胡 成， 朱善元， 左伟勇， 王安平， 吴 双， 洪伟鸣， 成大荣， 马丽丽，王永娟

(1.扬州大学兽医学院，江苏 扬州 225009;2.江苏农牧科技职业学院，江苏 泰州 225300;3.甘肃农业大学动物医学院，甘肃兰州730070)

鸭 I型肝炎病毒(Duck hepatitis virus type I，DHV I)是一种高致死性、高传播性的病毒性传染病病原［1］。该病毒传播迅速，主要侵害4周龄以内的雏鸭。病雏鸭的特征为意识紊乱，急性肝炎，肝脏肿大，有出血斑点［2-3］。在新疫区，本病的死亡率很高，可达90%以上，是危害养鸭业发展最为严重的传染病之一［4］。

DHV I的传统检测方法有血清中和试验、琼脂扩散试验和酶联免疫吸附试验等，这些检测方法虽然可以对病原做出诊断，但是存在灵敏性不高，试验时间长，重复性低，不易标准化等缺点，在实际应用中有一定的局限性［5-7］。目前，已建立的RT-PCR和荧光定量RT-PCR检测方法，虽然灵敏性相对较高，但是需要使用昂贵的仪器和试剂，专业的人员，试验周期较长，不能适应基层兽医站和养殖场简便易行快速检测的需要［8-9］。

环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification，LAMP)，是2000年由日本荣研化学株式会社开发的一种新型的恒温核酸扩增方法［10］。该技术依赖于能够识别靶序列上特异区域的引物和一种具有解旋功能的Bst DNA聚合酶，能够在等温条件下，短时间内实现核酸的指数级扩增［11］。以其简单、快速、高效、灵敏、特异等诸多优点［12-14］受到越来越多兽医工作者的关注。在一些病原微生物的检测中已经开始得到推广应用［15-18］。目前，国内尚无针对鸭I型肝炎病毒的一步法快速RT-LAMP检测方法。因此本研究设计了一套特异性引物，拟建立了DHV I的可视化检测方法，为研制DHV I的快速检测试剂盒打下基础。……