时文祥，张乃元

（1.南京瑞尔医药有限公司，江苏 南京 210061；2.南京海鲸药业有限公司，江苏 南京 210061）

0 引言

黄藤素胶囊由防己科天仙藤属植物黄藤中提取的黄藤素及适量药用辅料经制粒、干燥、灌装而成的胶囊。具有清热解毒的功效，具有较强的抑制霉菌、葡萄球菌、淋球菌、支原体、衣原体、抗酸性分析杆菌的作用。主要用于妇科炎症，菌痢，肠炎，呼吸道及泌尿道感染，外科感染，眼结膜炎等［1，2］。本品是根据黄藤素片改剂型而来，为有效控制其质量，采用薄层色谱法对黄藤素进行了薄层色谱鉴别，采用高效液相色谱法对测定溶出度，并测定了盐酸巴马汀的含量。

1 仪器与试药

岛津LC-10ATvp液相色谱仪，SPD-10Avp检测器，HW2000色谱工作站；盐酸巴马汀对照品（0732-200005）由中国药品生物制品检定所提供；乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂为分析纯；黄藤素胶囊（批号为 090223-1、090225-1、090227-1，由淮安润邦药业有限公司提供）、阴性对照品自制。

2 薄层色谱鉴别

（1）黄藤素的TLC鉴别。取本品内容物20mg，加无水乙醇溶解制成每1ml含2mg的溶液，作为供试品溶液。另取盐酸巴马汀对照品适量，加无水乙醇溶解制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点样于同一硅胶GF254 薄层板上，分别以正丁醇-乙酸-水（7∶1∶2）（系统 1）以及甲醇-氨水-水（5 ∶5∶1∶1）（系统 2）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。结果如图1所示。

（2）取本品内容物适量（约相当于黄藤素0.2g），加水20ml，缓缓加热使溶解，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加硫酸，呈黄绿色，微热后，颜色不变。

图1 黄藤素的TLC鉴别

3 溶出度研究

3.1 色谱条件

日本岛津 C18柱（150×4.6mm，5μm）色谱柱；流动相：乙腈﹕0.85%的磷酸二氢钾溶液（含0.425%的十二烷基磺酸钠）（60∶40）；流速 1.0ml/min；检测波长为 345nm；柱温 25℃。理论塔板数按盐酸巴马汀计算，不得低于2500。

3.2 对照品溶液的配制

精密称取105℃干燥至恒重的盐酸巴马汀对照品适量，加流动相制成每1ml含20μg的溶液，作为对照品溶液。

3.3 囊壳及空白辅料干扰试验

称取处方量辅料及空胶囊壳1粒，照溶出度试验法配制成溶液，照溶出度测定法测定，结果表明：辅料及囊壳在溶出度测定方法中不产生干扰。

3.4 标准曲线

参照含量测定时的标准曲线A=43005.17c+3406.46，r=0.9998。线性范围为：0.0506～0.8096μg。

3.5 回收率试验

取已知含量（以盐酸巴马汀计算）的黄藤素原料，按处方量80%，100%，120%的量称取，辅料按处方量100%称取，加入1粒空胶囊壳，置100ml量瓶中，用溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液1.0ml至50ml量瓶中，加溶剂至刻度，摇匀，照溶出度测定法测定，并计算测定的盐酸巴马汀的量，由此计算回收率。结果如表1所示。

由上述试验可知本法的回收率较高，符合试验的要求。

3.6 溶液稳定性试验

取090223-1批溶出液，在室温条件下放置，分别于0，0.5，2，4，8，12 小时进样，依法测定，考察盐酸巴马汀在0.1mol/L盐酸溶液中的稳定性。结果12小时内，RSD%为0.16。

3.7 溶出曲线与均一性

分别取3批样品各6粒，照溶出度测定法（《中国药典》2010年版附录XC第一法），以盐酸溶液（9→1000）900ml为溶出介质，转速为每分钟100转，温度为37±0.5℃，依法操作，分别于 5，10，15，20，30，45min 取溶出液 5ml（同时补加溶剂5ml），滤过，精密量取续滤液2.0ml置10ml量瓶中，加上述溶剂稀释至刻度，作为供试品溶液。

另取装量差异项下内容物，混合均匀，精密称取适量（约相当于平均1粒的装量）至100ml量瓶中，加流动相适量使溶解，用上述溶剂稀释至刻度，摇匀，取适量滤过，精密量取续滤液2.0ml，加上述溶剂稀释到刻度，摇匀。照含量测定项下色谱条件测定，按两者峰面积的比值计算每粒在各时间点的溶出百分量。试验结果表明，样品的溶出均一性良好，3批样品之间溶出亦无明显诧异。

3.8 溶出度的测定

取本品，照溶出度测定法（《中国药典》2010年版二部附录XC第一法），以盐酸溶液（9→1000）900ml为溶出介质，转速为每分钟100转，依法操作，45分钟时，取溶液，滤过，精密量取续滤液适量，用上述溶剂稀释成每1ml约含20μg的溶液。另取装量差异项下内容物，混合均匀，精密称取适量（约相当于平均1粒的装量），加流动相适量使溶解，用上述溶剂稀释，滤过，取续滤液适量，按标示量用上述溶剂稀释成每1ml约含20μg的溶液。取上述两种溶液，照含量测定项下的色谱条件测定，按两者峰面积比值计算每粒溶出度；拟定黄藤素胶囊45min，溶出限度为75%，结果如表2所示。

表1 溶出度试验的回收率试验结果（以盐酸巴马汀计）

表2 溶出度测定结果（%）

4 含量测定

根据参考文献［3］，用同样方法测得10批样品含量平均为98.89mg（以盐酸巴马汀计）。

5 讨论与小结

（1）本品系根据黄藤素片剂改剂型而来，在原质量标准基础上，增加了对黄藤素进行了薄层色谱鉴别研究，试验结果确证，该鉴别方法简便，重现性和专属性良好。曾研究比较了自然光、300nm、254nm、365nm等不同观察条件下的斑点显示，结果以300nm、254nm斑点较为清晰，且能清晰的显示杂质斑点。由于300nm为非常用波长，因此最终选择254nm为检测波长。

（2）由于中国药典1977年版黄藤素片标准中并没有溶出度检查项目，我们根据新颁布的有关规定，参照化学药品中对溶出度的研究方法，对本品进行溶出度研究。

测定波长及方法选择，称取盐酸巴马汀适量，精密称定，加流动相溶解，照分光光度法（中国药典2010年版二部附录IV A）测定，在200～500nm波长范围内扫描，结果表明本品0.1mol/L盐酸溶液在345nm波长处有最大吸收。因此，选择345nm为测定波长。

样品溶剂选择，根据其主要成分黄藤素的溶解性质（在热水中易溶，在水中略溶），参考化学药品同类品种，我们选择溶出度方法为溶出度测定法第一法（中国药典2010年版二部附录 XC），以盐酸溶液（9→1000）900ml为溶剂。

［1］中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典［M］.北京：中国医药科技出版社，1977.

［2］国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草第3册［M］.上海：上海科学技术出版社，2000.

［3］何广雄，张发成，潘海祥，等.黄藤素胶囊含量的RP-HPLC测定［J］.江苏药学与临床研究，2005（5）：42～44.