祝 强，王 婧，董 隽，史立新，张 旭，洪宝发

0 引 言

雌激素受体是雌激素作用于靶器官的重要路径之一。雌激素水平、雌激素受体表达的差异，都会使细胞产生对雌激素的不同应答［1-3］。雌激素受体为配体依赖的类固醇超家族成员之一，有α，β 2种亚型，虽有高度同源性，但功能不同［4］。骨髓基质干细胞具有高度自我更新和多向分化的潜能，可以定向或横向分化为多种细胞［5］，目前已成为生命科学中的研究热点。作为雌激素靶器官的BMSCs，不仅表达ERα［6］，更与ERα的生理功能相关。随着对ER研究的深入，有关ER的实验要求也随之越来越高，如何建立一个稳定的实验平台更好地进行相关研究成了迫切需要解决的问题。本实验构建大鼠ERα基因表达载体，并观察其在rBMSCs中的表达，为进一步探讨ERα的生理功能，尤其是在研究雌激素靶器官中的信号通路奠定基础。

1 材料与方法

1.1 实验动物 8周龄雌性SD大鼠，4只，购于北京大学医学部动物中心。动物实验合格证号:京动字8910R018。动物实验遵从实验动物操作规范及伦理规范。SD大鼠的饲养环境:空气充足，12 h光照，室温(22±2)℃，湿度45%～65%，自由饮食及饮水。

1.2 实验材料 胎牛血清(美国Gibco公司)，DMEM培养液(美国Hyclone公司)，总RNA提取试剂(北京欣博盛生物技术公司)，cDNA合成第一链试剂盒(日本Toyobo公司)，2×Trans Taq HIFI PCR SuperMixⅡ(北京全式金生物技术公司)，限制性内切酶BamHⅠ及XhoⅠ、T4 DNA连接酶、Prime STARTM HS DNA聚合酶、pMD18-T载体、DNA marker DL2000(大连宝生生物有限公司)，质粒抽提及胶回收纯化试剂盒(美国QIAGEN公司)，E.Coli菌株DH5(上海第二军医大学生化教研室)，pcDNA3.1(+)质粒(美国 Invitrogen公司)，rBMSCs(广州赛业公司……