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灵芝孢子粉干预对癫痫大鼠脑组织病理改变、Cu2+、Zn2+变化的影响

2014-09-13于海波于海涛王淑秋王伟群贾琳琳

中国老年学杂志 2014年21期
关键词:海马癫痫

李 晶 于海波 于海涛 王淑秋 王伟群 贾琳琳

(佳木斯大学基础医学院生理教研室,黑龙江 佳木斯 154007)

癫痫形成与神经元坏死、凋亡和继之的神经元网络重组有关〔1〕。微量元素代谢异常和癫痫也有密切关系。本研究观察灵芝孢子粉对戊四氮致痫大鼠脑组织病理变化、Cu2+、Zn2+含量的影响。

1 材料和方法

1.1实验材料 戊四氮(PTZ,美国Sigma公司,10 g/L溶液双蒸水配制);灵芝孢子粉(佳木斯市野生灵芝种植基地,30 g/L溶液双蒸水配制);AA-6601F原子吸收分光光度计(日本岛津);元素空心阴极灯(北京有色金属有限公司);电动玻璃匀浆机(宁波新芝科器研究所);JA型电子精密天平(上海衡平科学仪器有限公司);80-2离心机(上海手术器械厂);0.01 mol/L柠檬酸缓冲液、0.01 mol/L PBS缓冲液(pH 7.2~7.4)、粘片剂多聚赖氨酸(POLY-LYSIN)(武汉博士德公司);铜、锌、优级纯标准品(天津科密欧)。

1.2实验方法 30只雄性Wistar大鼠,10周龄,佳木斯大学实验动物中心,黑动字第99102001号; 随机分成正常组(生理盐水腹腔注射+生理盐水灌胃)各10只;模型组(PTZ腹腔注射+生理盐水灌胃);用药组(PTZ腹腔注射+灵芝孢子粉灌胃)。32 mg/kg为PTZ腹腔注射剂量(亚惊厥剂量),150 mg/kg为灵芝孢子粉灌胃剂量。每天上午11∶00进行,1次/d(灌胃前禁食6 h,持续28 d)。

1.3脑组织病理变化 脑组织10%甲醛中固定约24 h、石蜡包埋及切片,制备防脱玻片,常规HE染色,光镜下观察双侧海马、大脑皮质的病理变化。

1.4微量元素Cu2+、Zn2+变化 断头处死大鼠,并迅速取脑(分离出皮质、海马、下丘脑)。80 ℃干燥至恒重,准确称重,用硝酸和高氯酸消化、定容后,用原子吸收分光光度计测定。测量的精确度为1%吸收浓度(ppm),0.08 A(吸光度),本身测定误差范围是<2%吸收浓度(ppm)。并用试剂空白对照。

1.5统计学处理 采用SPSS软件行方差分析和t检验。……

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