针刺对颅脑损伤模型大鼠脑组织神经生长因子、脑源性神经营养因子表达的影响
2014-09-13张毅敏程少冰江书婷戴求福
张毅敏 程少冰 声 鑫 江书婷 戴求福
(暨南大学,广东 广州 510632)
创伤性脑损伤(TBI)后神经功能修复〔1〕,直接关系到患者的预后与生存质量。目前利用神经干细胞修复颅脑损伤已成为国内外生物及医学研究的热点〔2〕。临床资料表明,针刺对颅脑损伤患者催醒及神经功能恢复有显著的疗效〔3〕。本研究采用脑挫伤大鼠动物模型,观察针刺对颅脑损伤模型大鼠神经生长因子(NGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,探讨针刺促进颅脑损伤后神经再生、治疗TBI的可能作用机制。
1 材料与方法
1.1动物 SPF级雄性SD大鼠共30只,体重(280±30)g,鼠龄42 d,由广州中医药大学动物实验中心提供,动物合格证号:0067955。本实验在广州中医药大学清洁级动物实验室完成。
1.2药品及主要试剂 NGF、BDNF免疫组化检测试剂盒(德国宝灵曼公司产品,购自武汉博士德生物工程有限公司)。针具为 “华佗牌”一次性26号、1寸针灸针。
1.3主要仪器 RM2025切片机(自LEICA公司)、EG1140H包埋机。Olympus BX50F-3双目显微镜(附件自动照相装置Nikon E990,日本产)。计算机图像分析系统(GM-2000B生物医学图像分析系统 北京航空航天大学出品)。
1.4动物造模及分组 所有大鼠随机分为假手术组,模型组,针刺组,每组10只。所有大鼠称重后腹腔注射10 g/L的戊巴比妥钠(30 mg/kg),麻醉成功后参照自由落体冲击造模法〔4〕:沿颅骨正中线纵行切开头皮,分离至颅骨,于矢状缝左旁2 mm,冠状缝后2 mm处,用牙科钻钻开颅骨,以此为中心,用蚊式血管钳咬开直径约4 mm圆形骨窗,深度至硬脑膜,保持硬脑膜完整。模型针刺组用致伤力度为25 g小锤从25 cm高度自由落下,打击置于硬脑膜上的直径为3 mm的圆柱体,造成左侧大脑皮质局限性脑挫裂伤,然后将动物缝合头皮。……
