杨宏武 楼小亮 胡雪勇 李晓萍 周征成 席秋江

(南昌大学第四附属医院神经内科，江西 南昌 330003)

传统观点认为，神经细胞不能再生，但越来越多的研究发现，成年哺乳动物脑组织中广泛存在神经干细胞(NSC)，且具有多向分化潜能及自我更新的特性〔1,2〕。Nestin为第Ⅵ类中间丝蛋白，为大多数增生活跃的神经前体细胞表达，故被认为是NSC或神经前体细胞的标志之一〔3〕。本实验通过TTC染色测定脑缺血后大鼠梗死体积以及采用免疫组化法测定不同时间点BrdU阳性细胞及Nestin的表达，进一步来探讨缺血性脑卒中后NSC的增殖、分化情况及神经功能重建研究，了解脑心通胶囊是否能激活NSC，为缺血性脑血管病的治疗提供新思路。

1 材料与方法

1.1实验动物与分组 选用健康雄性SD大鼠，体重250～300 g，鼠龄7～8 w，购自北京华阜康生物科技有限公司，SPF级〔合格证号：scxk(京)2009-0004〕。实验分两部分进行：第一部分TTC染色及脑梗死体积测定，第二部分为BrdU及Nestin免疫组化。每一部分实验使用SD大鼠68只，随机分成四组：假手术组(8只)；MCAO模型组(20只)；MCAO+脑心通胶囊低剂量组(20只)；MCAO+脑心通胶囊高剂量组(20只)，两部分实验分组相同。每组再按照脑缺血再灌注(IR)后第3天、第7天、第14天和第21天分为四个时间点，模型组、脑心通低剂量组和脑心通高剂量组每个时间点各5只SD大鼠，而假手术组作为对照组，因不造成大脑中动脉闭塞(MCAO)，故每个时间点各2只SD大鼠。

1.2动物模型制作 参照Koizumi等〔4〕线栓法并进行部分改良，使用购买的特制MCAO线栓(北京沙东生物技术有限公司)，具体如下……