汪 兰

广东药学院基础学院，广东广州 510006

子宫颈癌属于常见的妇科疾病之一，随着人们生活水平、生活质量的提高，宫颈癌发病率呈逐年上升的趋势发展，据有关研究表明，宫颈癌占女性生殖器官癌瘤中的第一位[1]。宫颈癌在世界各国均有大量的患病人群，发病率与死亡率极高[2]，根据地区的不同，观察发现子宫颈癌患病人群的发展趋势，可将其总结为乡村高于城市，山区高于平原。一旦患有子宫颈癌，将给女性患者的身体健康带来极大的威胁[3]，依据此类事实，本文将我院一年来收治的宫颈癌患者共56 例和宫颈良性肿瘤患者44例进行研究，通过检测子宫颈癌中Sam68 蛋白、核增殖抗原、皮钙黏附蛋白等项目的表达，对Sam68蛋白在宫颈癌细胞增殖的影响进行了深入的研究和探讨，相关报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本组选择我院于2012 年12 月～2013 年12月收治的宫颈癌患者共56 例和宫颈良性肿瘤患者44 例，前者作为观察组，后者作为对照组，同时每位患者均经临床资料、病理学及实验室检查证实存在宫颈组织病变，对每一名患者肿瘤组织中Sam68 蛋白、核增殖抗原（Ki67）、皮钙粘附蛋白（E-cadherin）指数变化进行分析和比较。100例患者均为女性，年龄23 ～78 岁，平均年龄（53.2±6.7）岁，两组患者病情、年龄、病程比较均无明显差异（P ＞0.05），可以进行对比分析。

1.2 方法

本次研究使用的试剂为Sam68 蛋白单克隆抗体（由上海瑞奇生物科技有限公司生产制造）[4]，免疫组化 Power Vision 二步法试剂盒PV-6002（由北京欣兴唐生物科技有限公司生产制造）， DAB 显色试剂盒（由北京康为世纪生产制造）[5]；严格按照试剂盒及Sam68 蛋白说明书进行操作，Sam68 蛋白、E-cadherin采用免疫组化PV 二步法染色，Sam68 蛋白抗浓度为1 ∶10[7]，E-cadherin 抗浓度为1 ∶200[8]。

1.3 诊断结果

在实验室显微镜下观察Sam68 蛋白的性质，若其胞核、胞浆染色呈棕黄色则为阳性，根据免疫组化半定量计分法对Sam68 蛋白阳性染色程度进行计分，无着色为0 分，浅黄色为1 分，棕黄色为2 分，棕褐色为3 分[9]；根据阳性细胞比例进行计分，阳性细胞比例≤5%计0 分，阳性细胞比例在5%～10%间计1 分，阳性细胞比例在11%～50%间计2 分，阳性细胞比例在51%～80%间计3 分，阳性细胞比例大于80%计4 分[10]；根据Sam68 蛋白染色与阳性细胞比例的乘积判断其阳性结果，0 分即为-，1 ～4分即为+，5 ～12 分即为++～+++。

在实验室显微镜下观察E-cadherin 的性质，若其胞核、胞浆染色呈棕黄色则为阳性，根据免疫组化半定量计分法对E-cadherin 阳性染色程度进行计分，计分情况与Sam68 蛋白阳性染色计分方法相同；根据E-cadherin 阳性细胞占细胞总数的平均值判断其阳性率，小于10%即为-，10%～50%即为+，大于50%即为++～+++。ki67 检测方法与E-cadherin 基本相同。

1.4 统计学方法

应用SPSS16.0 统计学软件对上述治疗进行数据的分析，计量资料采用（）表示，进行t 检验，计数资料进行x2检验，检验水准为α=0.05，相关性分析采用 Spearman 秩相关分析法[11]，P ＜0.05 时为差异具有统计学意义。

2 结果

本组选取的宫颈癌患者共56 例和宫颈良性肿瘤患者44 例，对两组患者肿瘤组织中Sam68 蛋白、Ki67、E-cadherin 指数变化情况进行分析和比较后，对于所取得的成果比较满意，Sam68 蛋白表达与TNM 分期、肿瘤大小有关，差异有显著统计学意义（P ＜0.05）；Sam68 蛋白表达与患者年龄、分化程度无关，差异无明显统计学意义（P ＞0.05）；Sam68 的表达水平临床病理因素的关系，如表1。Sam 68 蛋白在乳腺癌和乳腺良性肿瘤中表达，差异有显著统计学意义（P ＜0.05）。见图1。

图1 乳腺癌组织中 Sam68 蛋白表达情况（×400）。Sam68 蛋白在乳腺癌组织中，a 为强阳性表达；b 为度阳性表达；c 为弱阳性表达；d 为阴性表达

表1 Sam68的表达水平临床病理因素的关系

本次研究，两组患者Sam68 蛋白 E-cadherin 阳性例数为82（82%），基于Spearman 秩相关分析法的基础上，观察到Sam68 蛋白与E-cadherin 表达呈负相关的关系， r=-0.247，P=0.021。两组患者Sam68 蛋白与E-cadherin 的表达关系综合比较，见表2。

表2 两组患者Sam68蛋白与E-cadherin的表达关系综合比较

采用Spearman 秩相关分析法，观察到Sam68蛋白与Ki67 表达呈正相关的关系，r=-0.236，P=0.027。两组患者Sam68 蛋白与ki67 的表达关系综合比较见表3。

表3 两组患者Sam 68 蛋白与Ki67 表达关系综合比较

3 讨论

子宫颈癌是一种常见的妇科疾病，由于该病具有较高的发病率与致死率，严重威胁着女性的生命健康，根据相关研究数据显示，国内宫颈癌死亡率占总癌症死亡率的第四位[12]。近年来，子宫颈癌发病率越来越高，世界各地区均存在着许多子宫颈癌患者，该病好发于40 ～50 岁的女性，在临床上子宫颈癌的治疗方法比较单一[13]，主要依赖于手术治疗，患者处于早期子宫颈癌发展阶段，通常采用子宫切除术进行治疗。若发展到子宫颈癌晚期的患者，一般都会采用根治性治疗方式[14]，并联合外照射及近距离照射，此种治疗方法虽然能够在一定程度上控制病情，提高患者生存率，但是易于出现局部复发的情况[15]。

随着科技与医学水平的提高，治疗子宫颈癌患者由20 世纪90 年代的化疗联合标准放疗方式，直至变为今天的联合放化疗方式[16]，能够最大限度的提高患者生存率，降低复发率与病死率，延长患者生存周期。早期子宫颈癌患者若采用单纯放疗就可得到良好的治疗效果，甚至治愈，但是采用联合放化疗，则治疗效果相对不足，并且存在一定的风险性，易于产生一系列毒副后果。联合放化疗适用于治疗子宫颈癌晚期患者，虽然会出现局部复发率，但治疗效果相对理想[17]。

在子宫颈癌的检测中Sam68 蛋白具有较高的诊断意义，子宫颈癌患者体内Sam68 蛋白指数相对较高，尤其表现在对宫颈癌组织的表达[18]上，本次研究对100 例患者进行治疗后，子宫颈癌患者Sam68 蛋白表达水平明显高于宫颈良性肿瘤患者，并且与E-cadherin 表达呈正相关的关系，与Ki67 表达呈负相关的关系，由此可证明，Sam68 蛋白对宫颈癌细胞增殖有着明显的作用关系。同时观察Sam68 的表达水平临床病理因素的关系，发现Sam68 蛋白表达与TNM 分期、肿瘤大小有关，与患者年龄、分化程度无关。

本次研究结果与大量实验数据结果基本相似，这就说明，Sam68 蛋白在正常宫颈组织中的表达明显低于宫颈癌组织，Sam68 的表达及其胞质中的定位与宫颈癌组织转移有着密切的关联，因此，在临床上Sam68 蛋白能够作为检测早期宫颈癌总生存时间、无病生存时间的重要指标，并且具有一定的临床预测价值。与此同时，子宫颈癌患者下调Sam68 的表达水平具有抑制 Akt/GSK-3β/Snail 向上皮间质转化[19]，从而抑制宫颈癌组织及细胞的浸润和转移，是一种有效的预测宫颈癌组织淋巴结转移的独立预测因子。

根据大量研究表明，Sam68 蛋白有着控制细胞恶化、抑制肿瘤组织发展、促进恶性细胞凋亡的特性，随着研究的逐渐深入，发现Sam68 的表达水平与宫颈癌病理因素、预后有着密切的联系，从E-cadherin、Ki67 等癌细胞增殖抗原中可发现，Sam68 蛋白确实具备促进宫颈癌细胞增殖的作用。

在早期宫颈肿瘤转移的过程中，上皮细胞间质化出现的首要特性是E-cad 蛋白表达水平消除或不明显，Sam68 蛋白能够根据不同途径调控其下游分子GSK-3β、Snail 转录因子[20]，从而对E-cad herin 蛋白表达水平造成影响。本次研究，Sam68 蛋白与E-cadherin 表达呈负相关的关系，r=-0.247；P=0.021，与Ki67 表达呈正相关的关系，r=-0.236；P=0.027，这就说明Sam68 蛋白对E-cadherin、Ki67有着不同的影响。

综上所述，研究既往的有关实验数据，我们会发现有许多临床指标与子宫颈癌的预后息息相关，例如分子功能影像学指标、离体标本相关指标、宫颈癌肿瘤内环境指标、与宫颈癌细胞生物学特性相关指标等，但由于许多指标的检测过程太过复杂，存在一定的局限性，而在宫颈癌组织中Sam68 蛋白的表达明显高于正常宫颈组织，因此，Sam68 蛋白对宫颈癌细胞增殖具有促进作用。

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