黄 彦 梁月屏 廖壮文 吕浩然 谢楚海

(广州医科大学附属第二医院骨外科，广东 广州 510260)

骨关节炎(OA)是一种以关节软骨的变性、破坏及骨质增生为特征的慢性关节病〔1〕。关节软骨细胞的过度凋亡是OA发病的重要病理机制，而软骨细胞的凋亡与线粒体关系密切，线粒体转录因子A(TFAM)是线粒体转录和复制的关键激活子，与细胞凋亡过程相逆〔2〕。本研究分析膝关节骨关节炎患者、正常关节软骨细胞的线粒体DNA特征和TFAM表达的差异情况，以期阐明TFAM与OA发生、发展的关系。

1 资料与方法

1.1病例资料 选择我院2011年10月至2012年10月的膝关节OA患者20例，入选OA组，同时设立因关节矫形等手术剩余的正常关节软骨组织细胞20例。诊断标准：参照中华医学会骨科学分会制定的OA诊治指南(2007年版)的诊断标准〔3〕。纳入标准：①女性患者，绝经1 年以上, 年龄55～65岁; ②符合上述的诊断标准； ③能够收集到较为齐全的相关资料者并签署知情同意书；④研究前患者均签订知情同意书。排除标准：①继发性膝骨关节炎患者；②6个月内服用过影响骨代谢药物的患者；③合并严重心、肝、肾以及其他系统疾病者,精神病及肿瘤患者；④不同意和配合进行研究的患者。

1.2收集样本和建立软骨细胞的体外培养体系

1.2.1关节软骨的收集 取膝OA关节置换手术中取下关节软骨。取下的软骨组织置于含青霉素钠/链霉素双抗PBS液的无菌培养皿中，漂洗去除血细胞和关节滑液，清除滑膜组织。最后在含双抗液的PBS液的无菌培养皿中用眼科剪将软骨组织剪成1～3 mm大小的组织碎块，注意使标本保持湿润状态。……