慢性阻塞性肺疾病患者诱导痰内树突细胞及趋化因子受体6水平与FEV1%的相关性
2014-09-13符丹丹欧阳瑶薛令合
符丹丹 欧阳瑶 薛令合
(遵义医学院附属医院呼吸一科,贵州 遵义 563000)
慢性阻塞性肺病(COPD)发病机制与患者气管或支气管的炎症反应联系紧密〔1〕。在气道的炎症反应里,CC趋化因子配体(CCL)20可发挥介导树突细胞(DCs)的迁徙成熟,同时聚集在气道的上皮黏膜等作用。而CCR6是CCL20的相关受体,通常表达于并未成熟的DCs,能够趋化表达机体CCR6的细胞朝抗原产生的组织部位进行定向迁徙〔2〕。本文将CD40和CD86作为DCs的有关表面标志,探讨其与第1秒用力呼气容积(FEV1)占预计值百分比(FEV1%)的相关性。
1 资料和方法
1.1临床资料 选择2008年1月到2009年3月在我院进行住院治疗的患者51例作为研究对象,男42例,女9例,年龄60~86〔平均(72.3±2.4)〕岁。参考《根据2007版COPD全球倡议(GOLD)评价》〔3〕将患者依照病情的轻重程度分为无吸烟组5例,年龄60~81〔平均(71.9±1.9)〕岁;吸烟但无COPD组5例,年龄60~80〔平均(71.7±2.2)岁;GOLDⅠ组11例,年龄61~79〔平均(68.9±7.4)〕岁;GOLDⅡ组17例,年龄62~78〔平均(68.7±6.3)〕岁。GOLDⅢ~Ⅳ组13例,年龄60~77〔平均(72.9±6.5)〕岁。患者入院当天即可采集数据资料,并对COPD患者的疾病严重程度实施临床评估。
1.2研究方法
1.2.1指标检测 主要试剂:(1)美国BD公司的抗人CD40的单抗-PE标记;(2)美国BD公司的抗人CD86的单抗-异硫氰酸荧光素(FITC)标记;(3)上海锐通公司和美国IND公司的CCR6试剂盒。经氧气雾化吸入法对受试者诱导痰进行收集,选择改良pin法和常用梯度的高渗盐水法。其中试剂配制为3%和4%以及5%的高渗盐水,0.1%二硫苏糖醇(DTT)。
1.2.2痰液处理 (1)称重痰液,加进2倍体积0.1%DTT混合均匀,并置于漩涡振荡器内混匀;(2)放置在37℃的恒温水浴箱内孵育和振荡约30 min,而后加入和DTT相等体积的磷酸盐缓冲液(PBS)液,水浴震荡约5 min;……
