张宝辉 方秀斌 刘晓湘

(中国医科大学神经生物学教研室，辽宁 沈阳 110001)

支气管哮喘发病机制复杂，多种细胞因子在气道炎症发展过程中起重要作用。驱动蛋白(Kinesin)-1在膜性细胞器的运输、有丝分裂、减数分裂、信号转导、微管多聚体的动力学控制、mRNA和蛋白质的运输等方面起着重要作用〔1〕，人类的多种疾病都表现出了驱动蛋白表达异常。研究发现，在人体内，驱动结合蛋白基因的5’端融合到ret基因表达酪氨酸激酶的区域，能够导致甲状腺细胞癌变〔2〕；有研究报道，驱动结合蛋白是白塞病(BD)的相关抗原，因此抗驱动结合蛋白抗体与BD发病机制密切相关，值得深入探索〔3〕。Fridolfsson等〔4〕研究表明驱动结合蛋白可能是再生障碍性贫血病人的自身抗原之一。但是，Kinesin-1在哮喘小鼠C7～T5节段脊髓后角内的表达是否发生变化尚未见文献报道。本研究拟探讨采用免疫荧光和Western印迹方法检测各组小鼠C7～T5节段脊髓后角内kinesin-1的表达变化。

1 材料和方法

1.1实验动物分组及模型制备 雌性BALB/c小鼠20只，由首都医科大学实验动物中心提供。按随机数字表法分为:(1)哮喘组10只，第1天每只小鼠腹腔注射20 μg卵蛋白(OVA)(Sigma公司)和2 mg氢氧化铝混合于0.5 ml PBS中，第8天、15天每只小鼠腹腔注射10 μg OVA和1 mg氢氧化铝混合于0.5 ml PBS中，第16天开始将小鼠置于封闭容器中，给予4% OVA(PBS配成)雾化吸入激发哮喘发作，每天1次，25 min/次，连续7 d。 (2)正常对照组，以PBS代替OVA注射和雾化吸入，其余均与哮喘组相同。各组最后一次激发后24 h处死。

1.2AniRes2005肺功能仪测气道反应性 用0.4%的戊巴比妥钠腹腔麻醉小鼠(80 mg/kg)，疼痛反射消失后固定在小鼠体描箱内操作台上，气管插管，呼吸比15∶10，呼吸频率90次/min，游离颈外静脉，行静脉穿刺，固定针柄，封闭体描箱。……