李 琳， 付晓佳， 杨燕燕， 韦银凤， 陈崇顺

(南京师范大学生命科学学院，江苏省生物多样性与生物技术重点实验室，江苏 南京 210023)

洋桔梗［Eustoma grandiflorum(Raf.)Shinn.］是龙胆科草原龙胆属观赏植物，原产于北美洲［1］。经过不断的遗传改良，洋桔梗以茎秆修长，花色清新，花型别致，而倍受人们喜爱，成为著名的切花和盆花花卉［2］。2009年，洋桔梗就已跻身世界切花市场的前10 位［3］。

自从洋桔梗在全世界范围内引种栽培以来，人们发现其易受多种植物病原的侵害［4］。按照病原不同，可将洋桔梗病害分为病毒性病害、细菌性病害以及真菌性病害。而在所有病害中，由真菌所引起的病害占大部分［5］。这些病害大大降低了洋桔梗的观赏价值和商业价值。利用基因工程方法改良作物性状可以减少育种时间，更快培育出具有商业价值的新品种，成为传统育种方式的重要补充［6］。

在植物抗真菌病害基因工程育种的研究中，几丁质酶基因是广泛选用的目的基因。几丁质酶(Chitinase，EC 3.2.1.14)是一种催化β-1，4糖苷键的水解酶，可将几丁质降解为N-乙酰氨基葡萄糖［7］。几丁质是由N-乙酰氨基葡萄糖通过β-1，4糖苷键连接而成的生物多聚物，是多数真菌细胞壁的组成成分［8］。因此，几丁质酶在抵御病原真菌对植物的侵害方面具有重要作用，是植物防御系统的重要组成部分［9］。防治真菌病害的几丁质酶基因工程研究，已经在烟草、油菜、小麦等作物上取得不同程度的进展。1986年，Schlumbaum等［10］首次报道，提纯的菜豆几丁质酶具有抗真菌的活性。1991年，Broglie等［11］首次报道将菜豆几丁质酶基因置于CaMV35S启动子控制下，转入烟草和油菜，转基因植物组成型表达菜豆几丁质酶基因，对立枯丝核菌表现出抗性，推迟了发病时间。……