王宇峰 张立娜 王洪峰

(长春中医药大学，吉林 长春 130117)

重症肌无力(MG)是一种以神经肌肉接头(NMJ)处传递功能障碍为主要病理改变的获得性自身免疫性疾病，主要由于NMJ突触后膜上乙酰胆碱受体(AchR)受损引起。其主要临床表现为部分或全身骨骼肌无力和极易疲劳，活动后症状加重，经休息和胆碱酯酶抑制剂(ChEI)治疗后症状减轻〔1〕。中医学认为MG属于“痿证”的范畴，患者以脾气虚弱、肾阳不足为主要病机，笔者以温阳补气为主要治疗原则，采用针灸疗法治疗本病取得了良好的临床疗效。为进一步研究“温阳补气”针法治疗MG的作用机制，本研究采用国际公认的免疫接种法建立实验性自身免疫性MG(EAMG)大鼠动物模型，观察该针法对EAMG大鼠NMJ处AchR表达水平的影响。

1 材料与方法

1.1实验动物 SPF三级Lewis大鼠80只，雌性，6～8 w龄，平均体质量(154±7.4)g，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，合格证号码：SCXK(沪)2007-0005，检疫后送至长春中医药大学实验动物中心，标准大鼠颗粒饲料喂养。

1.2主要试剂和仪器 AchRα1 129-145多肽片段(美国Sigma公司)，大鼠AchR-Ab、AchR ELISA 检测试剂盒(上海研辉生物科技有限公司)，溴吡斯的明(60 mg/片，上海三维制药有限公司)，艾绒(南阳绿莹艾草生物制品有限公司)。

1.3大鼠EAMG模型建立方法 选取SPF级Lewis大鼠70只，采用免疫接种法建立EAMG大鼠动物模型。将AchRα1 129～145多肽片段按照1∶2的比例与CFA完全乳化，配比按照200 μl溶液内含有50 μg片段，不足部分用pH7.4的磷酸盐缓冲液(PBS)定容至20 ml，充分混匀制成免疫乳剂，取一滴乳剂滴入水中呈现球形而不分散为乳化好的标志。首次免疫接种时，将上述抗原乳剂以300 μl/只(含AchRα1 129～145∶75 μg)多点注射于大鼠四只足垫部、尾根部、背部。……