王双双 王丽丽 杨升华 孔根现 蒋知新

(南方医科大学研究生学院，广东 广州 510515)

在前期工作中，本课题组通过液氮冻伤术结合高脂饮食喂养成功创建了一种操作简单、动物死亡率低、成模满意的与人类斑块相似的动脉粥样硬化(AS)易损/破裂斑块(VP)及血栓模型〔1〕。但在后期实验中发现，该方法高脂饮食饲养时间长(10～12 w达到肉眼明显斑块)，易造成动物疾病与死亡。本实验中，对该造模方法进行改良，进一步缩短成模时间，以降低饲养成本。

1 材料和方法

1.1实验动物 SPF级雄性新西兰大白兔24只，体重2.25～2.5 kg，由北京绿洲动物中心提供〔许可证号：SCXK(京)2009-0013〕。

1.2试剂与仪器 高敏C反应蛋白(hs-CRP)酶联管免疫吸附(ELISA)试剂盒购自上海蓝基科技有限公司；基质金属蛋白酶(MMP)-1单克隆抗体及SP超敏试剂盒购自北京冰达生物科技有限公司；高脂饲料(含1% 胆固醇、3%大油、15% 蛋黄和81% 普通饲料)购自北京科澳协力饲料有限公司〔许可证号: SCXK(京)2005- 0007〕；全自动生化分析仪DXC800购自美国贝克曼公司。

1.3方法

1.3.1兔颈动脉内膜液氮冻伤术 参照文献〔1〕，兔耳缘静脉注射3%戊巴比妥钠(30 mg/kg)麻醉，无菌条件下作颈正中切口，分离右颈总动脉，两端以动脉夹阻断血流，24号静脉留置针45倾斜刺入右颈总动脉，刺入后抽出针芯，生理盐水冲洗置换出血管内的血液后抽空血管腔。无菌注射器抽取液氮快速注入右颈总动脉，重复3～5次，每次向外抽出少量静脉留置针管以更换冻伤部位，历时约3 min以造成血管内皮冻伤，放开动脉夹恢复血流，压迫止血，3 d内常规使用抗生素预防感染。……