刘丽君 李大玲

（吉林省四平市中心人民医院，吉林 四平 136000）

生物监测技术在消毒供应中心的应用

刘丽君 李大玲

（吉林省四平市中心人民医院，吉林 四平 136000）

目的 消毒供应中心的工作，就是使医院所有可重复使用的医疗器械、物品由清洁变为无菌的过程，从而为临床科室提供最安全可靠的医疗用品，所以，每一个环节都至关重要，通过生物监测技术在消毒供应中心的应用，提高灭菌质量控制合格率，确保灭菌物品合格率达到100%。方法 使用标准包和3M快速阅读器，对生物指示剂进行培养，自动读取最终阴性荧光检测结果，是灭菌合格率检测的金标准。结果 我院2010年1月至2014年5月进行的2047次生物监测中，有2例测试结果为阳性，阳性率占0.001%，对于出现的阳性结果，我们通过给与措施干预，保证了灭菌物品合格。 结论 生物监测技术在消毒供应中心的应用，不仅降低医院感染的发生率，确保了灭菌物品合格率，而且有效保证了医疗和护理工作质量，提高了医院的经济效益和社会效益。

生物监测技术；消毒供应中心；应用

随着消毒供应中心的发展，工作人员对灭菌物品的监测已经从单纯的终末质量监测扩展到全过程的质量监测，而生物监测技术是唯一含有活的微生物（芽胞）对灭菌过程进行监测和挑战的监测技术，它能够通过标准化的菌株和合乎要求的抗力来考核整个灭菌负荷是否灭菌合格［1］，是灭菌质量控制的关键。我院消毒供应中心自2010年1月开展此项技术，至2014年5月末对四台高压蒸汽灭菌器和一台环氧乙烷灭菌器进行了2047次生物监测，有效的保证了灭菌物品的合格率，现将使用体会总结如下。

1　资料与方法

1.1材料：使用三台脉动真空压力蒸汽灭菌器 、一台环氧乙烷灭菌器、一台低温等离子灭菌器。2010年使用自制标准包、2011年以后采用3M综合挑战测试包、监测材料使用3M快速生物培养阅读器（ATTEST290；ATTEST290G）及3M快速生物指示剂。

1.2方法

1.2.1生物标准测试包制作：生物标准测试包由16条41 cm×66 cm的全棉手术巾制作而成，将每条手术巾的长的一边先折成3层，短的一边折成2层，然后重叠放置，做成23 cm×23 cm×15 cm大小的测试包，将2个嗜热脂肪杆菌芽孢菌片分别装入灭菌小纸袋内，置于测试包中心部位。平放于灭菌器排气口上方最难灭菌的部位，小型灭菌器的生物测试包应侧放。也可使用一次性综合挑战包对灭菌器的灭菌质量进行监测。经一个灭菌周期后，在无菌条件下，取出指示菌片，投入培养基中进行培养，观察颜色变化。都不变色，判定为灭菌合格；由紫色变为黄色时，则灭菌过程不合格。紧急情况有植入物灭菌时，可在标准测试包内加入第五类化学指示物，可作为提前放行的标志，然后继续培养生物指示剂，并且要将结果通知到使用部门。一次性综合挑战包观察培养结果时必须选择同批次的指示剂作为对照，阳性对照组阳性，测试组培养阴性可以判定灭菌的结果合格。

嗜热脂肪杆菌（ATCC7953）是国际标准抗力的芽孢，该芽孢菌片含菌量为1.02×106 cfu/片，该芽孢杆菌最适生长繁殖温度为56～60 ℃、培养24 h可形成菌落，该菌为需氧芽孢杆菌，其细胞繁殖体对培养基要求低，在溴甲酚紫蛋白胨琼脂上是米黄色。该菌无毒，热抗性稳定，在4 ℃冰箱保存6个月抗力无明显下降，在常温下（20 ℃左右）可保存1个月。热死亡时间为121 ℃、3.9 min阳性，19 min阴性。D值1.3～1.9 min。枯草杆菌黑色变种芽孢ATCC9372，抗力要求为：菌量在5×105～5×106cfu/片，在环氧乙烷剂量为（600±30）mg/L，作用温度为（54±2） ℃，相对湿度为（60±10）%的条件下，其杀灭90%该微生物的D值为2.6～5.8 min，存活时间≥7.8 min，死亡时间≤58 min。传统的生物监测手段需进行细菌培养，2～7 d才能测试出结果，特别是在植入物零风险管理应用上显得时效性很差。2010年开展的生物监测技术实现了快速检测，及时准确的提供灭菌物品质量的监控信息，简化了工作程序，经过一个灭菌周期后，取出生物指示剂，做好个人防护，按下生物指示剂瓶帽，在阅读器压碎孔内挤压试管，捏住指示剂瓶帽端，在桌面上轻轻敲打指示剂试管的底部，再轻摇使培养基湿润试管底部的菌片，最后将试管放入培养阅读孔内，同时取未经灭菌的试管插入对照阅读孔一起放入自动阅读器中培养，观察后将对照管及测试管标签粘贴在测试记录卡上。

1.2.2结果判定方法：使用快速阅读器时要提前0.5 h预热，3 h后观察结果：培养阅读孔显示指示灯为绿色（-），对照阅读孔显示指示灯为红色（+）可判定灭菌合格，可以放行。我院2010年1月至2014年5月进行的2047次生物监测中，有2例测试结果为阳性，阳性率占0.001%，查找原因，其中1例由于环氧乙烷新设备在按装调试阶段，经厂家工程师进一步调试后，灭菌结果为阴性，另外1例是由于生物指示剂在培养过程中，指示剂帽未能完全按下，培养基与菌片未完全混合导致假阳性引起。

2　结 果

2.1生物监测的前提是灭菌器的物理、化学监测首先合格，只有三项监测全部合格，灭菌包才可发放。生物监测阳性或可疑时，应立即采取冻结灭菌物品措施，召回自上次生物监测以来所有尚未使用的灭菌物品，重新处理，并分析原因，改进后生物监测连续3次合格方可使用。 生物监测记录作为灭菌质量追溯之源，保存3年以上。使用快速生物监测方法，结果快速、准确，且具有很高的使用价值［2］，操作简便，明显提高了工作效率和降低了医院感染率的发生。

2.2风险分析及解决办法：①有试剂破损渗漏对工作人员造成生物污染的可能。解决办法：注意保护试剂，防止挤压碰撞，每次测试时，包内放2个试剂，并装在纸袋中。②出现假阳性的可能。解决办法：与操作人员共同探讨，分析原因，重复操作。以确定阳性的真伪。通过持续改进，使此项技术达到完善和提高，在工作过程中，使所有应该使用此项技术的环节1 00%运用，从而保证无菌物品的安全性。最大限度地满足临床需求。

3　讨 论

消毒供应中心的工作，就是使医院所有可重复使用的医疗器械、物品由清洁变为无菌的过程，从而为临床科室提供最安全可靠的医疗用品，所以，每一个环节都至关重要，工作中，不但清洗、包装的过程要严格执行各项标准，灭菌的环节更是要严格按照标准设定压力、温度和时间，才可以达到器械的无菌要求，但是，是不是真正达到了没有细菌生长了呢？在工作过程中，虽然有工艺流程监测、化学指示卡和化学指示物等监测手段，但是，但由于灭菌方法设备复杂，影响因素较多，容易出问题，最具有说服力的还是生物监测，生物监测技术是对高压蒸汽灭菌器和环氧乙烷灭菌器灭菌效果的监测手段之一，它是使用活的微生物对无菌物品进行监测的方法，它可以有效证明物品包内微生物是否已全部死亡，是一种最可靠的衡量灭菌物品质量的金标准。2009年版《消毒技术规范》严格规定，压力蒸汽灭菌器必须每周常规生物检测一次。在新购设备起用前、使用植入性物品（凡在体内存留30 d以上的医疗器械和物品均被视为植入性物品其中包括骨科的钢板、钢钉、钢丝；妇科的节育环等。）和外来物品（指厂家直接投放的器械和物品，如心脏起搏器、血管支架等），除进行物理工艺流程监测、化学指示卡、指示胶带、B-D监测以外，还必须对热抗力最强的嗜热脂肪杆菌芽孢作为指示剂的生物监测，此项监测属于裁定性监测。现在一些欧洲国家和美国对于此项工作做的非常好，而我们国内因技术和资金原因，除部分3级医院以外，其他医院并没有得到重视，我院自2010年开展了此项工作。此项技术引进与应用，用较小的经济支出获得防止大面积感染扩散的重大损失。它有效地提高了医疗护理质量，降低医院感染的发生率。确保灭菌物品合格率100%，不仅大大地提高了灭菌效果的安全性，同时，对医院的社会效益和经济效益都产生了积极的作用，对市内其他医院，乃至周边地区医院此项工作的开展起到引领和指导作用。

［1］盛翠宝，袁琼.快速生物监测假性结果原因分析［J］.中华医院感染学杂志，2003，13（2）：170.

［2］周逞丽.快速生物监测法对高压蒸汽灭菌效果监测的评价［J］.实用预防医学，2008，15（3）：886.

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1671-8194（2015）27-0284-02