白细胞介素-6基因-634C/G多态性与冠心病的相关性及其对血脂的影响
2014-09-13黄彩凤
程 辉 江 庆 黄彩凤 蔡 鑫
(安庆市第一人民医院心内科,安徽 安庆 246003)
白细胞介素-6(IL-6)作为重要的炎症因子,可直接或间接作用于冠心病(CHD)的发生与发展。据此IL-6基因也就成为多种CHD发病候选基因中的一种〔1〕。有研究发现,IL-6基因启动子区存在-634C/G多态性,这种基因多态性的存在很可能导致IL-6的基因转录和表达水平在个体间有差异,从而影响IL-6的生物学水平及其作用。本文旨在研究IL-6基因启动子区-634C/G多态性与CHD的关系及其对血脂的影响。
1 对象与方法
1.1研究对象 蚌埠医学院第一附属医院2009年5月至2010年6月心内科住院患者,CHD组120例,心肌梗死者63例,心绞痛者57例,其中男70例,女50例,年龄(61.45±10.52)岁,CHD经冠状动脉造影检查证实,以管腔直径狭窄≥50%为有意义的病变,心绞痛组与心肌梗死组年龄及性别无统计学差异(P>0.05)。健康对照组100例,男58例,女42例,年龄(58.69±12.45)岁,为年龄、性别与CHD组相匹配的同时间段在蚌埠医学院第一附属医院门诊体检的健康人群,均无CHD史。各组受检者均为无血缘关系的中国汉族人。校正了合并呼吸系统、内分泌系统、风湿性疾病及严重肝、肾功能不全患者的影响。
1.2研究方法
1.2.1基因组DNA的抽提 取外周静脉血2 ml,采用全血基因组DNA提取盒(大连宝生物工程有限公司)提取人白细胞基因组DNA。
1.2.2引物的合成与设计 参照文献〔2〕设计引物,由上海生工有限公司合成。 IL-6-634C/G引物序列为,上游引物: 5'-GAGACGCCTTGAAGTAACTG-3', 下游引物: 5'-AACCAAAGATGTTCTGAACTGA-3'。
1.2.3PCR扩增条件 IL-6的PCR扩增反应体系均为25 μl,其中含10×PCR缓冲液2.5 μl;2.5 mmol/L dNTPs 2.0 μl;20 μmol/L上、下游引物各1 μl;模板DNA 4.0 μl;Taq DNA聚合酶1.25 U;不足体积用灭菌双蒸水补足至25 μl。置PCR仪中94℃预变性5 min。按……
