范雪梅，喻 华，雷永付，周 英，邓 猛，曾凡英，左 艳

(四川省仁寿县人民医院检验科，四川 仁寿 620500)

随着抗菌药物的广泛使用，细菌耐药率日渐上升。为了解本院临床病原菌分布及耐药性特点，指导临床合理使用抗菌药物，笔者对我院2012年1～12月临床标本中分离病原菌进行体外抗菌活性检测，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 标本来源 以2012年1～12月我院住院及门诊患者送检的12708份标本作为分析对象。标本包括痰液、血液、尿液、及其它无菌体液等。每例患者检出标本只计初次分离的1株。

1.2 病原菌鉴定及药敏试验 按《全国临床检验操作规程》的要求对所收集标本进行分离培养，分别置普通温箱，CO2孵箱37℃ 24～48小时。病原菌鉴定及药敏试验采用法国生物梅里埃VITEK2 Compact全自动微生物分析仪及配套的病原菌鉴定及药敏试验卡，按仪器说明分析抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)。药敏纸片来自于OXOID公司。

1.3 质量控制 标准菌株:大肠埃希氏菌ATCC 25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923、铜绿假单胞菌ATCC27853、粪肠球菌ATCC29212和肺炎克雷伯氏菌ATCC700603。在实验条件稳定的条件下实行每周1～2次常规质量控制。

1.4 数据分析 药敏结果判定根据美国临床实验室标准化协会(CLSI)2012年标准。用世界卫生组织细菌耐药性监测网提供的WHONET5.6软件进行数据分析。按照M100-S19规定折点判定耐药(R)、中介(I)和敏感(S)。

2 结果

2.1 病原菌种类及分布 12708份临床标本分离出病原菌2828株，主要来于痰液(890株)、尿液(404株)、血液(787株)，其它无菌体液 715株(25.3%)。其中革兰阳性球菌432株(占15.3%)，革兰阴性杆菌1924株(占68.0%)。革兰阳性球菌中检出最多的为金黄色葡萄球菌204株(7.2%);其次为肠球菌183株(6.5%)，主要以屎肠球菌92株(3.3%)和粪肠球菌81株(2.9%)为主;链球菌属100株(3.5%)。革兰阴性杆菌中肠杆菌科细菌排列前3位的分别是大肠埃希氏菌536株(19.0%)、肺炎克雷伯氏菌328株(11.6%)、阴沟肠杆菌184株(6.5%)。非发酵菌中检出最多的为铜绿假单胞菌348株(12.3%)，其次为鲍曼不动杆菌228株(8.1%)。不同科室病原菌种类有一定差别，内外科以肠杆菌科细菌及葡萄球菌为主，儿科以苛氧菌为主，ICU以非发酵菌为主。

2.2 主要革兰阳性菌对抗菌药物的耐药情况 ①葡萄球菌属:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus，MRSA)检出率为40.6%。未发现耐万古霉素和利奈唑胺的葡萄球菌。204株金黄色葡萄球菌对抗菌药物的的耐药情况见表1。②肠球菌属:屎肠球菌和粪肠球菌对万古霉素耐药率分别为4.8%和1.9%，未发现对利奈唑胺耐药的肠球菌。但屎肠球菌对抗菌药物的耐药率总体情况高于粪肠球菌。两者对不同抗菌药物的耐药情况见表2。③肺炎链球菌:按颅内感染折点判定肺炎链球菌对青霉素G的耐药率为65.6%，对头孢噻肟的耐药率为56.3%;按非颅内感染折点判定，未检出对青霉素G耐药的菌株，对头孢噻肟的耐药率为35.2%。未检出对阿莫西林/克拉维酸、万古霉素、亚胺培南耐药的菌株。

2.3 主要革兰阴性菌对抗菌药物的耐药情况 ①肠杆菌科细菌:各主要肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素高度敏感。大肠埃希氏菌对抗菌药物的耐药率明显高于肺炎克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌;大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌、阴沟肠杆菌对阿米卡星耐药率较低，分别为1.6%、1.4%和2.3%。3种主要肠杆菌科细菌对抗菌药物的敏感率和耐药率见表3。②非发酵菌:铜绿假单胞菌对抗菌药物的耐药率总体上低于鲍曼不动杆菌。铜绿假单胞菌对呋喃妥因耐药率为81.2%，对其余大多数抗菌药物的耐药率均在50%以下。鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物的耐药率均较高，除对阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、庆大霉素的耐药在50%以下，其余抗菌药物耐药率均在50%以上，见表4。③流感嗜血杆菌:流感嗜血杆菌(120株)对氨苄西林的耐药率为66.3%，复方新诺明的耐药率76.8%，利福平的耐药率为42.8%。临床常用的第二代和第三代头孢菌素及喹诺酮类抗生素均未检出耐药株。

表1 204株金黄色葡萄球菌对抗菌药物的耐药情况 (%)

表2 肠球菌属对抗菌药物的敏感率和耐药率 (%)

表3 3种主要肠杆菌科细菌对抗菌药物的敏感率和耐药率 (%)

表4 2种主要非发酵菌对抗生素的敏感率和耐药率 (%)

3 讨论

2012年1～12月我院住院和门诊患者送检的12708份临床标本病原菌阳性率(22.3%)，以及革兰阳性球菌、阴性杆菌检出率与文献报道［1］一致。分离的病原菌以革兰阴性杆菌为主，尤其大肠埃希菌居多。儿科﹑呼吸内科和消化内科标本送检量居前3位。病原菌的分布特点与2010年西南地区病原菌构成比基本一致［2］。药敏结果未发现耐万古霉素和利奈唑胺的葡萄球菌，结果与汪复等［3，4］报道结果一致。尿液标本中，呋喃妥因对屎肠球菌的耐药情况比粪肠球菌的耐药严重，屎肠球菌为38.6%，粪肠球菌为28.6%。肠球菌中屎肠球菌对常用抗生素耐药现象比较严重。对万古霉素的耐药率屎肠球菌为4.8%，粪肠球菌为1.9%，高于2010年全国监测结果［10］，需提高警惕。在颅内感染标本中，肺炎链球菌对青霉素的耐药率较高，这与较长时间使用抗菌药物及抗菌药物滥用有一定关系;三、四代头孢菌素对肠杆菌科细菌敏感率下降，大肠埃希菌对三、四代头孢菌素耐药明显，耐药率在50%以上。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素高度敏感。对含酶抑制剂的复方抗菌药物，如:哌拉西林/他唑巴坦保持了较高的抗菌活性，敏感率均在80%以上。铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药率为42.7%，鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率为53.2%;80%的鲍曼不动杆菌来自ICU，呈多重耐药，与文献中报道［9］的一致。一些长期使用的药物，如氯霉素、呋喃妥因对部分细菌仍保持较高抗菌活性;喹诺酮类对社区感染细菌(如:流感嗜血杆菌、肺炎链球菌)具有良好抗菌活性。大环内酯类对葡萄球菌、肺炎链球菌抗菌活性差，耐药率多超过70%;糖肽类药物和利奈唑胺对革兰阳性菌作用良好，尚未发现对万古霉素耐药的葡萄球菌和对利奈唑胺耐药的革兰阳性菌，但已出现对万古霉素耐药的肠球菌。

以上对我院医院感染抗菌活性分析显示，当前控制医院感染耐药菌，合理使用抗菌药物已经成为控制医院感染的主要任务。主要包括加强医务人员的手卫生，严格实施隔离措施，切实遵守无菌技术操作规程，加强医院环境卫生管理;加强抗菌药物的合理应用，严格执行抗菌药物临床应用的基本原则，正确、合理地实施抗菌药物给药方案，加强抗菌药物临床合理应用的管理，减少或者延缓多药耐药菌的产生［5～8］。

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