酪氨酸激酶受体、多药耐药基因1蛋白和增殖细胞核抗原在小鼠心脏不同部位的表达
2014-09-13李红军李勇莉王杰玉李晋雪王国栋高福莲
李红军 李勇莉 刘 栋 王杰玉 李晋雪 王国栋 高福莲
(新乡医学院第一附属医院心内科,河南 新乡 453003)
哺乳动物的心脏有内在修复和再生的潜力〔1〕,无论在正常还是病理情况下均有心肌细胞处于分裂周期。心肌干细胞(CSCs)是多能干细胞,存在于成体心脏的、具有高度自我更新和特异性心肌分化、增殖能力的未分化细胞,具有酪氨酸激酶受体(c-Kit)、多药耐药基因1蛋白(MDR1)和干细胞抗原(Sca-1)等多能干细胞的表面标志,谱系标记物阴性。有研究证实经静脉注射有些细胞因子于急性心肌梗死的小鼠后,CSCs在外周血和心肌梗死区增多,参与心肌修复〔2〕,应用CSCs治疗心肌梗死成为心血管病领域的研究热点〔3〕。本研究通过检测小鼠成体固有心房、心耳、左心室、右心室和室间隔c-Kit、MDR1、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,探讨这些部位的c-Kit、MDR1、PCNA的表达有无差异。
1 材料和方法
1.1实验动物 近交系BALB/C 6只,雌性,体重38~40 g,来源于国家啮齿类实验动物种子中心上海分中心,SPF级。
1.2主要试剂与仪器 兔抗人c-Kit多克隆抗体、鼠抗人PCNA单克隆抗体、即用型SABC免疫组化染色试剂盒和DAB显色试剂盒均购自武汉Boster公司,多聚赖氨酸购自北京中杉金桥生物技术有限公司,兔抗人MDR1多克隆抗体购自美国Santa Cruz公司,BH2直立光照照相系统由日本Olympus公司提供,HPIAS-10009增强型病理图文分析系统购自郑州太阳电子科技公司。
1.3实验方法
1.3.1石蜡切片的制作 速眠新(0.5 ml/kg)腹腔注射麻醉小鼠,开胸摘除心脏,从房室交界切开将心脏分为心室和心房2部分。4%多聚甲醛4℃固定48 h,常规脱水、透明、石蜡包埋,包埋面为房室交界切面。……
