PTEN基因对兔晶状体上皮细胞增殖抑制作用的实验研究△
2014-11-13赵宁张瑞君刘磊李佳刘宁宁
赵宁 张瑞君 刘磊 李佳 刘宁宁
白内障是世界范围内的主要致盲性眼病。白内障囊外摘出及超声乳化白内障吸出联合人工晶状体植入术是现代治疗白内障的常用方法。然而晶状体后囊膜混浊(posterior capsule opacification,PCO)是白内障术后的常见并发症,严重影响患者术后视力[1]。细胞因子刺激晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)增殖,占据原先无细胞的后囊膜,是形成PCO的主要原因。细胞因子与细胞膜表面分布的相应受体结合后,通过多种途径将信号传递到胞核内,促进或抑制特定靶基因的表达,调节细胞生长。
在细胞因子受体介导的信号转导途径中,磷脂酰肌醇三磷酸激酶(phosphatidylinositol-3 kinase,PI-3k)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)信号转导途径是调控细胞骨架及凋亡的重要途径[2-3]。PKB是PI-3k/PKB信号转导系统中重要的下游激酶,PKB磷酸化后才能表现出活性[4-5]。已有研究表明,PI3K信号转导途径参与 LEC的迁移、分化[6-7]。而 PTEN是至今为止发现的第一个具有磷酸酶活性的抑癌基因,主要通过其脂质磷酸酶活性阻断PI-3k信号转导途径,从而诱导细胞凋亡、抑制细胞生长、调节细胞迁移与黏附,在肿瘤研究领域得到大量证实[8-10]。本研究旨在为研究白内障术后LEC增殖过程中是否存在PTEN基因对PI-3k/PKB信号转导途径的抑制作用,为防治后发性白内障提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物与分组 选用中国医科大学实验动物部提供的健康白色家兔42只(84眼),8~10周龄,雌雄各半,体质量(1.5±0.3)kg,随机分为实验组(36只)和对照组(6只)。
1.2 试剂与仪器 PTEN mRNA原位杂交检测试剂盒、鼠抗兔PCNA单克隆抗体、小鼠IgG链酶亲合素生物素复合物免疫组织化学试剂盒、二氨基联苯胺(diaminobenzidin,DAB)显色试剂盒、焦碳酸二乙酯(diethyl pyrocarbonate,DEPC)均为武汉博士德公司产品。……
