甘肃党参水煎剂对D-半乳糖所致衰老小鼠脾脏细胞抗氧化作用及DNA损伤的影响
2014-09-13舍雅莉
何 敏 舍雅莉 侯 茜 郭 美 王 岚 张 帆
(甘肃中医学院系统生物学与中医药转化研究所 中西医结合基础学科重点实验室,甘肃 兰州 730000)
中药党参是我国常用的传统补益药,其药理学功能有延缓衰老,抗氧化,调节肠道微生态平衡,影响免疫器官的重量,调控细胞因子,降低血脂,调节体液免疫,促进淋巴细胞增殖,影响单核巨噬细胞,促进造血功能等〔1,2〕。有研究表明甘肃党参水提物可能通过提高机体免疫功能,清除衰老机体产生过多的自由基,抗脂质过氧化而起到延缓衰老的作用〔3〕。本实验研究甘肃党参水煎剂对D-半乳糖致衰老小鼠脾脏细胞抗氧化和DNA损伤的保护作用。
1 材料与方法
1.1实验动物 昆明种小鼠60只,雄性,体重(20±2)g,SPF级,由甘肃中医学院科研实验中心提供。
1.2药品与试剂与仪器 党参:素花党参(甘肃文县产,由甘肃中医学院药学系靳玲副教授鉴定),制成含生药浓度为1 g/ml的水煎剂,置4℃备用。D-半乳糖:上海中秦有限公司(批号:20120104),超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒、丙二醛(MDA)试剂盒(货号:分别为A 001-1、A 005、A 002南京建成生物工程研究所提供)。PI染液、正常熔点琼脂糖、低熔点琼脂糖,1%月桂酸肌氨酸钠、蛋白酶K、Tris、均购自美国Sigma公司;Na2EDTA购自瑞士Fluka &RDH 公司,其他试剂均为国产分析纯。Feb-80台式高速离心机:金坛市恒丰仪器厂;756 MC型分光光度计:上海第三分析仪器厂;水浴箱(ZHWY-110X30),电泳槽和电泳仪:(BIO-RAD);荧光显微镜(日本OLYMPUS-IX51)。
1.3方法 60只小鼠,随机分为正常组,模型组,党参低剂量、高剂量组,维生素E组,每组12只。正常组皮下注射0.9%生理盐水0.25 ml/10 g,其余各组每日颈背部皮下注射5%D-半乳糖0.25 ml/10 g,连续注射10 d。……
