结直肠癌组织中TAZ表达与Bcl-2、Bax、Caspase-3的关系及临床意义
2014-09-13冯俊伟张志勇王爱军王红钰徐晋珩郑宝军
冯俊伟 张志勇 王爱军 王红钰 徐晋珩 吴 肖 程 健 张 超 郑宝军 施 华
(唐山市工人医院肿瘤外科, 河北 唐山 063000)
结直肠癌无特异性临床表现,且侵袭转移快,患者症状明显就诊时往往已处于晚期,预后很差。TAZ是新近发现的一种转录共激活因子,具有导致细胞癌变、促进肿瘤细胞侵袭、参与肿瘤耐药等多种功能〔1~3〕。也有研究发现TAZ蛋白在结直肠癌中的表达增高〔4〕,但有关TAZ的临床意义及与肿瘤细胞凋亡关系的研究还不多见。本研究拟分析TAZ蛋白与结直肠癌临床病理、Bcl-2、Bax、Caspase-3的关系,为探索TAE蛋白在结直肠癌中的作用提供依据。
1 材料与方法
1.1一般资料 选取2010年1月至2013年12月在我科手术的结直肠癌患者96例,其中50例有癌旁组织标本,所有患者的石蜡切片均经术后病理证实。患者均有完整的临床病理资料,术前均未接受放化疗、靶向治疗、生物治疗等影响肿瘤的治疗。其中男68例,女28例,年龄31~77〔平均(58.2±18.6)〕岁。兔抗人TAZ、Bax、Caspase-3多克隆抗体、鼠抗人Bcl-2单克隆抗体均为美国Santa Cruz公司产品,免疫组化试剂盒购自福建迈新生物技术公司。
1.2方法
1.2.1免疫组化染色 石蜡包埋标本4 μm连续切片,切片常规脱蜡至水,缓冲液冲洗后置于3%过氧化氢孵育10~15 min、蒸馏水冲洗,以磷酸盐缓冲液(PBS)浸泡5 min后抗原修复。以正常山羊血清封闭10 min,加入一抗、孵育1.5 h。冲洗后依次加生物素标记二抗工作液、辣根酶标记链霉卵白素工作液37℃ 孵育30 min。缓冲液冲洗、二氨基联苯胺(DAB)显色,复染、脱水、透明,最后中性树脂封片。
1.2.2结果判断 切片结果由两位病理专业医师双盲阅片。……
