覆盆子的补肾活性成分研究

籍艳秋

【摘要】目的 分析覆盆子的补肾活性成分。方法 覆盆子果实以70%乙醇提取，以肾阳虚模型测定和筛选覆盆子补肾活性成分，并以光谱法明确其化学结构。结果 共得到5个单体，鉴定4个，分别为覆盆子素、葡萄糖苷、山奈酚和槲皮素，其中覆盆子素具有较高生物活性。结论 覆盆子素为新化合物，具有良好的天然生物活性，有望被开发为新的补肾药物。

【关键词】覆盆子；肾阳虚；补肾；活性成分

作者单位：136001 四平市中医医院

覆盆子属于蔷薇科植物，是一味常用的中药，具有益肾固精、抗炎消毒之功效，可用于治疗肾虚腰痛、阳痿早泄、尿频等，该类药物目前已经开发和利用，但是关于其治疗肾衰有效成分的报道并不多见，为进一步明确其临床应用价值，测定其补肾活性成分尤为必要［1］。本实验通过建立肾阳虚模型，对覆盆子成分进行测定，现报道如下。

1　材料与方法

1.1实验材料

购进63只6周龄小鼠作为实验对象，均为雄性，体重26 g左右；受试样品为覆盆子70%乙醇提取物，阳性对照药物为甲睾酮片、黑褐色大蜜丸和金匮肾气丸，选模型药品为氢化可的松。

1.2实验方法

1.2.1实验分组和样品配制 将63只小鼠随机分为总提取物低、中、高剂量组，甲睾酮组、金匮肾气丸组，模型组和空白组，共7组，分列Ⅰ～Ⅶ组，各9只，甲睾酮组、金匮肾气丸组为对照组。覆盆子总提物均以1%西黄芪胶配制，低剂量组为13.5 mg/ml混悬液，中剂量组为40.5 mg/ml混悬液，高剂量组为121.5 mg/ml混悬液，对照组分别为30 mg/ml和150 mg/ml混悬液；依次对小鼠进行标号，空白组注射生理盐水，其余组均注射氢化可的松溶液，同时灌胃给药，体积均为0.5 ml；2周后，眼眶取血并处理小鼠，取睾丸和肾脏，置入10%甲醛溶液中浸泡，组织切片，离心，取上层血清保存待测［2］。

1.2.2活性部位试验及化学成分提取分离

称取50 kg覆盆子果实，置于70%乙醇渗漉，合并渗漉后回收乙醇；取6.5 kg流浸膏，分别制备石油醚、二氯甲烷和正丁醇萃取部位及水部位，并按照使用剂量分为低、中、高剂量组，分别为2 g/kg、6 g/kg、18 g/kg，并对二氯甲烷和正丁醇部位进行提取和分离。

2　结果

2.1补肾活性分析

各组小鼠肾脏和睾丸重量比较差异无意义。以10%甲醛固定肾脏和睾丸，通过电子显微镜观察发现，对照组和总提物中、高剂量组的细胞损伤要小于模型组和空白组，小鼠肾精亏损症状和睾丸病例损伤程度均有所减轻，其中总提物剂量组对血压睾酮浓度降低起到了一定的抑制作用，高剂量组效果更为明显。

2.2活性部位筛选和化学成分测定

通过对小鼠组织切片的观察发现，正丁醇中、高剂量组的细胞损伤小于其他组，小鼠肾精亏损症状和睾丸损伤程度均有所减轻，高剂量组效果更为明显。正丁醇部位化合物结构鉴定结果为Y-11、Y-6、Y-9、Y-15，即覆盆子素、葡萄糖苷、山奈酚和槲皮素，均为黄色粉末，光谱法检测为：（1）覆盆子素，分子量为248，分子式为C12H8O6，结构呈环状排列，波谱数据为：EI-MS m/z : 248［M］+（100），164（43）；UV（EtOH） : 364（10 143），299 （28 317），200（17 978）。（2）葡萄糖苷（4，5，7-三羟基黄酮醇-3-O-β-D-葡萄糖苷），分子量为594，波谱数据为：ES-MS m/z : 593［M］+，5 923［M］+（100）；HNMR苷元部分为8.00 （3H，H-2，6，），6.31（2H，H-8），6.13（1H，H-6）；糖部分为5.22 （1H，H-1），4.3（5H，m）；桂皮酰基为7.32（2H，H-2，6，，），7.29 （1H，H-7，，）。13C-NMR在此不做列述。（3）山奈酚，分子量为286，ES-MS m/z : 284［M-H］+，285［M］+（15）。（4）槲皮素，分子量为302，甲睾酮组、金匮肾气丸组ES-MS m/z : 300［M］+，（100），272（15），69（20）［3-4］。

3　讨论

综上所述，对于氢化可的松诱导的肾阳虚所致肾脏和睾丸病理病变，提取物中、高剂量组均有一定的改善，证实覆盆子提取物对肾阳虚能够起到有效的保护作用，通过病理切片的观察，确定其活性部位为正丁醇萃取部位，经化合物结构鉴定，其主要化学成分为覆盆子素、葡萄糖苷、山奈酚和槲皮素，前1种属于香豆素类化合物，后3种属于黄酮类成分，其中覆盆子素结构较为新颖，生物活性较高，具有很好的药物应用价值，且该类资源较多、易获得，开发利用前景广阔。

参考文献

［1］扈婧. 覆盆子活性物质提取工艺的优化［J］.食品科技，2014，3（11）:238-241.

［2］雷利芳. 覆盆子的抗氧化活性及其与化学成分和显微特征常数的相关性研究［D］. 郑州：郑州大学，2013.

［3］李安良，杨淑琴，郭秀茹. 化妆品活性成分覆盆子酮葡糖苷的研究进展［J］.香料香精化妆品，2014，12（4）: 643-666.

［4］吴峰华，刘相真，杨虎清，等. 覆盆子醇提物及其不同极性部位抗氧化活性研究［J］. 中国食品学报，2012，12（2）：27-29.

Research the Active Components From the Fruits of Rubus Chingii Hu on Replenishing Kidney

JI YanqiuSiping Municipal Hospital of Traditional Chinese Medicine，Siping 136001，China

【Abstract】

Objective To analyze the active ingredients on replenishing kidney from the fruits of rubus chingii hu. Methods The fruits of rubus chingii hu was extracted with 70% ethanol，with kidney yang deficiency model determing and screening of the active ingredients of replenishing kidney and spectroscopy cleared its chemical structure. Results There were five monomers，identification of four，respectively，raspberry，glucoside，kaempferol and quercetin，including rubus chingii hu element had higher biological activity. Conclusion Rubus chingii hu element is a new compound， with good natural biological activity， and is expected to be developed as a new drug for replenishing kidney.

【Key words】Rubus chingii hu，Kidney yang deficiency，Replenishing kidney，Active ingredient

doi:10.3969/j.issn.1674-9316.2015.19.096

【中图分类号】R692

【文献标识码】B

【文章编号】1674-9316（2015）19-0125-02