潘亮亮 白光振 强晓菲 张政伟 赵正源

(武警后勤学院附属医院胸外科，天津 300162)

葛根素药理作用广泛，具有调节血管收缩与舒张、降血糖、提高免疫力及抗肿瘤等功能〔1～3〕。前期研究表明，葛根素能抑制人小细胞肺癌H446细胞的生长和增殖，抑制作用呈浓度依赖性〔4〕，但仅局限于体外研究。本研究探讨葛根素对荷瘤小鼠血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素(IL)-2水平与基质金属蛋白酶(MMP-2)、-9蛋白表达的影响，初步揭示其体内抗Lewis肺癌作用的分子机制。

1 材料与方法

1.1试药 葛根素，中国药品生物制品检定所(批号：201011)；环磷酰胺，江苏恒瑞医药股份有限公司(批号：1204172)；TNF-α、IL-2检测试剂盒，南京建成生物技术有限公司；MMP-2、MMP-9多克隆抗体，美国Sigma公司；其余试剂为国产分析纯。

1.2实验动物与瘤株 SPF级昆明种小鼠50只，8周龄，体重18～22 g，由天津大学实验动物中心提供，适应性饲养1 w后进行实验。Lewis 肺癌购买于北京协和医科大学细胞库。

1.3仪器 酶标仪，美国Bio-Tek公司；蛋白印迹电泳系统，美国Bio-Rad公司；倒置相差显微镜，日本Olympus公司；低温超高速离心机，德国Eppendorf公司；超低温冰箱，日本Sanyo公司。

1.4方法

1.4.1模型制备及分组 脱颈椎处死接种Lewis肺癌细胞14 d的荷瘤小鼠，冰浴无菌条件下剥离肿瘤组织，按1∶3 比例制成细胞悬液，筛网滤过，调细胞数为l×107个/ml。50只小鼠，雌雄各半，随机分为模型组、环磷酰胺(20 mg/kg)组、葛根素低、中、高剂量(50、100、200 mg/kg)组。肿瘤匀浆液常规方法接种在小鼠右前肢腋窝下，每只接种0.2 ml，于接种后第2天给药，隔日给药1次，连续给药21 d。

1.4.2抑瘤作用评价 末次给药24 h后，眼球取血，分离血清，按照试剂盒操作指南测定各组TNF-α和IL-2含量。……