缝隙连接蛋白-43在膀胱出口部分梗阻的大鼠逼尿肌细胞膜中的表达
2014-09-13王志勇彭伟彬王泽民宋殿宾周逢海
迟 强 王志勇 刘 英 彭伟彬 王泽民 宋殿宾 周逢海
(承德医学院附属医院泌尿外科,河北 承德 067000)
在心血管疾病的基础研究中发现缝隙连接介导的细胞间通讯参与了细胞间的兴奋传导〔1〕。缝隙连接介导的细胞间通讯直接参与相邻细胞间神经信号的传收缩方面发挥重要作用〔2~4〕。Haefliger等〔5,6〕通过实验发现缝隙连接蛋白-43(Cx-43)是大鼠逼尿肌细胞中重要的连蛋白。在人类的逼尿肌细胞中同样发现了Cx-43与Cx-45。在一项关于排尿功能障碍的研究中发现Cx-43在逼尿肌中的表达发生改变。Fry等〔7,8〕指出逼尿肌的兴奋依赖于缝隙连接的存在。本实验探讨膀胱出口部分梗阻(P-BOO)的大鼠逼尿肌细胞膜上缝隙连接和Cx-43表达的变化。
1 材料与方法
1.1P-BOO动物模型的建立 33只10周龄雌性Wistar大鼠,体重170~260 g,均由北京维通利华实验动物有限公司提供〔动物合格证SCXK(京)2007-0009、SPF级〕。随机分为两组:模型组中造模后2 w处死6只;造模后4 w处死6只;造模后8 w处死6只。假手术组中2 w处死5只;4 w处死5只;8 w处死5只。上述各组大鼠处死后取膀胱逼尿肌组织进行后期实验。P-BOO动物模型的建立参照Mattiasson等〔9,10〕的造模方法。大鼠通过腹腔注射25%乌拉坦(1 g/kg)麻醉后,用硬膜外导管(直径1 mm)经尿道插入膀胱,小心游离尿道,游离至近膀胱颈口处,4-0 PGLA医用可吸收丝线结扎近膀胱颈口处尿道,结扎松紧度以线结刚靠近尿道为宜,拔出导管,缝合皮肤。假手术组操作同上,但不结扎尿道。
1.2排尿压测定 将实验大鼠,25%乌拉坦(1 g/kg)腹腔注射麻醉〔11〕,仰卧固定,用硬膜外导管(直径1 mm)经尿道插入膀胱,硬膜外导管接经三通管与尿动力仪及微量泵(UDS-600,加拿大)相连。……
