛋白浓度单位mmol/L，C校准品浓度为3.74mmol/L，AHDL-C为高密度脂蛋白吸光度，A校准品为校准品吸光度。

3结果

由表2可知，造模两周后，模型组小鼠血脂TC、TG水平明显高于空白组，而HDL-C水平模型组低于空白组，均有显著性差异(P<0.05)，表明造模成功，提示高脂乳剂灌胃法为较理想的造模方法。不同剂量给药组、对照组与模型组对比小鼠血脂TC、TG及HDL-C水平，结果表明均能显著降低TC、TG水平，升高HDL-C水平，实验表明各给药组均有显著的调节血脂作用。

4讨论

目前，造成小鼠高脂血症的常用方法有两种，即喂食高脂饲料和灌胃高脂乳剂，这两种造模方式均通过消化道吸收而形成，这与人类的饮食模式形成高脂血症相似。但喂食高脂饲料会使小鼠产生油腻感，易出现厌食，不易于掌握准确的小鼠摄入量，因此本实验参照文献[7]采用灌胃高脂乳剂法复制小鼠高脂血模型。由于甲状腺素具有降血脂功能，为避免其对实验结果的影响，在普通高脂乳剂(猪油，胆固醇，吐温，丙二醇)的基础上加入一定量的丙硫氧嘧啶，以抑制体内甲状腺素的分泌，并加入一定量的蔗糖使小鼠更容易形成高脂血症模型[6]。

以上实验结果表明荷叶水提物具有一定的降血脂功效，可为荷叶新剂型的开发提供参考依据。

参考文献

[1]国家药典委员会．中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社，2010：258.

[2]任贻军，张宏琳，高逢喜．荷叶的药理作用研究进展[J].中国药业，2009，18(20)：75-76.

[3]肖强．年龄、性别和体重指数与老年人群高血压、高血糖和高血脂的关系[J].中国老年杂志，2011，18(31)：3 626-3 637.

[4]谢金霞．荷叶降脂茶治疗高脂血症的临床观察[J].慢性病学杂志，2010，12(7)：634.

[5]李晓梅，郭曙光，康文艺．山楂提取物体外和体内抗氧化作用[J].精细化工，2009，26(4)：348-350.

[6]李淑珍，李进．黑果枸杞总黄酮降血脂作用[J].时珍国医国药，2012，23(5)：1 072-1 074.

[7]沈龙海，安泳潼，张瑱，等．几种高血脂症动物模型的比较[J].实验动物与比较医学，2012，32(2)：129-132.

The Study on Antihyperlipidemia of Aqueous Extract of Lotus Leaf

GUO Hui-ling1，JIANG Lei1， HU Zhi-fang2，ZHAO Xiao-juan1， HU Lv-jiang1，Guo San-bao1

1.JiangxiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Nanchang330004，China;

2.JiangxiCollegeofTraditionalChineseMedicine，Fuzhou344000，China.

Abstract:Objective:To study the antihyperlipidenmia effect of aqueous extract of lotus leaf on mice's lipids with hyperlipidemia. Methods: Kunming mice were randomly divided into six groups, including blank group, model group, positive control group, low does group (5g/kg aqueous extract of lotus leaf), middle does group (10g/kg), high does group (20g/kg), in addition to blank group, the other groups were established to became hyperlipidemia mice, and gave appropriate medicine, then determine the content of TC, TG, HDL-C. Results: Aqueous extract of lotus leaf could significantly decrease TC and TG levels, at the same time it could also rise the HDL-C level. Conclusion: Aqueous extract of lotus leaf show notable reducing blood lipid of mice.

Key words:Lotus Leaf; Aqueous Extract; Hyperlipidemia; Reducing Blood Lipid

收稿日期：(2014-09-16)编辑：薛铁瑛

中图分类号：R285.5

文献标识码：B

基金项目：*江西省教育厅科技计划项目(GJJ13599)。