高伟 程燕 吴洁 王亮 赵帅

随着人民生活环境的不断改变，干眼症的发病率不断增加，并有年轻化的倾向。有研究表明［1］，55岁以上的人群中干眼症发病率高达10%～20%。引起干眼症的病因很多，其发病机制十分复杂。近年来，对于干眼症的研究也逐渐增多，动物模型的建立对干眼症的研究起到重要的基础作用，而炎症模型的建立更为重要。我们利用肉毒杆菌B诱导大鼠建立干眼炎症模型，通过观察Lacritin蛋白表达变化为干眼症的诊治提供实验基础。

1 材料与方法

1.1 材料与分组 30只(30眼)健康8周雌性 SD大鼠，体质量200～250 g，随机分为2组，实验组20只，对照组10只。实验组右侧泪腺注射肉毒杆菌B，对照组右侧泪腺注射生理盐水。肉毒杆菌B(美国Elan公司)，泪液检测滤纸条(天津晶明新技术发展有限公司)，抗大鼠肿瘤坏死因子-α单克隆抗体(中杉金桥生物技术有限公司)，羊抗大鼠IL-6单克隆抗体(美国PeproTech公司)，抗鼠Lacritin蛋白抗体(美国Sant Cruz公司)。裂隙灯显微镜(SL-1E，日本 Topcon公司)，荧光显微镜(BX51，日本Olympus公司)。

1.2 方法

1.2.1 动物模型建立 实验组20只大鼠腹腔注射100 g·L－1水合氯醛(4 mL·kg－1)，待动物麻醉后在手术显微镜下暴露泪腺，将大鼠的右侧泪腺注射肉毒杆菌B 0.1 mL(20 mU)，对照组同样方法注射生理盐水 0.1 mL。

1.2.2 泪液分泌试验检查 分别于术前1 d及术后3 d、7 d、14 d、28 d、42 d，将大鼠基础麻醉后检测泪液的分泌，将泪液检测滤纸条置于下睑中外1/3处，5 min后测量变色长度。

1.2.3 荧光素钠染色检查 分别于术前1 d及术后3 d、7 d、14 d、28 d、42 d，使用 10 g·L－1荧光素钠溶液染色，1 min后观察角膜荧光染色并在裂隙灯显微镜下拍照。角膜荧光染色评分采用 Park计分方法［2］:0分:无着色点;1分:点状着色≤1/8象限;2分:1/8象限 ＜点状着色≤1/4象限;3分:1/4象限＜点状着色≤1/2象限;4分:点状着色 ＞1/2象限。……